第六章--天然药毒物和毒品--法医毒物分析课件

《第六章--天然药毒物和毒品--法医毒物分析课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第六章--天然药毒物和毒品--法医毒物分析课件（145页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、潘爱华潘爱华Tel:87330563（o）Email:第六章第六章 天然药毒物天然药毒物天然药毒物的特点：天然药毒物的特点：1. 中毒原因复杂中毒原因复杂2. 毒物来源复杂毒物来源复杂3. 化学成分复杂化学成分复杂4. 化学结构和理化性质差异大化学结构和理化性质差异大5. （药）毒理作用各异且毒性差异较大（药）毒理作用各异且毒性差异较大6. 检材的性状、组成和含量各异检材的性状、组成和含量各异天然药毒物分析的特点：天然药毒物分析的特点：1. 确定分析目的物难确定分析目的物难2. 筛查毒物难筛查毒物难3. 提取分离毒物难提取分离毒物难4. 检测毒物难检测毒物难 对策：对策：了解常见有毒动植物和中

2、草药的名称和了解常见有毒动植物和中草药的名称和俗称、来源、成分、形态、分布、用途；俗称、来源、成分、形态、分布、用途；了解其毒性大小、中毒症状、体内过程了解其毒性大小、中毒症状、体内过程等方面的知识；等方面的知识；了解案情、分析案情，以寻找检验方向、了解案情、分析案情，以寻找检验方向、合理制定分析方案。合理制定分析方案。第一节 形态学检验 天然药毒物案例，其体外检材往往都天然药毒物案例，其体外检材往往都保留有原植物的部分形态特征。针对天然保留有原植物的部分形态特征。针对天然药毒物检材的这一特点，可应用形态学方药毒物检材的这一特点，可应用形态学方法对天然药毒物进行检验。法对天然药毒物进行检验。

3、第一节第一节 形态学检验方法形态学检验方法 n n1 1 1 1外观性状鉴别：外观性状鉴别：外观性状鉴别：外观性状鉴别： 形形形形状状状状，大大大大小小小小，颜颜颜颜色色色色，表表表表面面面面特特特特征征征征，质质质质地地地地，折折折折断面，气和味。断面，气和味。断面，气和味。断面，气和味。n n2 2 2 2显微形态鉴别：显微形态鉴别：显微形态鉴别：显微形态鉴别： 通通通通过过过过对对对对组组组组织织织织结结结结构构构构、细细细细胞胞胞胞形形形形态态态态、细细细细胞胞胞胞后后后后含含含含物物物物等等等等某某某某些些些些特特特特征征征征进进进进行行行行鉴鉴鉴鉴别别别别。细细细细胞胞胞胞后后后后

4、含含含含物物物物是是是是细细细细胞胞胞胞中中中中的的的的非非非非生生生生命命命命物物物物质质质质，是是是是新新新新陈陈陈陈代代代代谢谢谢谢的的的的积积积积累累累累物物物物。后后后后含含含含物物物物：营营营营养养养养物物物物、代代代代谢谢谢谢后后后后废废废废物物物物可可可可见见见见形形形形状状状状（淀淀淀淀粉粉粉粉）；溶溶溶溶解解解解状状状状态态态态无无无无形形形形物物物物（生生生生物物物物碱碱碱碱，甙甙甙甙类类类类，鞣鞣鞣鞣质质质质）形形形形态态态态和和和和成成成成分是观察的重点（特征性）。分是观察的重点（特征性）。分是观察的重点（特征性）。分是观察的重点（特征性）。显微形态鉴别显微形态鉴别用

5、适当液体或用适当液体或试剂处理理后加盖玻片封藏后加盖玻片封藏用水或稀甘油用水或稀甘油处理理1)用水合用水合氯醛处理理2)乙醇溶液乙醇溶液处-用乙用乙醚3)理理粉末制片粉末制片1)组织切片：切片：2)横切片横切片表面片表面片较硬或硬或皱缩先水泡先水泡软再再切片切片间间苯三酚苯三酚苯三酚苯三酚试剂试剂：1)1)氯氯化化化化锌锌碘碘碘碘试试2)2)碘碘碘碘试剂试剂：3)3)4)4)MillonMillon试剂试剂：试剂试剂：苏苏丹丹丹丹5)5)）：）：）：）：1 1：1 1硫酸（硫酸（硫酸（硫酸（6)6)）醋酸：）醋酸：）醋酸：）醋酸：7 7制片制制片制备封片（装片）封片（装片）化学显色化学显色第二

6、节第二节 天然毒品天然毒品一、阿片类一、阿片类中枢神经抑制剂中枢神经抑制剂主要包括主要包括:阿片类生物碱阿片类生物碱 海洛因（二乙酰吗啡）海洛因（二乙酰吗啡） 二氢可待因酮二氢可待因酮 二氢吗啡酮等。二氢吗啡酮等。半合成半合成n n鸦鸦片片类类生生物物碱碱：吗吗啡啡( (morphine)morphine)、可可待待因因( (codeine)codeine)、那那可可汀汀( (narcotinenarcotine) )、罂罂粟碱粟碱( (papaverinepapaverine) )、蒂巴因蒂巴因( (thebainethebaine) )n n吗吗啡啡是是鸦鸦片片的的主主要要成成分分，具具有

7、有麻麻醉醉镇镇痛痛作作用用；可可待待因因是是鸦鸦片片中中镇镇咳咳止止痛痛的的有有效效成分。成分。种植地域：种植地域：（原产地：小亚细亚）（原产地：小亚细亚）经世界卫生组织批准，只允许印度、土耳其等少经世界卫生组织批准，只允许印度、土耳其等少数国家种植限量的罂粟。数国家种植限量的罂粟。非法种植区：非法种植区： “金三角金三角”：亚洲缅甸、泰国、老挝三国交界和：亚洲缅甸、泰国、老挝三国交界和“金新月金新月”：阿富汗、巴基斯坦和伊朗交界：阿富汗、巴基斯坦和伊朗交界 HeroinChasing DragonInjection海洛因滥用情况简介 阿片类是当今滥用最为广泛、依赖性阿片类是当今滥用最为广泛、

8、依赖性最强、对社会危害最大的毒品。海洛因的最强、对社会危害最大的毒品。海洛因的滥用尤为严重。滥用尤为严重。（一）毒品鉴定（一）毒品鉴定1. 形态学检验形态学检验 （1）罂粟果（壳）罂粟果（壳） 的形态和性状的形态和性状 1）外观）外观 与易混淆植物区与易混淆植物区与易混淆植物区与易混淆植物区别别：野：野：野：野罂罂粟、粟、粟、粟、丽丽春花（虞美人）春花（虞美人）春花（虞美人）春花（虞美人）2）显微形态）显微形态 （2）鸦片的外观性状）鸦片的外观性状 生生生生鸦鸦片：棕黑色膏状物片：棕黑色膏状物片：棕黑色膏状物片：棕黑色膏状物大量大量大量大量掺杂掺杂物物物物 熟熟熟熟鸦鸦片：棕色片：棕色片：棕色

9、片：棕色带带金黄，光滑，金黄，光滑，金黄，光滑，金黄，光滑，1-41-41-41-4号海洛因号海洛因号海洛因号海洛因 颜色从黑色、暗褐色、棕色到灰白色、白色颜色从黑色、暗褐色、棕色到灰白色、白色颜色从黑色、暗褐色、棕色到灰白色、白色颜色从黑色、暗褐色、棕色到灰白色、白色（3）海洛因外观性状）海洛因外观性状 （3）海洛因外观性状）海洛因外观性状 常常见非法非法贩卖形形态：粉末、粉末、压成成长方方块状，一般用塑料薄膜状，一般用塑料薄膜热封，外封，外面通常用黄色不透明的胶面通常用黄色不透明的胶带纸缠绕，有，有250g、350g等不同等不同规格包装。零散毒品交易中的海洛因，一般用格包装。零散毒品交易中

10、的海洛因，一般用方形或方形或长方形白方形白纸包装，每包包装，每包0.1g到到1g不等。不等。2. 阿片生物碱的检验阿片生物碱的检验（1）结构性质和检材处理）结构性质和检材处理 吗吗 啡：两性，只能在弱碱性啡：两性，只能在弱碱性( (pH8.5-9.3)pH8.5-9.3)从水溶液游离从水溶液游离 析出析出, ,不溶于氯仿不溶于氯仿, ,溶于氯仿溶于氯仿- -醇的混合溶剂；盐醇的混合溶剂；盐 酸盐溶于水，不溶于氯仿酸盐溶于水，不溶于氯仿可待因：不具两性可待因：不具两性, ,溶于溶于氯仿、乙仿、乙醚、乙醇等有机溶、乙醇等有机溶剂海洛因：溶于氯仿，盐酸盐易溶于氯仿海洛因：溶于氯仿，盐酸盐易溶于氯仿,

11、 ,碱水解成单乙酰碱水解成单乙酰 吗啡和吗啡，镇痛作用是吗啡的吗啡和吗啡，镇痛作用是吗啡的4-84-8倍倍那可汀、蒂巴因那可汀、蒂巴因 、罂粟碱：碱性、罂粟碱：碱性, ,盐酸盐易溶于水或氯仿盐酸盐易溶于水或氯仿（2）显色反应）显色反应（预试验）预试验） 1 1）甲醛硫酸（）甲醛硫酸（MarquisMarquis试剂）反应试剂）反应 2 2）钼酸铵硫酸（）钼酸铵硫酸（FrohdeFrohde试剂）反应试剂）反应吗啡、海洛因，吗啡、海洛因，紫转灰紫紫转灰紫；可待因，；可待因，蓝绿蓝绿 3 3）亚硒酸浓硫酸（）亚硒酸浓硫酸（MeckeMecke试剂）反应试剂）反应 吗啡、海洛因显吗啡、海洛因显深绿色

12、深绿色 可待因显可待因显蓝绿色蓝绿色 罂粟碱显罂粟碱显暗蓝色暗蓝色吗啡、海洛因、可待因，显吗啡、海洛因、可待因，显紫红色或紫堇色紫红色或紫堇色（3 3）薄层色谱法）薄层色谱法 灵敏度较低，仅适用于体外检材灵敏度较低，仅适用于体外检材改良碘化铋钾显色改良碘化铋钾显色（4）高效液相色谱法 固定相：固定相：C C1818最普遍，氰柱分离效果较好最普遍，氰柱分离效果较好色谱条件：YWG-C18柱(4 6mm250mm）;流动相为甲醇 :水(3:7),内含0.5%三乙胺,用冰醋酸调pH=6.8；流速1mL/min；检测波长254nm；柱温30（5）气相色谱法 n n色谱柱：色谱柱： OV-17OV-17

13、（12m12m 0.53mm0.53mm）n n载气：氮气，流速载气：氮气，流速 2ml/min2ml/min；n n柱温：起始温度柱温：起始温度 150150（1min1min）10/min20020/mi10/min20020/min270(6min)n270(6min)n n进样口温度进样口温度 260260n n检测器温度检测器温度 280 280 。n n检测器：检测器：FIDFID或或NPDNPD。检测对象：象：、罂粟碱粟碱吗啡、可待因、那可汀、蒂巴因啡、可待因、那可汀、蒂巴因（6）海洛因中掺杂物的检验 用于海洛因中掺杂物分析的常用方法有用于海洛因中掺杂物分析的常用方法有GC/MS

14、、IR、UV、原子发射光谱、溶解度试、原子发射光谱、溶解度试验和沉淀反应等。验和沉淀反应等。 主要掺杂物：有机小分子主要掺杂物：有机小分子 掺杂物：扑热息痛、咖啡因、茶碱、苯巴比妥掺杂物：扑热息痛、咖啡因、茶碱、苯巴比妥 分析方法：气质联用分析分析方法：气质联用分析 气质联用分析气质联用分析n n色谱柱：色谱柱：BPX-5BPX-5（30m30m 0.22mm0.22mm 0.25m0.25m）n n载气：氦气，流速载气：氦气，流速 1.5ml/min1.5ml/min；n n柱温：初温柱温：初温 160160（1min)1min)10/min280(23min)10/min280(23min

15、)n n进样口温度进样口温度 280280n n传输线温度传输线温度 260260。n n质谱条件：质谱条件：EIEI电离源，电子能量电离源，电子能量70eV70eV，离子源温度，离子源温度 200200，扫描范围，扫描范围4040 450amu450amu。（二）体内海洛因及其代谢物的检测（二）体内海洛因及其代谢物的检测1. 体内代谢与取材体内代谢与取材 确认滥用海洛因的证据。确认滥用海洛因的证据。 尿液：海洛因定性分析的最佳检材。尿液：海洛因定性分析的最佳检材。 检出时限：不超过检出时限：不超过72hr。 组织和其它体液：中毒死亡案例，组织和其它体液：中毒死亡案例，胆汁胆汁含量较高含量较高

16、 血液：含量很低血液：含量很低 毛发：一般在尿检阴性时，毛发：一般在尿检阴性时， 需了解涉毒史需了解涉毒史2. 筛查筛查 尿液：免疫分析尿液：免疫分析 3. 确证确证 （1）检材处理： 适于尿、血液、组织（匀浆）适于尿、血液、组织（匀浆） 游离吗啡、游离吗啡、O O6 6- -乙酰吗啡检测乙酰吗啡检测n n调节调节pH8.7,pH8.7,添加内标（如乙基吗啡）添加内标（如乙基吗啡）n n二氯甲烷二氯甲烷: :异丙醇（异丙醇（9 9：1 1）提取）提取n n可酸反提净化可酸反提净化( (必要时）必要时）n n挥干有机溶剂挥干有机溶剂n n衍生化（丙酰化、硅烷化等）衍生化（丙酰化、硅烷化等） 总吗

17、啡、总吗啡、O O6 6- -乙酰吗啡检测乙酰吗啡检测n n需在提取前水解。需在提取前水解。 若检测吗啡，可酸水解；若检测吗啡，可酸水解； 若检测若检测O O6 6- -乙酰吗啡，需酶解，不能采取乙酰化衍生法乙酰吗啡，需酶解，不能采取乙酰化衍生法 3. 确证确证 （1）检材处理： 毛发处理毛发处理n n依次用甲醇、水超声清洗依次用甲醇、水超声清洗2 2次，晾干，剪成次，晾干，剪成1mm1mm长小段长小段n n称取称取20-30mg20-30mg，添加内标，水解，添加内标，水解n n调节调节pH8.7pH8.7n n氯仿氯仿: :异丙醇（异丙醇（9 9：1 1）提取）提取n n挥干有机溶剂挥干有

18、机溶剂n n衍生化（丙酰化、硅烷化等）衍生化（丙酰化、硅烷化等）n n残留物可做衍生化（如残留物可做衍生化（如TFATFA法），备检。法），备检。（2）气气/ /质联用确认质联用确认n n色谱柱：色谱柱：DB-5DB-5（30m30m 0.25mm0.25mm 0.25m0.25m）n n载气：氦气，流速载气：氦气，流速 1.0ml/min1.0ml/min；n n柱温：初温柱温：初温 200200（1min)1min)10/min280(10min)10/min280(10min)n n进样口温度进样口温度 280280n n传输线温度传输线温度 260260。n n质谱条件：质谱条件：EI

19、EI电离源，电子能量电离源，电子能量70eV70eV，离子源温，离子源温度度 250250，扫描范围，扫描范围4040 450amu450amu。检测检测:6-6-乙酰吗啡，确证海洛因滥用乙酰吗啡，确证海洛因滥用乙酰吗啡，确证海洛因滥用乙酰吗啡，确证海洛因滥用GC/MSGC/MSGC/MSGC/MS：GCGCGCGC时衍生（甲基硅烷化）时衍生（甲基硅烷化）时衍生（甲基硅烷化）时衍生（甲基硅烷化）二、大麻(marijuana，cannabis)简介简介致幻药；盛产于亚洲与北美，以印度大麻最为著名致幻药；盛产于亚洲与北美，以印度大麻最为著名致幻药；盛产于亚洲与北美，以印度大麻最为著名致幻药；盛产于

20、亚洲与北美，以印度大麻最为著名。主要活性成分为：主要活性成分为：四氢大麻酚，四氢大麻酚，四氢大麻酚，四氢大麻酚，THC (THC (THC (THC (tetrahydrocannbinoltetrahydrocannbinoltetrahydrocannbinoltetrahydrocannbinol) ) ) )大麻酚，大麻酚，大麻酚，大麻酚，CBNCBNCBNCBN（cannabinolcannabinolcannabinolcannabinol）大麻二酚，大麻二酚，大麻二酚，大麻二酚，CBDCBDCBDCBD（cannabidiolcannabidiolcannabidiolcanna

21、bidiol）大麻酚酸，大麻酚酸，大麻酚酸，大麻酚酸，cannabinoliccannabinoliccannabinoliccannabinolic acid acid acid acid二、大麻(marijuana，cannabis)简介简介 吸食方式：吸食方式：u 大麻草手卷烟大麻草手卷烟u 把大麻草把大麻草/ /精精放在普通放在普通香烟内香烟内燃吸燃吸u 把大麻油把大麻油涂于涂于香香烟顶端烟顶端1大麻的形态学检验(1)(1)植物形态植物形态 (2)(2)大麻制品及性状：大麻制品及性状：大麻草大麻草：雌花、嫩叶、果：雌花、嫩叶、果实等活性成分量高部位加实等活性成分量高部位加工而成，绿、黄

22、、或褐色工而成，绿、黄、或褐色大麻树脂大麻树脂：活性部位分泌：活性部位分泌的树脂样物质的树脂样物质大麻油大麻油：大麻草或树脂的：大麻草或树脂的有机溶剂萃取浓缩物有机溶剂萃取浓缩物(3)(3)显微形态：显微形态： 碎片，水合氯醛透化碎片，水合氯醛透化, ,稀甘油封片稀甘油封片非非腺腺毛毛( (刚刚毛毛):):单单细细胞胞长长弯弯曲曲尖尖叶叶状状, ,基基部部膨膨大大处处有有碳酸钙钟乳体；碳酸钙钟乳体；腺毛；薄壁组织中有细小草酸钙；花的乳突状毛绒腺毛；薄壁组织中有细小草酸钙；花的乳突状毛绒2.大麻酚类化合物的检验大麻酚类化合物的检验（1）化学结构和理化性质）化学结构和理化性质 不溶于水，易溶于乙醇

23、、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂；不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂；不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂；不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂；性质不稳定，双键、酚羟基易被氧化性质不稳定，双键、酚羟基易被氧化性质不稳定，双键、酚羟基易被氧化性质不稳定，双键、酚羟基易被氧化大麻二酚 大麻酚 四氢大麻酚（2）化学方法: 体外检材，筛选实验n n荧荧荧荧光光光光反反反反应应应应：紫紫紫紫外外外外光光光光下下下下，石石石石油油油油醚醚醚醚提提提提取取取取物物物物干干干干燥燥燥燥后后后后喷喷喷喷冰醋酸，显冰醋酸，显冰醋酸，显冰醋酸，显绿色荧光绿色荧光绿色荧光绿色荧光n n快快

24、快快速速速速DuguenoisDuguenoisDuguenoisDuguenois试试试试剂剂剂剂：香香香香夹夹夹夹兰兰兰兰素素素素+ + + +乙乙乙乙醛醛醛醛的的的的乙乙乙乙醇醇醇醇液液液液，显绿色，加盐酸为紫色，氯仿萃取显绿色，加盐酸为紫色，氯仿萃取显绿色，加盐酸为紫色，氯仿萃取显绿色，加盐酸为紫色，氯仿萃取紫色紫色紫色紫色n n快蓝快蓝快蓝快蓝B B B B反应反应反应反应：碱性，大麻酚类与快蓝碱性，大麻酚类与快蓝碱性，大麻酚类与快蓝碱性，大麻酚类与快蓝B B B B显显显显红紫色红紫色红紫色红紫色 （快蓝快蓝B B试剂：快蓝试剂：快蓝B B和无水硫酸钠和无水硫酸钠1:1001:10

25、0固体混合）固体混合）（3）薄层色谱：n n吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶G G G Gn n展开剂展开剂展开剂展开剂 （1 1 1 1）环己烷：丙酮：二乙胺（）环己烷：丙酮：二乙胺（）环己烷：丙酮：二乙胺（）环己烷：丙酮：二乙胺（80808080：15151515：5 5 5 5） （2 2 2 2）正己烷：苯：二乙胺（）正己烷：苯：二乙胺（）正己烷：苯：二乙胺（）正己烷：苯：二乙胺（20202020：70707070：10101010） （3 3 3 3）石油醚：丙酮：浓氨气（）石油醚：丙酮：浓氨气（）石油醚：丙酮：浓氨气（）石油醚：丙酮：浓氨气（80808080：181

26、81818：2 2 2 2）n n显色剂：称显色剂：称显色剂：称显色剂：称50mg50mg50mg50mg快蓝快蓝快蓝快蓝B B B B溶解在溶解在溶解在溶解在20ml0.1M 20ml0.1M 20ml0.1M 20ml0.1M NaOHNaOHNaOHNaOH溶液溶液溶液溶液中，注意现用现配中，注意现用现配中，注意现用现配中，注意现用现配TLCTLC分析分析分析分析结结果：多个斑点（与已知品果：多个斑点（与已知品果：多个斑点（与已知品果：多个斑点（与已知品对对照）照）照）照）恒比洗脱恒比洗脱HPLC色谱条件色谱条件（4 4）高效液相色谱法）高效液相色谱法 梯度洗脱梯度洗脱HPLC条件条件H

27、PLCHPLC：反相色谱，紫外检测、电化学检测器反相色谱，紫外检测、电化学检测器a reversed phase column (Lichrocart, C18 125-4 mm, 5 m, Merck)；The mobile phase, a mixture of acetonitrilephosphate buffer (pH 5.0) (65:35(v/v);The flow rate, 1.5 ml /min（5）气相色谱法 n n色谱柱：色谱柱： OV-17OV-17（30m30m 0.25mm0.25mm 0.25m0.25m）n n载气：氮气，流速载气：氮气，流速 1mL/min

28、1mL/min；n n柱温：起始温度柱温：起始温度 150150（1min1min）10/min260(6min)10/min260(6min)n n进样口温度进样口温度 300300n n检测器温度检测器温度 300 300 n n检测器：检测器：FIDFID（二）体内大麻酚类化合物的检测（二）体内大麻酚类化合物的检测 1.THC的的体内代谢过程体内代谢过程 长期吸食可在脂肪中积蓄，体内排除较慢长期吸食可在脂肪中积蓄，体内排除较慢 尿中主要为四氢大麻酚酸，尿样常呈酸性。尿中主要为四氢大麻酚酸，尿样常呈酸性。2.检测采集与处理检测采集与处理 一般采集尿、血或毛发，若可检出四氢大麻一般采集尿、血

29、或毛发，若可检出四氢大麻酚酸，则可作为吸食大麻的直接证据。酚酸，则可作为吸食大麻的直接证据。 提取：先碱水解，己烷提取：先碱水解，己烷-乙酸乙酯混合溶剂提乙酸乙酯混合溶剂提取。溶剂挥干，必要时衍生化。取。溶剂挥干，必要时衍生化。THC的体内代谢途径的体内代谢途径3.GC/MS3.GC/MS分析分析( (羧基和酚羟基衍生羧基和酚羟基衍生) )：方法1： 适于尿、血液适于尿、血液 三种大麻酚分析和三种代谢物（各有两异构体）三种大麻酚分析和三种代谢物（各有两异构体）n n取样取样1mL1mLn n添加内标，磷酸缓冲液调节添加内标，磷酸缓冲液调节pH6.8,pH6.8, 酶解酶解n n2mol/L H

30、Cl2mol/L HCl调节调节pH7-8pH7-8，己烷，己烷: :乙酸乙酯（乙酸乙酯（7 7：1 1）提取提取n n冰醋酸冰醋酸调节调节pHpH4 4- -5 5，己烷己烷: :乙酸乙酯（乙酸乙酯（7 7：1 1）提取）提取n n合并提取液，合并提取液，6060挥干有机溶剂挥干有机溶剂n n衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）方法1续： 适于尿、血液适于尿、血液 大麻酚酸的提取大麻酚酸的提取n n取样取样1mL1mLn n添加内标，磷酸缓冲液调节添加内标，磷酸缓冲液调节pH6.8,pH6.8, 酶解酶解n n调节至调节至pH4-5pH4-5n n己烷己烷: :乙酸乙

31、酯（乙酸乙酯（7 7：1 1）提取）提取n n6060挥干有机溶剂挥干有机溶剂n n衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）方法2： 毛发处理（大麻酚酸的提取）毛发处理（大麻酚酸的提取）n n依次用二氯甲烷，晾干，剪成依次用二氯甲烷，晾干，剪成1mm1mm长小段长小段n n称取称取50-100mg50-100mg，添加内标，添加内标n n加加1mL1mol/mL 1mL1mol/mL NaOHNaOH ，8080水解水解20min20minn n1mL1mL冰醋酸酸化冰醋酸酸化n n己烷己烷: :乙酸乙酯（乙酸乙酯（9 9：1 1）提取）提取n n挥干有机溶剂挥干有机溶剂n

32、 n衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）气气/ /质联用确认质联用确认n n色谱柱：色谱柱：DB-5DB-5（30m30m 0.25mm0.25mm 0.25m0.25m）n n载气：氦气，流速载气：氦气，流速 1.0ml/min1.0ml/min；n n柱温：初温柱温：初温 150150（1min)1min)30/min240(0.5min) 30/min240(0.5min) 3/min280(1min) 3/min280(1min) 30/min300(0.5min)30/min300(0.5min)n n进样口温度进样口温度 290290n n传输线温度传输线温

33、度 280280。n n质谱条件：质谱条件：EIEI电离源，电子能量电离源，电子能量70eV70eV，离子源温，离子源温度度 250250，扫描范围，扫描范围4040 450amu450amu。体内主要代谢物体内主要代谢物THC-COOH衍生化质谱图衍生化质谱图三、可卡因三、可卡因( (cocaine)cocaine) 盛产于南美（古柯叶）盛产于南美（古柯叶） 早在早在50005000年前这种植物就出现在厄瓜多尔一带，被安第年前这种植物就出现在厄瓜多尔一带，被安第斯山的土著居民斯山的土著居民古印第安人奉为古印第安人奉为“ “圣草圣草” ”， 18601860年德国化学家尼曼年德国化学家尼曼(A

34、lert (Alert NiemannNiemann) )从古柯叶中分离从古柯叶中分离 热带山地常山地常绿灌木灌木- -古柯古柯树，性喜温，性喜温暖、潮湿，株高暖、潮湿，株高约2-42-4米，米，树叶茂密，叶茂密，叶片叶片长3-73-7厘米，呈厘米，呈长椭圆形，形，边缘光滑，其形状和味道均光滑，其形状和味道均类似茶叶。似茶叶。古柯古柯树花小，每花小，每朵5 5瓣，花色黄白。瓣，花色黄白。果果实呈呈红色，核内含一枚种籽。古色，核内含一枚种籽。古柯柯树根系根系发达，生命力达，生命力强，每年可，每年可采摘古柯叶采摘古柯叶3-43-4次，一般在次，一般在3 3月、月、6 6月、月、9 9月、及月、及1

35、111月采摘，每棵月采摘，每棵树约可采摘可采摘4040年。年。 n n早期咀嚼古柯叶曾是王族的特权n n16世纪后才普及到一般平民，包括西班牙的移民。n n现在它已是土著文化不可缺少的一个组成部分，90%的印第安人至今仍保持着这一嗜好，同时也逐渐成为阿根廷西北部、哥伦比亚、玻利维亚、秘鲁和亚马逊河谷等地约800万人的日常习惯。 n能阻断神经传导，产生局部麻醉作用，对能阻断神经传导，产生局部麻醉作用，对眼、鼻、喉恶粘膜神经的效果尤其明显，眼、鼻、喉恶粘膜神经的效果尤其明显，因此在早期曾被广泛用于眼、鼻、喉等五因此在早期曾被广泛用于眼、鼻、喉等五官的外科手术中作为麻醉剂。但由于可卡官的外科手术中作

36、为麻醉剂。但由于可卡因盐酸盐的不稳定性，表面局部麻醉会引因盐酸盐的不稳定性，表面局部麻醉会引起角膜混浊，因此现在在临床上已经用新起角膜混浊，因此现在在临床上已经用新的、毒副作用更小的麻醉药取代了可卡因。的、毒副作用更小的麻醉药取代了可卡因。一种中枢兴奋剂，其药理作用：n n可卡因通过加强人体内化学物质的活性刺可卡因通过加强人体内化学物质的活性刺激大脑皮层兴奋中枢神经，并继而兴奋延激大脑皮层兴奋中枢神经，并继而兴奋延髓和脊髓，表现为情绪高涨、思维活跃、髓和脊髓，表现为情绪高涨、思维活跃、好动、健谈，能较长时间地从事紧张的体好动、健谈，能较长时间地从事紧张的体力和脑力劳动，甚至胜任繁重的、平时不力

37、和脑力劳动，甚至胜任繁重的、平时不能承担的工作。尤其危险的是服用可卡因能承担的工作。尤其危险的是服用可卡因具有一定的攻击性。具有一定的攻击性。 n n可卡因能使呼吸加深、加快，换气量增大，可卡因能使呼吸加深、加快，换气量增大，同时心率也加快，心脏收缩力加强，血管同时心率也加快，心脏收缩力加强，血管平滑肌松弛，对肺血管、冠状动脉等全身平滑肌松弛，对肺血管、冠状动脉等全身血管都有程度不同的扩张作用，对支气管血管都有程度不同的扩张作用，对支气管平滑肌、胆道和胃肠平滑肌也有一定的舒平滑肌、胆道和胃肠平滑肌也有一定的舒张效应。张效应。 表征：表征：滥用影响：滥用影响：n n吸食可卡因可产生很强的心理依赖

38、性，长吸食可卡因可产生很强的心理依赖性，长期吸食可导致精神障碍，也称可卡因精神期吸食可导致精神障碍，也称可卡因精神病。易产生触幻觉与嗅幻觉，最典型的是病。易产生触幻觉与嗅幻觉，最典型的是皮下虫行蚁走感，奇痒难忍，造成严重抓皮下虫行蚁走感，奇痒难忍，造成严重抓伤甚至断肢自残，情绪不稳定，容易引发伤甚至断肢自残，情绪不稳定，容易引发暴力或攻击行为。长时间大剂量使用可卡暴力或攻击行为。长时间大剂量使用可卡因后突然停药，可出现抑郁、焦虑、失望、因后突然停药，可出现抑郁、焦虑、失望、易激惹、疲惫、失眠、厌食。长期吸食者易激惹、疲惫、失眠、厌食。长期吸食者多营养不良，体重下降。多营养不良，体重下降。1.1

39、.可卡因制品及性状：可卡因制品及性状：古柯叶和古柯茶古柯叶和古柯茶：可卡因含量可卡因含量0.5%-1%古柯膏古柯膏:粗制可卡因粗制可卡因可卡因可卡因:其盐类呈白色晶其盐类呈白色晶体状，无气味，味略苦体状，无气味，味略苦而麻，易溶于水和酒精而麻，易溶于水和酒精掺杂物：掺杂物：掺杂物：掺杂物：普鲁卡因、利普鲁卡因、利普鲁卡因、利普鲁卡因、利多卡因等多卡因等多卡因等多卡因等 （一）毒品鉴定（一）毒品鉴定 爱康宁与可卡因的结构式爱康宁与可卡因的结构式左：爱康宁；右：可卡因左：爱康宁；右：可卡因 ( (爱爱康宁康宁康宁康宁ecgonineecgonine) )双双双双酯酯生物碱生物碱生物碱生物碱2.可卡

40、因生物碱的检验(1)(1)理化性质与检材处理理化性质与检材处理uu可卡因纯品为白色晶体可卡因纯品为白色晶体可卡因纯品为白色晶体可卡因纯品为白色晶体uu易溶于氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂，难溶于水易溶于氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂，难溶于水易溶于氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂，难溶于水易溶于氯仿、乙醚、乙醇等有机溶剂，难溶于水uu强碱性，可与酸成盐；不稳定而易强碱性，可与酸成盐；不稳定而易强碱性，可与酸成盐；不稳定而易强碱性，可与酸成盐；不稳定而易水解水解水解水解uu简单检材可直接溶解待检简单检材可直接溶解待检简单检材可直接溶解待检简单检材可直接溶解待检uu复复复复杂杂杂杂检检检检材材材材, , , ,

41、酸酸酸酸化化化化, , , ,分分分分离离离离酸酸酸酸性性性性溶溶溶溶液液液液; ; ; ;调调调调pH9,pH9,pH9,pH9,氯氯氯氯仿仿仿仿提提提提取取取取；挥干挥干挥干挥干, , , ,残渣溶解后待检残渣溶解后待检残渣溶解后待检残渣溶解后待检 可卡因水解可卡因水解过程程（2 2）ScottScott法（改良硫氰酸钴反应）法（改良硫氰酸钴反应） 蓝色；（干扰：蓝色；（干扰：PCPPCP、安眠酮）、安眠酮） 鉴别：盐酸存在时蓝变粉红；鉴别：盐酸存在时蓝变粉红； 氯仿萃取液显深蓝氯仿萃取液显深蓝（3）苯甲酸甲酯试验苯甲酸甲酯试验 苛性碱醇液，特殊气味苛性碱醇液，特殊气味（4 4）溶解度与阴

42、离子试验）溶解度与阴离子试验 是否有掺杂物是否有掺杂物 阴离子类型阴离子类型（5 5）TLCTLC法法 展开剂：添加弱碱展开剂：添加弱碱 改良碘改良碘- -碘化铋钾：橙色碘化铋钾：橙色 碘铂酸钾：蓝紫色碘铂酸钾：蓝紫色（6 6）UVUV：稀硫酸，稀硫酸，233233nmnm、275nm275nm（7 7）HPLCHPLC、GCGC、GC/MSGC/MS（二）体内可卡因及其代谢产物的检测（二）体内可卡因及其代谢产物的检测体内吸收、代谢：体内吸收、代谢：u 吸收迅速，代谢分解迅速吸收迅速，代谢分解迅速u 尿中原药在服用后尿中原药在服用后8-12h消失，最多不超过消失，最多不超过24hu 代谢产物复

43、杂，主要代谢产物：苯甲酰爱康宁、代谢产物复杂，主要代谢产物：苯甲酰爱康宁、 爱康宁甲酯爱康宁甲酯 滥用判定依据：尿中检出（二）体内可卡因及其代谢产物的检测（二）体内可卡因及其代谢产物的检测 采样：采样：u 尿、血液、唾液等尿、血液、唾液等u 毛发（长程检验）毛发（长程检验）检材处理检材处理方法1（液液萃取）： 适于尿、血液、唾液适于尿、血液、唾液n n碱化至碱化至pH8.5-8.7pH8.5-8.7（弱碱）（弱碱）n n氯仿氯仿: :异丙醇（异丙醇（9 9：1 1）n n酸反提净化酸反提净化n n己烷洗涤杂质己烷洗涤杂质n n碱化至碱化至pH8.5-8.7pH8.5-8.7（弱碱）（弱碱）n

44、n氯仿氯仿: :异丙醇（异丙醇（9 9：1 1）提取）提取n n6060挥干有机溶剂挥干有机溶剂n n气相前衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）气相前衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）检材处理检材处理方法2（固相萃取）： 适于尿、血液适于尿、血液n n磷酸缓冲液调磷酸缓冲液调pH6pH6，离心，离心n n上清液过柱（上清液过柱（Bond Bond ElutElut）n n0.1mol/L0.1mol/L醋酸和水洗涤杂质醋酸和水洗涤杂质n n氯仿氯仿: :甲醇：氨水（甲醇：氨水（4040：1010：1 1）洗脱）洗脱n n6060挥干有机溶剂挥干有机溶剂n n气相前衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）气相前衍生

45、化（五氟丙酰化、硅烷化等）方法3： 毛发处理毛发处理n n依次用二氯甲烷，晾干，剪成依次用二氯甲烷，晾干，剪成1mm1mm长小段长小段n n称取称取50-100mg50-100mg，酸水解，酸水解n n碱化至碱化至pH8.5-8.7pH8.5-8.7（弱碱）（弱碱）n n氯仿氯仿: :异丙醇（异丙醇（9 9：1 1）提取）提取n n6060挥干有机溶剂挥干有机溶剂n n气相前衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）气相前衍生化（五氟丙酰化、硅烷化等）气气/ /质联用确认分析质联用确认分析方法方法1 1：硅烷化产物分析：硅烷化产物分析n n色谱柱：色谱柱：DB-5DB-5（30m30m 0.25mm0.2

46、5mm 0.25m0.25m）n n载气：氦气，流速载气：氦气，流速 1.0ml/min1.0ml/min；n n柱温：初温柱温：初温 7070（1min)1min)20/min300(2min)20/min300(2min)n n进样口温度进样口温度 250250n n传输线温度传输线温度 280280。n n质谱条件：质谱条件：EIEI电离源，电子能量电离源，电子能量70eV70eV，离子源温，离子源温度度 230230，扫描范围，扫描范围4040 450amu450amu。气气/ /质联用确认分析质联用确认分析方法方法2 2：PFPPFP产物分析产物分析n n色谱柱：色谱柱：DB-5DB

47、-5（12m12m 0.2mm0.2mm 0.33m0.33m）n n载气：氦气，流速载气：氦气，流速 1.0ml/min1.0ml/min；n n柱温：初温柱温：初温 145145（4.5min)4.5min)60/min210(8min)60/min210(8min) 60/min280(1min)60/min280(1min)n n进样口温度进样口温度 260260n n传输线温度传输线温度 280280。n n质谱条件：质谱条件：EIEI电离源，电子能量电离源，电子能量70eV70eV，离子源温，离子源温度度 230230，扫描范围，扫描范围4040 450amu450amu。HPLC

48、法法n n色谱柱：色谱柱：Brownlee C-18柱，柱，100mm2.1mm ID，5mn n流动相：甲醇：乙腈流动相：甲醇：乙腈 ：25.8mmol/L醋酸醋酸钠（钠（12.5:10:77.5， 用用12.9mmol/L四丁基磷四丁基磷酸铵调节酸铵调节 pH2.2 n n流速：流速：0.3mL/minn n检测器：紫外检测器，检测波长检测器：紫外检测器，检测波长235nmHPLC分析结果第三节 有毒中草药中毒毒物检验要点：中毒毒物检验要点： u了解中草药的来源、分布和用药了解中草药的来源、分布和用药u注意收集注意收集处方处方、尚未煎熬中药、熬过或泡酒的药渣、尚未煎熬中药、熬过或泡酒的药渣

49、以及与事（案）件相关的同种中草药等以及与事（案）件相关的同种中草药等u如有剩余的中草药或药渣，结合处方可先根据形态如有剩余的中草药或药渣，结合处方可先根据形态学方法，从中分拣出可疑的有毒中草药进行鉴定，而学方法，从中分拣出可疑的有毒中草药进行鉴定，而后再有针对性的进行成分分析后再有针对性的进行成分分析一、乌头一、乌头 乌乌头头（主主根根），毛毛茛茛科科乌乌头头属属植植物物；盛盛产产于于我我国国西西南南、东东北北；药药典典收收录录：川川乌乌、附附子子（侧侧根根）、草草乌乌（北北乌乌头头）、雪雪上上一一枝蒿。枝蒿。 1. 乌头成分和毒性乌头成分和毒性（1）乌头生物碱的结构和毒性）乌头生物碱的结构和

50、毒性 乌头植物中的剧毒成分主要为双酯型的二乌头植物中的剧毒成分主要为双酯型的二萜类生物碱萜类生物碱 剧毒，纯乌头碱剧毒，纯乌头碱2-42-4mgmg致死致死, ,吸收快吸收快, ,很不很不稳定稳定, ,易水解减毒。易水解减毒。（2）乌头种类和毒性）乌头种类和毒性 中毒及检验特点：中毒及检验特点： 毒性乌头生物碱入体后很快被吸收，中毒发作快、毒性乌头生物碱入体后很快被吸收，中毒发作快、死亡快，口舌发麻及至四肢全身发麻。死亡快，口舌发麻及至四肢全身发麻。 烈性乌头的中毒致死量因产地、品种及炮制方法烈性乌头的中毒致死量因产地、品种及炮制方法等不同而异。等不同而异。 乌头中草药的品种繁多、成分复杂、生

51、物碱中毒乌头中草药的品种繁多、成分复杂、生物碱中毒量小且性质不稳定易水解，检验工作应重视体外检材量小且性质不稳定易水解，检验工作应重视体外检材的检验。的检验。（1）外观性状 三种乌头属中草药外观形态三种乌头属中草药外观形态左：乌头；中：北乌头；右：短柄乌头左：乌头；中：北乌头；右：短柄乌头 2. 形态学检验形态学检验 （2）显微形态 乌头（横切面）及其中石细胞和淀粉粒形态乌头（横切面）及其中石细胞和淀粉粒形态 3. 乌头生物碱的检验乌头生物碱的检验（1）理化性质和检材处理）理化性质和检材处理 毒性较大的双酯型乌头生物碱均不稳定，毒性较大的双酯型乌头生物碱均不稳定，酯结构在水溶液中或碱性条件下极

52、易水解，酯结构在水溶液中或碱性条件下极易水解，即使纯品在醇溶液中放置数日也可见其浓度即使纯品在醇溶液中放置数日也可见其浓度明显下降。明显下降。乌头碱结构式乌头碱结构式乌头碱结构式乌头碱结构式 ( (乌头碱乌头碱aconitineaconitine) )与稀酸或稀碱水解为非晶形乌与稀酸或稀碱水解为非晶形乌( (头次碱头次碱benzolaconinebenzolaconine，picraconitinepicraconitine) )与乌头原与乌头原( (碱碱aconineaconine) )注：注：14-C14-C8-8-水解，乌头原碱；水解，乌头原碱；C C水解，乌头次碱水解，乌头次碱uu重重

53、视视体体外外检检材材检检验验, ,检检材材立立刻刻加加乙乙醇醇（放放置不宜太久），注意收集对照药材置不宜太久），注意收集对照药材u分分离离提提取取过过程程中中，不不宜宜过过多多和和过过久久地地接接触触水和酸碱，并尽量避免长时间加热。水和酸碱，并尽量避免长时间加热。u氨氨碱碱性性条条件件下下，乙乙醚醚或或二二氯氯甲甲烷烷提提取取，浓浓缩（温度不宜高，尽快分析）缩（温度不宜高，尽快分析）检材采集与处理：检材采集与处理： （2）检验方法）检验方法 乌头中毒检材的成分比较复杂，而且含量乌头中毒检材的成分比较复杂，而且含量低、毒物易分解。对乌头生物碱无特殊、灵敏低、毒物易分解。对乌头生物碱无特殊、灵敏的

54、化学反应，检验主要以色谱法和色的化学反应，检验主要以色谱法和色/质联用法质联用法为主。由于水解原因，中毒检材中有时可能查为主。由于水解原因，中毒检材中有时可能查不到乌头生物碱原药，必要时，可对水解产物不到乌头生物碱原药，必要时，可对水解产物单酯型生物碱或乌头醇胺进行检验。单酯型生物碱或乌头醇胺进行检验。 2）薄层色谱法）薄层色谱法 1 1）舌尖味）舌尖味觉试验 麻，灼麻，灼试液一滴于滤纸尖，舌尖尝之试液一滴于滤纸尖，舌尖尝之烧（及时漱口烧（及时漱口）展开，）展开，1 1：4 4：5 5二乙胺（二乙胺（- -丙酮丙酮- -氯仿氯仿碘熏显色，注意与已知品对照碘熏显色，注意与已知品对照 3）高效液相

55、色谱法）高效液相色谱法 乌头生物碱的检测可用反相抑制色谱乌头生物碱的检测可用反相抑制色谱 n n色谱柱：色谱柱：色谱柱：色谱柱： C C1818柱，柱，柱，柱，250mm4.6mm ID250mm4.6mm ID，10m10mn n流动相：甲醇流动相：甲醇流动相：甲醇流动相：甲醇: :水水水水 : :氯仿氯仿氯仿氯仿: :三乙三乙三乙三乙胺（胺（胺（胺（70:30:2:0.170:30:2:0.1） n n流速：流速：流速：流速：1.0mL/min1.0mL/minn n紫外检测器：检测波长紫外检测器：检测波长紫外检测器：检测波长紫外检测器：检测波长230nm230nm检材处理：固相萃取 血液

56、血液3 3高氯酸超声萃取、尿液离心取上清液高氯酸超声萃取、尿液离心取上清液n n氨碱化至氨碱化至pH8pH8n n水洗涤杂质水洗涤杂质n n乙腈洗脱乙腈洗脱n n6060挥干有机溶剂挥干有机溶剂 4）液）液/质联用法质联用法 4）液）液/质联用法质联用法 LC/MS分析条件n n色谱柱：色谱柱：色谱柱：色谱柱： ODS-2 ODS-2柱，柱，柱，柱，150mm3m150mm3m n n流动相：乙腈流动相：乙腈流动相：乙腈流动相：乙腈:0.3%:0.3%三氟乙酸，线性梯度洗脱三氟乙酸，线性梯度洗脱三氟乙酸，线性梯度洗脱三氟乙酸，线性梯度洗脱n nFAB-MSFAB-MS检测检测检测检测 二、马钱

57、子（番木鳖）n n马钱子科植物的干燥成熟种子马钱子科植物的干燥成熟种子n n产地产地: :印度、越南、泰国等，中国云南印度、越南、泰国等，中国云南n n成分：吲哚类生物碱，主要为士的宁成分：吲哚类生物碱，主要为士的宁（番木鳖碱）、马钱子碱（布鲁生）（番木鳖碱）、马钱子碱（布鲁生）n n马钱子中马钱子中含量在含量在1.51.53.53.5。简介介n硝酸盐在临床上用作脊髓中枢兴奋药，因毒性大，硝酸盐在临床上用作脊髓中枢兴奋药，因毒性大，安全范围小，现已少用。安全范围小，现已少用。n马钱子碱的生物活性比士的宁弱，主要用作化学马钱子碱的生物活性比士的宁弱，主要用作化学试剂。马钱子浸膏或粗制士的宁有被用

58、作毒品掺试剂。马钱子浸膏或粗制士的宁有被用作毒品掺加物的。加物的。n n毒性较强，中毒量毒性较强，中毒量毒性较强，中毒量毒性较强，中毒量5 5 5 5mgmgmgmg，致死量致死量致死量致死量30303030mgmgmgmg。马钱子碱。马钱子碱。马钱子碱。马钱子碱的毒性为士的宁的的毒性为士的宁的的毒性为士的宁的的毒性为士的宁的1/8-1/301/8-1/301/8-1/301/8-1/30。n主要中毒症状有颈项僵直、牙关紧闭等阵发性痉主要中毒症状有颈项僵直、牙关紧闭等阵发性痉挛，最后窒息而死，尸体僵直挛，最后窒息而死，尸体僵直临床应用、毒性：临床应用、毒性： 士的宁入体后很快被吸收，排泄缓慢，

59、士的宁入体后很快被吸收，排泄缓慢，有积蓄作用；在活体内可逐渐被氧化分解消有积蓄作用；在活体内可逐渐被氧化分解消失，但在尸体中可经久不变，埋葬数年的尸失，但在尸体中可经久不变，埋葬数年的尸体内脏中仍有检出的可能。体内脏中仍有检出的可能。1马钱子的形态学检验（1 1 1 1） 外观性状外观性状外观性状外观性状马钱子（上）与云南马钱子（下）的形态马钱子（上）与云南马钱子（下）的形态1.1.种脐；种脐；2.2.隆起线纹；隆起线纹；3.3.珠孔；珠孔；4.4.胚乳；胚乳；5.5.胚胚 （2）显微形态 马钱子马钱子( (左左) )与云南马钱子与云南马钱子( (右右) )表皮毛茸图表皮毛茸图1.1.表皮毛茸

60、；表皮毛茸；2.2.颓废组织；颓废组织；3.3.胚乳胚乳 （1 1）结构性质和检材处理）结构性质和检材处理 2. 马钱子生物碱的检验马钱子生物碱的检验（1 1）结构性质和检材处理）结构性质和检材处理 u士的宁难溶于水、乙醚，易溶于氯仿士的宁难溶于水、乙醚，易溶于氯仿u马钱子难溶于水，易溶于氯仿马钱子难溶于水，易溶于氯仿u化学性质稳定，可与酸成盐化学性质稳定，可与酸成盐u检材处理：酸性醇液浸泡，浓缩，氨性检材处理：酸性醇液浸泡，浓缩，氨性碱化，氯仿萃取碱化，氯仿萃取(2)(2)显色反应显色反应 n nMandelinMandelinMandelinMandelin试剂试剂试剂试剂 士的宁，蓝至蓝

61、紫士的宁，蓝至蓝紫士的宁，蓝至蓝紫士的宁，蓝至蓝紫红橙；马钱子，红红橙；马钱子，红红橙；马钱子，红红橙；马钱子，红棕棕棕棕 （含氮有机碱性化合物也可显色）（含氮有机碱性化合物也可显色）（含氮有机碱性化合物也可显色）（含氮有机碱性化合物也可显色）n n重铬酸钾重铬酸钾重铬酸钾重铬酸钾- - - -硫酸反应硫酸反应硫酸反应硫酸反应 士的宁，紫堇色士的宁，紫堇色士的宁，紫堇色士的宁，紫堇色黄橙色黄橙色黄橙色黄橙色黄黄黄黄n n硝酸反应硝酸反应硝酸反应硝酸反应 马钱子，深红色；加氯化亚锡，深红转紫马钱子，深红色；加氯化亚锡，深红转紫马钱子，深红色；加氯化亚锡，深红转紫马钱子，深红色；加氯化亚锡，深红转

62、紫 士的宁，淡黄色，蒸干后残渣遇氨变紫红士的宁，淡黄色，蒸干后残渣遇氨变紫红士的宁，淡黄色，蒸干后残渣遇氨变紫红士的宁，淡黄色，蒸干后残渣遇氨变紫红 （3 3）紫外光谱）紫外光谱 士的宁（左）与马钱子碱（右）的紫外吸收光谱（酸性水溶液）士的宁（左）与马钱子碱（右）的紫外吸收光谱（酸性水溶液）士的宁（左）与马钱子碱（右）的紫外吸收光谱（酸性水溶液）士的宁（左）与马钱子碱（右）的紫外吸收光谱（酸性水溶液）（4 4） 薄薄层层色谱法色谱法 碱性展开剂，碘碱性展开剂，碘- -碘化铋钾显色碘化铋钾显色（5）HPLC:n n色谱柱：色谱柱：色谱柱：色谱柱：platinum silicaplatinum s

63、ilica（AlltechAlltech） 150mm46mm3 150mm46mm3n n流动相：正己烷流动相：正己烷流动相：正己烷流动相：正己烷- -二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷- -甲醇甲醇甲醇甲醇- -浓氨试液浓氨试液浓氨试液浓氨试液 （47.547.5 47.547.5 5 5 0.350.35）n n流速：流速：流速：流速：1.21.2mLmL/min/minn n检测波长：检测波长：检测波长：检测波长：254254nmnm（7）HPLC/MSn n色谱柱：色谱柱：色谱柱：色谱柱：AlltimaAlltima 1818（5 5mm, 200mm4 6mm, 200mm4 6mm

64、）n n流动相：乙腈流动相：乙腈流动相：乙腈流动相：乙腈- -水水水水- -甲酸甲酸甲酸甲酸- -三乙铵三乙铵三乙铵三乙铵 (20(20 8080 1 1 0.01)0.01)n n流速：流速：流速：流速：0.40.4mLmL/min/minn n柱温：室温柱温：室温柱温：室温柱温：室温n n质谱：质谱：质谱：质谱：ESIESI，采用一级、二级和多级全扫描几种方，采用一级、二级和多级全扫描几种方，采用一级、二级和多级全扫描几种方，采用一级、二级和多级全扫描几种方式同时测定。式同时测定。式同时测定。式同时测定。（6）气相色谱法 n n色谱柱：色谱柱： OV-101OV-101（25m25m 0.

65、32mm0.32mm 0.25m0.25m）n n载气：氮气，流速载气：氮气，流速 2mL/min2mL/min；n n柱温：起始温度柱温：起始温度 240240（3min3min）10/min10/min280280(6min)(6min)n n进样口温度进样口温度 280280n n检测器温度检测器温度 280280 n n检测器：检测器：FIDFID或或NPDNPD士的宁（士的宁（A）、）、马钱子（子（B）的二）的二级全全扫描色描色谱及及质谱图、尿、尿样中中m/z335的二的二级全全扫描色描色谱图（C）1.异士的宁异士的宁2.士的宁士的宁3.马钱子碱子碱士的宁葡糖士的宁葡糖醛酸酸结合物的

66、二合物的二级（A和三和三级（）B）全）全扫描色描色谱及相及相应质谱图1.异士的宁葡糖异士的宁葡糖醛酸酸结合物合物2.士的宁葡糖士的宁葡糖醛酸酸结合物合物 3. 动物试验（青蛙毒性试验）动物试验（青蛙毒性试验） u 检材中的生物碱经过萃取、挥干检材中的生物碱经过萃取、挥干后，使成可溶性盐，用少量生理盐水后，使成可溶性盐，用少量生理盐水制成中性溶液注入青蛙背部的淋巴囊制成中性溶液注入青蛙背部的淋巴囊内，观察青蛙动态。如有士的宁存在，内，观察青蛙动态。如有士的宁存在，则于给药后数分钟至半小时，出现间则于给药后数分钟至半小时，出现间歇性、强直性四肢肌肉痉挛，蛙体及歇性、强直性四肢肌肉痉挛，蛙体及后腿僵

67、直，前肢合抱，稍有外界声音后腿僵直，前肢合抱，稍有外界声音或光线刺激，立即再次引起全身强直或光线刺激，立即再次引起全身强直性痉挛。性痉挛。 三、颠茄类三、颠茄类 u原生植物：茄科颠茄属植物。原生植物：茄科颠茄属植物。u颠茄生物碱：莨菪烷生物碱颠茄生物碱：莨菪烷生物碱(tropane alkaloids)u活性成分：莨菪碱（活性成分：莨菪碱（hyoscyamine，又名天仙子胺），又名天仙子胺） 东茛菪碱（东茛菪碱（scopolamine，又名天仙子碱），又名天仙子碱） 山莨菪碱（山莨菪碱（anisodamine，又称，又称6542） 樟柳碱（樟柳碱（anisodine）u常用中草药：洋金花（花

68、）常用中草药：洋金花（花） 天仙子（种子）天仙子（种子） 三分三（根）三分三（根）简介介n中草药：解痉、镇痛、止咳、平喘中草药：解痉、镇痛、止咳、平喘n莨菪生物碱：抗胆碱药物莨菪生物碱：抗胆碱药物n阿托品（阿托品（atropine)atropine)：莨菪碱外消旋体：莨菪碱外消旋体 。n阿托品和东莨菪碱毒性较大，阿托品阿托品和东莨菪碱毒性较大，阿托品中毒中毒量量5 5mgmg，致死量致死量50mg50mg。临床应用、毒性：临床应用、毒性：u毒物鉴定案例：用药过量和麻醉抢劫毒物鉴定案例：用药过量和麻醉抢劫u体内过程：体内过程： 吸收和排泄都较快，且易水解吸收和排泄都较快，且易水解u检验注意事项：

69、及时取材，尽快检验。检验注意事项：及时取材，尽快检验。其它：其它：洋金花原植物及蒴果形态图洋金花原植物及蒴果形态图洋金花原植物及蒴果形态图洋金花原植物及蒴果形态图左：白曼陀罗植物；右上：白曼陀罗果；右下：毛曼陀罗果左：白曼陀罗植物；右上：白曼陀罗果；右下：毛曼陀罗果左：白曼陀罗植物；右上：白曼陀罗果；右下：毛曼陀罗果左：白曼陀罗植物；右上：白曼陀罗果；右下：毛曼陀罗果 1. 形态学检验形态学检验 ）洋金花）洋金花）洋金花）洋金花1 1（洋金花剖面图及粉末显微形态洋金花剖面图及粉末显微形态洋金花剖面图及粉末显微形态洋金花剖面图及粉末显微形态1.1.1.1.花粉粒；花粉粒；花粉粒；花粉粒；2.2.

70、2.2.非腺毛；非腺毛；非腺毛；非腺毛；3.3.3.3.腺毛；腺毛；腺毛；腺毛；4.4.4.4.导管；导管；导管；导管；5.5.5.5.花粉囊内壁细胞；花粉囊内壁细胞；花粉囊内壁细胞；花粉囊内壁细胞；6.6.6.6.草酸钙晶体；草酸钙晶体；草酸钙晶体；草酸钙晶体；7.7.7.7.花冠表皮（花冠表皮（花冠表皮（花冠表皮（7 7 7 7a a a a上表皮，上表皮，上表皮，上表皮，7 7 7 7b b b b下表皮）下表皮）下表皮）下表皮）（2 2）天仙子的性状）天仙子的性状天仙子（左）和南天仙子（右）的外形天仙子（左）和南天仙子（右）的外形2. 颠茄生物碱的检验颠茄生物碱的检验（1）结构性质和检

71、材处理）结构性质和检材处理 莨菪生物碱莨菪生物碱莨菪生物碱莨菪生物碱结结构式构式构式构式（1）结构性质和检材处理）结构性质和检材处理 化学性质化学性质：碱性化合物，可与酸成盐；：碱性化合物，可与酸成盐；溶于乙醇、氯仿、乙醚等；溶于乙醇、氯仿、乙醚等；难溶于水；难溶于水；酸、碱性条件下易分解。酸、碱性条件下易分解。检材处理检材处理：氨碱性条件下，氯仿提取。：氨碱性条件下，氯仿提取。n nVitaliVitali反反应应：莨莨菪菪酸酸硝硝化化成成三三硝硝苯苯衍衍生生物物( (苛苛性性碱碱醇醇液液中中，成成醌醌式式, ,紫紫- -暗暗红红- -褪色褪色) )n n氯氯化化汞汞反反应应：阿阿托托品品黄

72、黄色色氧氧化化汞汞红；东莨菪碱红；东莨菪碱白色复盐白色复盐n n碘碘- -碘碘化化钾钾结结晶晶：阿阿托托品品飞飞鸟鸟状状深深棕棕色结晶色结晶 （2）化学检验方法）化学检验方法 （3 3）紫外光谱：）紫外光谱：B B带带, ,弱吸收弱吸收（4 4）薄层色谱法：）薄层色谱法： 展开剂：展开剂：展开剂：展开剂：25%25%25%25%氨水氨水氨水氨水- - - -甲醇（甲醇（甲醇（甲醇（1.51.51.51.5：100100100100） 显色：碘化铋钾显色：碘化铋钾显色：碘化铋钾显色：碘化铋钾（5 5）高效液相色谱法：高效液相色谱法：反相离子对反相离子对（6）毛细管电泳法）毛细管电泳法 3. 3.

73、动物试验动物试验 ：猫眼括瞳，筛选猫眼括瞳，筛选猫眼括瞳，筛选猫眼括瞳，筛选 u马兜铃酸毒理毒性马兜铃酸毒理毒性毒理机制主要是导致肾小管上皮细胞毒理机制主要是导致肾小管上皮细胞的变性、坏死与凋亡，加速肾间质纤维化的变性、坏死与凋亡，加速肾间质纤维化进程，干扰花生四烯酸、前列腺素的代谢，进程，干扰花生四烯酸、前列腺素的代谢，并有较强的致癌、致突变作用。并有较强的致癌、致突变作用。简介介四四.马兜铃酸类马兜铃酸类 u马兜兜铃酸中毒酸中毒临床病理表床病理表现： 急性肾功能衰竭急性肾功能衰竭 肾小管变性及萎缩肾小管变性及萎缩 肾间质纤维化致慢性肾功能衰竭肾间质纤维化致慢性肾功能衰竭 泌尿和消化道肿瘤泌

74、尿和消化道肿瘤 低血钾性瘫痪低血钾性瘫痪 u马兜铃酸中毒事件马兜铃酸中毒事件国外：国外： 19931993年，比利时医学界发现马兜铃酸导致肾年，比利时医学界发现马兜铃酸导致肾病，国外将其称为病，国外将其称为“中草药肾病中草药肾病” 2000 2000年，美国食品药品管理局（年，美国食品药品管理局（FDAFDA）告知）告知各保健专业机构，因服用含马兜铃酸的产品而出各保健专业机构，因服用含马兜铃酸的产品而出现威胁生命安全的不良反应。现威胁生命安全的不良反应。 2001 2001年年6 6月，美国月，美国FDAFDA宣布禁用关木通、马兜宣布禁用关木通、马兜铃等铃等1313种植物药。种植物药。u马兜铃

75、酸中毒事件马兜铃酸中毒事件国外：国外： 2002 2002年年2 2月世界卫生组织国际肿瘤研究所致月世界卫生组织国际肿瘤研究所致癌源鉴定评价中心，在法国里昂召开的关于传统癌源鉴定评价中心，在法国里昂召开的关于传统草药、某些真菌毒素、萘和苯乙烯等致癌性的讨草药、某些真菌毒素、萘和苯乙烯等致癌性的讨论评议工作组会议上（有论评议工作组会议上（有1414国国2828位专家参加）讨位专家参加）讨论了马兜铃属某些植物和马兜铃酸致癌性问题及论了马兜铃属某些植物和马兜铃酸致癌性问题及相关机理的研究报告，有关研究结果得到与会专相关机理的研究报告，有关研究结果得到与会专家（包括中国国内专家）的认同。家（包括中国国

76、内专家）的认同。 20022002年年6 6月，美国月，美国FDAFDA宣布禁售宣布禁售7070多种含马兜多种含马兜铃酸的龙胆泻肝丸等中成药。铃酸的龙胆泻肝丸等中成药。 u马兜铃酸中毒事件马兜铃酸中毒事件国内：国内：19641964年，医学报道马兜铃酸造成肾损害，因其年，医学报道马兜铃酸造成肾损害，因其只是个例，所以未引起医务界的重视。只是个例，所以未引起医务界的重视。 1998 1998年，南京军区总医院报告了富含马兜铃酸年，南京军区总医院报告了富含马兜铃酸的关木通可引发慢性肾损害的病例，引起了医务界的关木通可引发慢性肾损害的病例，引起了医务界的警觉。的警觉。 1998 1998年年1010

77、月月20032003年年6 6月，北京中日友好医院月，北京中日友好医院肾内科有肾内科有100100多例此类患者入住，其中最多的就是多例此类患者入住，其中最多的就是服用龙胆泻肝丸导致的肾损害病人。服用龙胆泻肝丸导致的肾损害病人。 u马兜铃酸中毒事件马兜铃酸中毒事件国内：国内： 2003 2003年年2 2月月2222日，日，2828位自称因长期服用龙胆泻肝丸位自称因长期服用龙胆泻肝丸而致肾病的受害者与北京炜衡律师事务所联合召开而致肾病的受害者与北京炜衡律师事务所联合召开“新闻通报会新闻通报会”，正式宣布向龙胆泻肝丸最大的制造商，正式宣布向龙胆泻肝丸最大的制造商，具有具有300300多年历史的中药

78、金字招牌多年历史的中药金字招牌“同仁堂同仁堂”提出损害提出损害赔偿。至赔偿。至3 3月月1010日，起诉人数达日，起诉人数达106106位。位。 至此，国内舆论界形成了一个类似的至此，国内舆论界形成了一个类似的“马兜铃酸马兜铃酸风波风波”。国内的几家报纸上，连续刊载了。国内的几家报纸上，连续刊载了“中药吃出中药吃出肾病，祸起马兜铃酸肾病，祸起马兜铃酸”、“知名中成药被指严重致病知名中成药被指严重致病”等报道，并有临床专家及药物学家的分析评论，一等报道，并有临床专家及药物学家的分析评论，一时间对人们长期以来认为中药安全无毒的概念形成了时间对人们长期以来认为中药安全无毒的概念形成了一种冲击。一种冲

79、击。 马兜铃科马兜铃属植物马兜铃科马兜铃属植物主要毒性成分：主要毒性成分：马兜铃酸马兜铃酸 （A AAristolochicacidA，主）主）马兜铃酸马兜铃酸 B B马兜铃酸马兜铃酸 C C1. 来源来源 （1）含马兜铃酸的中草药含马兜铃酸的中草药：关木通、广防己、马兜铃、天仙藤、青木关木通、广防己、马兜铃、天仙藤、青木香、寻骨风和朱砂莲以及铁线莲马兜铃、蛇香、寻骨风和朱砂莲以及铁线莲马兜铃、蛇根马兜铃、印度马兜铃根马兜铃、印度马兜铃 。 （2）复方中药制剂复方中药制剂 龙胆泻肝丸、甘露消毒丸、妇科分清丸、龙胆泻肝丸、甘露消毒丸、妇科分清丸、排石冲剂、导赤丸等排石冲剂、导赤丸等1. 来源来源

80、 2. 形态学检验形态学检验 右 中 左 马兜铃植物及其药材形态左：马兜铃药材；中：马兜铃植物；右：青木香药材1.果实；2.种子；3.花枝；4.根三种木通药材原植物左：木通马兜铃；中：白木通；右：小木通1.花；2.果；3.茎叶2. 形态学检验形态学检验 粉防己和广防己原植物及药材形态上：粉防己；下：广防己3.马兜铃的检验 （1） 结构性质和检材处理 硝基菲类化合物 具羧基，酸性较强 马兜铃酸A结构式u药材处理：药材处理： 可先用含可先用含2 2甲酸的甲醇或丙酮提取，过滤，甲酸的甲醇或丙酮提取，过滤，挥干；残渣用挥干；残渣用0 0.5.5氢氧化钠溶解，乙醚萃取除氢氧化钠溶解，乙醚萃取除去碱性和中

81、性有机杂质；将碱水液用稀硫酸酸化去碱性和中性有机杂质；将碱水液用稀硫酸酸化至至pH2pH2，再用乙醚萃取，挥干乙醚，残渣用醇溶再用乙醚萃取，挥干乙醚，残渣用醇溶解后供检。解后供检。 u血、组织：血、组织： 三氯乙酸沉淀蛋白，乙醚、氯仿萃取，必要三氯乙酸沉淀蛋白，乙醚、氯仿萃取，必要时碱水反提。时碱水反提。（2 2）薄层色谱法）薄层色谱法 吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶 展开剂：加入少量有机酸避免马兜铃酸解离展开剂：加入少量有机酸避免马兜铃酸解离而导致斑点脱尾而导致斑点脱尾 定位：黄色定位：黄色 （3）高效液相色谱法和液高效液相色谱法和液/质联用质联用法法 马兜铃酸具有较强的酸性，分析宜采用反相马兜铃

82、酸具有较强的酸性，分析宜采用反相离子抑制色谱或离子对色谱离子抑制色谱或离子对色谱 色谱条件色谱条件色谱柱色谱柱: :Hypersil C18 (200 mm 416 mm ,5m) 流动相流动相: : 甲醇甲醇1.28 %四丁基溴化氨四丁基溴化氨pH 3.6 醋酸醋酸-醋酸钠醋酸钠缓冲液缓冲液 (体积比体积比211) , 流速流速1.0 mL/ min 检测波长检测波长: :316 nmChromatography by HPLCA Radix Aristolochiae ;B Standard ;s Aristolochic acid A五、斑蝥五、斑蝥有效成分：斑蝥素有效成分：斑蝥素( (

83、cantharidincantharidin) ) 毒毒性性：纯纯斑斑蝥蝥素素0.01-0.060.01-0.06g g可可致致死死；皮皮肤肤、粘粘膜发泡膜发泡斑蝥外观：斑蝥外观： 斑蝥（左）与绿芫青（右）的形态图斑蝥（左）与绿芫青（右）的形态图 一般性质一般性质 斑斑蝥蝥酸酸酐酐, ,遇遇碱碱开开环环遇遇酸酸闭闭环环, ,升升华华提提取取净净化化, , 斑斑蝥蝥素素不不溶溶于于冷冷水水，易易溶于丙酮、氯仿。斑蝥素易升华。溶于丙酮、氯仿。斑蝥素易升华。斑蝥素 斑蝥素盐阴离子 检验方法：检验方法：n n检材处理：检材处理： 碱碱水水浸浸提提，有有机机溶溶剂剂除除杂杂质质，水水层层酸酸化化，氯仿萃

84、取氯仿萃取n n化学检验化学检验 对二氨基苯甲醛反应对二氨基苯甲醛反应: :紫红色紫红色 间苯二酚反应间苯二酚反应: :绿色荧光绿色荧光 升升华华与与显显微微结结晶晶试试验验：无无色色透透明明短短棒棒状状或或棱棱柱柱状状晶晶体体滴滴加加氢氢氧氧化化钡钡，束束状状针针晶晶簇簇检验方法：检验方法：n n气质联用分析：气质联用分析： 分子离子峰：分子离子峰：分子离子峰：分子离子峰：196196196196； 质谱峰：质谱峰：质谱峰：质谱峰：128128128128（B B B B）、）、）、）、96969696、70707070、39393939、41414141等等等等 图谱质素素蝥蝥斑斑六、钩吻

85、碱六、钩吻碱钩吻，俗称大茶药、断肠草、大炮叶等钩吻，俗称大茶药、断肠草、大炮叶等剧毒，叶剧毒，叶35片可中毒致死片可中毒致死钩吻生物碱，易溶于乙醚、氯仿、乙醇钩吻生物碱，易溶于乙醚、氯仿、乙醇主要成分：主要成分：钩吻素子钩吻素子钩吻素子钩吻素子( (koumine)koumine)钩吻素甲钩吻素甲钩吻素甲钩吻素甲( (GelsemineGelsemine) )钩吻素寅钩吻素寅钩吻素寅钩吻素寅( (KoumincineKoumincine) )钩吻素卯钩吻素卯钩吻素卯钩吻素卯( (kouminidinekouminidine) )钩吻素辰钩吻素辰钩吻素辰钩吻素辰( (kounidine)koun

86、idine)钩吻素酉钩吻素酉钩吻素酉钩吻素酉( (sempervinesempervine) )钩吻素丁钩吻素丁钩吻素丁钩吻素丁( (koumicine)koumicine)钩吻素戊钩吻素戊钩吻素戊钩吻素戊( (koumidine)koumidine)钩吻素己钩吻素己钩吻素己钩吻素己( (GelsenicineGelsenicine) )钩吻素庚钩吻素庚钩吻素庚钩吻素庚( (elsenidineelsenidine) )等等等等 国国国国产钩产钩吻中吻中吻中吻中所含生物碱以所含生物碱以所含生物碱以所含生物碱以钩钩吻素子、吻素子、吻素子、吻素子、钩钩吻素吻素吻素吻素为为其其其其, ,甲含量最高甲

87、含量最高甲含量最高甲含量最高主要成分。主要成分。主要成分。主要成分。钩钩吻素甲吻素甲吻素甲吻素甲( (GelsemineGelsemine) )结结构示意构示意构示意构示意图图毒性毒性最大最大uu钩吻的药理作用及临床应用：钩吻的药理作用及临床应用： 抗肿瘤作用抗肿瘤作用 免疫调节作用免疫调节作用 抗炎镇痛作用抗炎镇痛作用 扩瞳作用扩瞳作用 畜禽复壮作用畜禽复壮作用uu钩吻的主要中毒症状：钩吻的主要中毒症状： 头晕、视物障碍、筋肉无力、心跳呼头晕、视物障碍、筋肉无力、心跳呼吸加快、烦躁不安、咽喉与腹部有烧吸加快、烦躁不安、咽喉与腹部有烧灼感、恶心呕吐剧烈腹痛灼感、恶心呕吐剧烈腹痛, ,内脏及大小

88、内脏及大小便出血等严重的消化道毒性反应，运便出血等严重的消化道毒性反应，运动神经末梢麻痹，可呼吸衰竭而导致动神经末梢麻痹，可呼吸衰竭而导致死亡死亡uu前处理：前处理： 碱性碱性pH12pH12，乙醚萃取乙醚萃取uu检验：检验： 1 1）重铬酸钾）重铬酸钾- -硫酸反应硫酸反应 红色红色红紫红紫蓝绿色条纹蓝绿色条纹 2）MandelinMandelin试剂显色试剂显色 紫色紫色紫蓝色紫蓝色蓝色蓝色3 3）薄层（）薄层（TLCTLC） 与与乌乌头头类类似似，氯氯仿仿- -无无水水乙乙醇醇（8 8:2:2）展展开，开，碘化铋钾显色或钒硫酸试剂显色碘化铋钾显色或钒硫酸试剂显色4 4）GCGC： HP-5HP-5柱，柱，FIDFID、NPDNPD检测检测GC/MS