β内酰胺类抗生素颜反应快速鉴别系统(讲义北京修改1)

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1、 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素快速鉴别系统快速鉴别系统快速鉴别系统快速鉴别系统 内酰胺类抗生素的结构特点和分类内酰胺类抗生素的结构特点和分类内酰胺类抗生素的结构特点和分类内酰胺类抗生素的结构特点和分类 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路总体思路总体思路总体思路 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的具体方法与步骤具体方法与步骤具体方法与步骤具体方法与步骤 内酰胺类抗生素的内酰胺类抗生素的内酰胺

2、类抗生素的内酰胺类抗生素的操作要点及注意操作要点及注意操作要点及注意操作要点及注意事项事项事项事项uu 内酰胺类抗生素包含的品种较多,剂型几乎内酰胺类抗生素包含的品种较多,剂型几乎内酰胺类抗生素包含的品种较多,剂型几乎内酰胺类抗生素包含的品种较多,剂型几乎覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。内酰胺类抗生素的结构特点(共性)内酰胺类抗生素的结构特点(共性)母核含有四元母核含有四元-内酰胺环。内酰胺环。结构分类结构分类 u-内内酰酰胺胺类类药药物物按按骈骈合合环环可可分分为为青青霉霉

3、素素(骈骈合合五五元元氢氢化化噻噻唑唑环环)、头头孢孢菌菌素素(骈骈合合六六元元氢氢化化噻噻嗪嗪环环)及及碳碳青青霉霉烯烯类类三三类类。青霉素类青霉素类头孢菌素类头孢菌素类碳青霉烯类碳青霉烯类uu采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分-内酰胺类抗生素与其他药物,且根据颜色的内酰胺类抗生素与其他药物,且根据颜色的内酰胺类抗生素与其他药物,且根据颜色的内酰胺类抗生素与其他药物,且根据颜色的差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物差异快速区分青霉素类与

4、头孢菌素药物差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物可疑的可疑的-内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应假药假药-内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素青霉素类青霉素类 头孢类头孢类深红色深红色 桔红色桔红色(一)呈色反应(一)呈色反应1. 1. 羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应呈色呈色内酰胺类内酰胺类NaOHNaOHH2NOH羟肟酸衍生物羟肟酸衍生物H+Fe3+羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应H+Fe3+/3 (红、棕、褐)(红、棕、褐)(开环分解开环分解)似肽似肽键键双缩脲反应双缩脲反应 -内酰胺类内酰胺类内酰胺类内酰胺类碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜- -b b碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应蓝紫蓝紫蓝紫蓝紫碱

5、性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应蓝紫色蓝紫色内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素口服制剂口服制剂注射用粉针剂注射用粉针剂片剂、胶囊片剂、胶囊颗粒剂、干混悬剂颗粒剂、干混悬剂制制 剂剂 分分 类类按辅料不同按辅料不同内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素片剂、胶囊片剂、胶囊注射用粉针剂注射用粉针剂辅料成分简单、干扰小辅料成分简单、干扰小制制 剂剂 特特 点点u几乎不含辅料或几乎不含辅料或u仅含少量助溶剂,仅含少量助溶剂,u如精氨酸、碳酸钠如精氨酸、碳酸钠颗粒剂颗粒剂干混悬剂干混悬剂辅料辅料含量多、成分复杂、干扰大含量多、成分复杂、干扰大主药含量少主药含量少辅料成分多辅料成分多头头孢孢氨氨苄苄颗颗粒粒【规格规格】0.

6、125g 0.05g香香 精精色色 素素严严重重干干扰扰颜颜色色反反应应结结果果 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素快快 检检 系系 统统 方方 法法 分分 类类 按制剂中辅料的多少及种类分为三类:按制剂中辅料的多少及种类分为三类:按制剂中辅料的多少及种类分为三类:按制剂中辅料的多少及种类分为三类:uu注射用粉针剂:几乎不含辅料或仅含少量助溶注射用粉针剂:几乎不含辅料或仅含少量助溶注射用粉针剂:几乎不含辅料或仅含少量助溶注射用粉针剂:几乎不含辅料或仅含少量助溶剂,如精氨酸、碳酸钠剂,如精氨酸、碳酸钠剂,如精氨酸、碳酸钠剂,如精氨酸、碳酸钠uu片剂、胶囊:辅料成分简单、干扰小片剂、胶囊:辅料成分简单、

7、干扰小片剂、胶囊:辅料成分简单、干扰小片剂、胶囊:辅料成分简单、干扰小uu颗粒剂、干混悬剂:辅料含量多、成分复杂、颗粒剂、干混悬剂:辅料含量多、成分复杂、颗粒剂、干混悬剂:辅料含量多、成分复杂、颗粒剂、干混悬剂:辅料含量多、成分复杂、干扰大干扰大干扰大干扰大注注射射用用粉粉针针青霉素类青霉素类头孢菌素类头孢菌素类碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应三氯化铁反应H-033H-033颜色反应鉴别颜色反应鉴别薄层色谱系统薄层色谱系统碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应三氯化铁反应H-036内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路羟肟酸铁反应羟肟酸铁

8、反应片片剂剂青霉素类青霉素类头孢菌素类头孢菌素类羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应三氯化铁反应H-033H-036颜色反应鉴别颜色反应鉴别薄层色谱系统薄层色谱系统碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应三氯化铁反应H-033颗颗粒粒剂剂、干干混混悬悬剂剂碱性酒石酸碱性酒石酸铜铜(1-5)反应反应三氯化铁反应三氯化铁反应颜色反应鉴别颜色反应鉴别薄层色谱系统薄层色谱系统H-034羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应-内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素青霉青霉素类素类头孢类头孢类注射用粉针注射用粉针 内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 具体方法与步骤具体

9、方法与步骤 碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应青霉素钠青霉素钠氯唑西林钠氯唑西林钠苯唑西林钠苯唑西林钠氨苄西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠舒巴坦钠阿莫西林钠阿莫西林钠/克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠氨苄西林钠氨苄西林钠/氯唑西林钠氯唑西林钠阿莫西林钠阿莫西林钠美洛西林钠美洛西林钠青青霉霉素素类类三氯化铁反应三氯化铁反应氨苄西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠舒巴坦钠阿莫西林钠阿莫西林钠/克拉维酸钾克拉维酸钾 氨苄西氨苄西 林钠林钠氨苄西林钠氨苄西林钠/氯唑西林钠氯唑西林钠氨苄西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠舒巴坦钠阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠氨苄西林钠氨苄西林钠/氯唑西林钠氯唑

10、西林钠TLC阿莫西林钠阿莫西林钠/克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠舒巴坦钠氨苄西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠舒巴坦钠阿莫西林钠阿莫西林钠/克拉维酸钾克拉维酸钾氯唑西林钠氯唑西林钠苯唑西林钠苯唑西林钠三氯化铁反应三氯化铁反应1%醋酸醋酸反应反应氯唑西林钠氯唑西林钠苯唑西林钠苯唑西林钠微桔红色或微桔红色或浅桔红色浅桔红色混浊或沉淀混浊或沉淀,有颗粒挂壁有颗粒挂壁碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应头孢他啶头孢他啶头孢曲松钠头孢曲松钠头孢唑肟钠头孢唑肟钠头孢拉定头孢拉定头孢唑林钠头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠舒巴坦钠蓝色

11、变墨蓝色变墨绿色溶液绿色溶液墨绿色变墨绿色变棕黄色棕黄色美洛培南美洛培南亚胺培南亚胺培南/西司他丁西司他丁头头孢孢菌菌类类三氯化铁反应三氯化铁反应头孢他啶头孢他啶头孢曲松钠头孢曲松钠TLC头孢曲松钠头孢曲松钠头孢头孢他啶他啶头孢唑头孢唑肟钠肟钠头孢拉定头孢拉定头孢他啶头孢他啶头孢曲松钠头孢曲松钠头孢唑肟钠头孢唑肟钠头孢拉定头孢拉定墨绿色变墨绿色变棕黄色棕黄色头孢唑林钠头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢噻吩钠头孢呋辛钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠舒巴坦钠蓝色变墨蓝色变墨绿色溶液绿色溶液三氯化铁反应三氯化铁反应头孢唑林钠头孢唑林钠头孢噻吩钠头孢噻吩钠TLC头孢唑头孢唑林钠林钠

12、头头孢孢噻噻吩吩钠钠头孢呋辛钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠舒巴坦钠H-033H-033TLCTLC头孢呋辛钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/ /舒巴坦钠舒巴坦钠头孢呋辛钠头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠舒巴坦钠H-033H-033H-033H-033TLC美洛培南美洛培南亚胺培南亚胺培南/西司他丁西司他丁H-033美洛培南美洛培南美洛培南美洛培南亚胺培南亚胺培南亚胺培南亚胺培南/ /西司他丁西司他丁西司他丁西司他丁三氯化铁反应三氯化铁反应片剂片剂 胶囊胶囊-内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素羟羟肟酸铁反应肟酸铁反应阿莫西

13、林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林氨苄西林青霉素青霉素V钾钾头孢拉定头孢拉定头孢氨苄头孢氨苄头孢羟氨苄头孢羟氨苄头孢呋辛酯头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯头孢泊肟酯头孢克洛头孢克洛阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林氨苄西林青霉素青霉素V钾钾碱性酒石酸铜反应碱性酒石酸铜反应青霉素青霉素V钾钾阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/ /克拉维酸钾克拉维酸钾克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林氨苄西林氨苄西林氨苄西林三氯化铁反应三氯化铁反应 氨苄西林氨苄西林TLC阿莫西林阿莫西林阿阿莫莫西西林林克克拉拉维维酸酸钾钾H

14、-035阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/ /克拉维酸钾克拉维酸钾克拉维酸钾克拉维酸钾氨苄西林氨苄西林氨苄西林氨苄西林头孢拉定头孢拉定头孢氨苄头孢氨苄头孢羟氨头孢羟氨 苄苄三氯化铁三氯化铁反应反应头孢拉定头孢拉定头孢氨苄头孢氨苄头孢羟氨头孢羟氨苄苄TLCTLC头孢拉定头孢拉定头孢氨苄头孢氨苄头孢呋辛酯头孢呋辛酯盐酸头孢他美盐酸头孢他美酯酯头孢泊肟酯头孢泊肟酯碱性酒石碱性酒石酸铜反应酸铜反应头孢呋头孢呋辛酯辛酯盐酸头孢他盐酸头孢他美酯美酯头孢泊肟酯头孢泊肟酯颗粒剂颗粒剂 干混悬剂干混悬剂-内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素三氯化铁三氯化铁反应反应头孢氨苄头孢氨苄/ /甲

15、氧苄啶甲氧苄啶头孢拉定头孢拉定头孢氨苄头孢氨苄头孢羟氨苄头孢羟氨苄头孢克洛头孢克洛阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/ /克拉维酸钾克拉维酸钾头孢克肟头孢克肟头孢泊肟酯头孢泊肟酯头孢地尼头孢地尼头孢氨苄头孢氨苄/ /甲氧苄啶甲氧苄啶头孢拉定头孢拉定头孢氨苄头孢氨苄头孢羟氨苄头孢羟氨苄头孢克洛头孢克洛阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/ /克拉维酸钾克拉维酸钾头孢克肟头孢克肟碱性酒石碱性酒石酸铜反应酸铜反应(1 51 5)头孢氨苄头孢氨苄/ /甲氧苄啶甲氧苄啶头孢氨苄头孢氨苄头孢拉定头孢拉定头孢克洛头孢克洛阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/ /克拉维酸钾克拉维酸钾头孢克肟头孢克肟深蓝紫色深蓝紫色浅墨

16、绿色浅墨绿色头孢羟氨头孢羟氨苄苄墨绿色墨绿色深红色深红色深棕色深棕色头孢克洛头孢克洛阿莫西林阿莫西林阿莫西林阿莫西林/克克拉维酸钾拉维酸钾TLC头孢克洛阿阿莫莫西西林林阿阿莫莫西西林林克克拉拉维维酸酸钾钾H-034操作要点及注意事项操作要点及注意事项颜颜颜颜 色色色色 反反反反 应应应应u颜色反应鉴别颜色反应鉴别 一些品种(制剂)的羟肟酸铁反应和三一些品种(制剂)的羟肟酸铁反应和三氯化铁反应,反应后溶液的颜色深浅及溶液氯化铁反应,反应后溶液的颜色深浅及溶液状态(澄清、浑浊、沉淀等)的判断受实验状态(澄清、浑浊、沉淀等)的判断受实验人员的主观因素的影响较大。为便于判断,人员的主观因素的影响较大。

17、为便于判断,标准正文中采用以标准正文中采用以“或或”连接几种颜色、状连接几种颜色、状态的方法进行叙述,举例如下:态的方法进行叙述,举例如下:uuu注射用粉针剂的羟肟酸铁反应:桔注射用粉针剂的羟肟酸铁反应:桔注射用粉针剂的羟肟酸铁反应:桔注射用粉针剂的羟肟酸铁反应:桔红色、深桔红色或浅桔红色混浊或红色、深桔红色或浅桔红色混浊或红色、深桔红色或浅桔红色混浊或红色、深桔红色或浅桔红色混浊或溶液,照片如下:溶液,照片如下:溶液,照片如下:溶液,照片如下:uu注射用粉针剂的三氯化铁反应:微注射用粉针剂的三氯化铁反应:微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀,照片桔红色或浅桔红色混浊或沉淀,照片如下:如下:颗粒剂、干

18、混悬剂的三氯化铁反应:颗粒剂、干混悬剂的三氯化铁反应:桔红色、深桔红色或浅桔红色,照片桔红色、深桔红色或浅桔红色,照片如下:如下: uu一些品种(制剂)的碱性酒石酸铜反一些品种(制剂)的碱性酒石酸铜反应,应,反应现象是颜色渐变的过程反应现象是颜色渐变的过程,如,如“深葡萄紫色变深棕色深葡萄紫色变深棕色”、“墨绿色墨绿色变棕黄色变棕黄色”、“蓝色变墨绿色蓝色变墨绿色”、“深葡萄紫色变深墨绿色深葡萄紫色变深墨绿色”等,且变化等,且变化速度的快慢依品种各异。因此,速度的快慢依品种各异。因此,操作操作该反应时需仔细观察现象。该反应时需仔细观察现象。样品的溶解性对颜色结果的影响样品的溶解性对颜色结果的影

19、响uu注射用亚胺培南西司他丁加水溶解注射用亚胺培南西司他丁加水溶解时,发现溶解性不好使供试品溶液时,发现溶解性不好使供试品溶液出现混浊,但不影响反应现象的观出现混浊,但不影响反应现象的观察和结果的判断察和结果的判断辅料对颜色反应结果的影响辅料对颜色反应结果的影响 由于注射剂辅料较少直接溶解即可,不需由于注射剂辅料较少直接溶解即可,不需过滤;片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大,过滤;片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大,本实验仍以取粉末加溶剂溶解,取上清夜直接本实验仍以取粉末加溶剂溶解,取上清夜直接加入试剂后观察颜色为主;颗粒剂干混悬剂用加入试剂后观察颜色为主;颗粒剂干混悬剂用普通的过滤方法很难过

20、滤,辅料对实验结果会普通的过滤方法很难过滤,辅料对实验结果会产生一定影响,大部分颗粒剂仍以取粉末加溶产生一定影响,大部分颗粒剂仍以取粉末加溶剂溶解,取上清夜直接加入试剂后观察颜色,剂溶解,取上清夜直接加入试剂后观察颜色,参考快检手册的图片仔细观察颜色参考快检手册的图片仔细观察颜色薄薄 层层 色色 谱谱u操作要点及注意事项操作要点及注意事项展开系统适用的品种和制剂参比药品H-033号号 大部分粉大部分粉针剂头孢唑啉啉H-036号号 注射用注射用头孢拉定、注射拉定、注射用用头孢曲松曲松钠、注射用、注射用头孢他他啶、注射用、注射用头孢唑肟钠头孢拉拉定定H-035号号 青霉素青霉素类片片剂、胶囊、胶囊

21、头孢克克洛洛H-034号号1.头孢菌素菌素类片片剂、胶囊、胶囊2.全部全部颗粒粒剂、干混、干混悬剂头孢克克洛洛操操 作作 要要 点点选择参比物的依据选择参比物的依据展开系展开系统统组组分配比分配比参比参比药药品品 RfRf值值值值H-033H-033号号号号乙酸乙酯丙酮乙酸乙酯丙酮乙酸乙酯丙酮乙酸乙酯丙酮冰醋酸水(:冰醋酸水(:冰醋酸水(:冰醋酸水(:):):):)头孢唑头孢唑啉啉啉啉 0.700.720.700.72H-036H-036号号号号乙酸乙酯乙醚乙酸乙酯乙醚乙酸乙酯乙醚乙酸乙酯乙醚二氯甲烷甲酸二氯甲烷甲酸二氯甲烷甲酸二氯甲烷甲酸(:)(:)(:)(:)头孢头孢拉定拉定拉定拉定 0.

22、640.690.640.69H-035H-035号号号号乙酸乙酯丙酮乙酸乙酯丙酮乙酸乙酯丙酮乙酸乙酯丙酮冰醋酸水(:冰醋酸水(:冰醋酸水(:冰醋酸水(:. .)头孢头孢克洛克洛克洛克洛 0.200.24 0.200.24H-034H-034号号号号乙酸乙酯乙醚乙酸乙酯乙醚乙酸乙酯乙醚乙酸乙酯乙醚二氯甲烷甲酸二氯甲烷甲酸二氯甲烷甲酸二氯甲烷甲酸(:(:(:(:4 4)头孢头孢克洛克洛克洛克洛 0.330.420.330.42RfRf值的计算值的计算uuRfRf值的计算应以值的计算应以UV254nmUV254nm下检视的斑下检视的斑点位置为准(舒巴坦钠以碘蒸气熏点位置为准(舒巴坦钠以碘蒸气熏蒸后的

23、斑点位置计),注意从斑点蒸后的斑点位置计),注意从斑点前沿开始测量。前沿开始测量。以以RfRf值结合相对值结合相对RfRf值定性的稳定性值定性的稳定性和重现性比单独以和重现性比单独以RfRf值定性高。值定性高。展开剂在展开过程的挥发问题展开剂在展开过程的挥发问题uu由于本系列的展开剂中有乙醚和甲酸,由于本系列的展开剂中有乙醚和甲酸,挥发性较强,在展开过程中一定要注意挥发性较强,在展开过程中一定要注意圆形展开缸的密闭性,解决方案:在展圆形展开缸的密闭性,解决方案:在展开缸的盖子与缸的接触的地方要均匀涂开缸的盖子与缸的接触的地方要均匀涂布真空硅脂,且用夹子夹好布真空硅脂,且用夹子夹好注意事项注意事

24、项uu舒巴坦钠舒巴坦钠UV254nmUV254nm下检视无斑点,经下检视无斑点,经碘蒸气熏蒸后斑点颜色依然较浅,碘蒸气熏蒸后斑点颜色依然较浅,操作时需仔细观察。操作时需仔细观察。供试品溶液的制备:参照供试品溶液的制备:参照供试品溶液的制备:参照供试品溶液的制备:参照【取样方法参取样方法参取样方法参取样方法参照表照表照表照表】取本品一包,按标示量加入稀乙取本品一包,按标示量加入稀乙取本品一包,按标示量加入稀乙取本品一包,按标示量加入稀乙醇,振摇醇,振摇醇,振摇醇,振摇2 2 2 23 3 3 3分钟,制成每分钟,制成每分钟,制成每分钟,制成每1ml1ml1ml1ml约含约含约含约含25mg25m

25、g25mg25mg阿莫西林的溶液,静置,取上清液作为阿莫西林的溶液,静置,取上清液作为阿莫西林的溶液,静置,取上清液作为阿莫西林的溶液,静置,取上清液作为供试品溶液。供试品溶液。供试品溶液。供试品溶液。颗粒剂颗粒剂 干混悬剂样品前处理干混悬剂样品前处理 其其 他他uu因头孢氨苄与头孢拉定的化学结构十分因头孢氨苄与头孢拉定的化学结构十分相近,采用目前建立的化学快检方法无相近,采用目前建立的化学快检方法无法对二者的各种制剂进行有效鉴别,鉴法对二者的各种制剂进行有效鉴别,鉴别上述两个品种时应注意结合其它方法,别上述两个品种时应注意结合其它方法,如近红外鉴别、授权如近红外鉴别、授权HPLCHPLC法鉴别。法鉴别。头孢氨苄头孢氨苄头孢拉定头孢拉定

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