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1、细胞病理学概论细胞病理学概论汕头大学医学院第一附属医院汕头大学医学院第一附属医院细胞细胞（cellC）组织组织（tissue）器官器官（organ）系统系统（system）细胞病理学概论细胞病理学概论细胞病理学的概念 细胞病理学的内容及任务 细胞病理学在医学中的应用 细胞病理学标本采集和处理方法 细胞病理学涂片固定和染色方法 人体正常细胞的基本结构、分类及形态 一、细胞病理学的一、细胞病理学的定义定义细胞病理学（cytopathologycytopathology）：）：是以组织学为基础，通过检查细胞的形态学特点，进行健康和疾病的筛查、诊断和研究的一门学科。二、细胞病理学的内容二、细胞病理学的
2、内容 根据标本采集方法不同，分为：（1）脱落细胞学（exfoliative cytology）：包括自行脱落细胞标本及刮擦细胞标本。 （2）细针吸取（穿刺）细胞学（fine-needle aspiration cytology）。细胞病理学的主要任务主要任务：对无症状个体进行癌前病变的筛检，对有症状或有体征患者进行诊断和鉴别诊断。三、细胞病理学的主要任务三、细胞病理学的主要任务人们常常认为：细胞病理学就是查癌细胞？！对，但不完整！四、细胞病理学在临床诊断中的应用四、细胞病理学在临床诊断中的应用1进行人群或癌症高发区的普查：进行人群或癌症高发区的普查：一般为定期有的放矢地检查某种癌症，可发现病人
3、自己感觉不到症状的癌瘤，包括不少早期的恶性肿瘤，为早期治疗争取时间，大大改善病人的预后。例如：坚持多年的防癌普查使全世界宫颈癌的死亡率和晚期癌的发生率普遍下降。2.诊断肿瘤，发现早期癌，为早期治疗提供依据：诊断肿瘤，发现早期癌，为早期治疗提供依据： 细胞学检查是肿瘤诊断的重要方法之一。对较小肿物或体征不明显或病人感觉不到症状时，到医院体检细胞学检查也能发现早期癌。四、细胞病理学在临床诊断中的应用四、细胞病理学在临床诊断中的应用3癌瘤治疗后随诊癌瘤治疗后随诊 恶性肿瘤患者治疗后定期复查或确定是否复发。细胞学检查是最方便的方法之一。 4认识癌前病变认识癌前病变 细胞学诊断能够发现癌前病变，所谓癌前
4、病变就是在一些致癌因素长期作用下，其发展为癌潜在危险的某些形态变化，经过治疗可以转归正常。因此，为癌症防治提供形态学依据,是营养干预试验和药物阻断治疗癌前病变转归的重要监测指标。 四、细胞病理学在临床诊断中的应用四、细胞病理学在临床诊断中的应用5提示良性病变提示良性病变 针吸肿物亦能提示炎症感染，如淋巴结肿物针吸,依据一定形态特征提示化脓性炎症或结核性病变等。脱落细胞学检查也能够明确某些良性病变，如宫颈刮片发现线索细胞提示细菌性阴道病，发现核周空穴细胞则提示人乳头瘤病毒感染等。 四、细胞病理学在临床诊断中的应用四、细胞病理学在临床诊断中的应用五、细胞病理学的应用价值五、细胞病理学的应用价值1无
5、创伤性取材或微创性取材无创伤性取材或微创性取材 取材途径简便快速，刮、涂、印、刷、抹、摩擦、离心集中和针吸、穿刺等，对病人损伤极小。以此奠定了细胞病理学应用的前景。 脱落细胞学主要利用病人分泌物和排泄物进行检查。如病人咯出的痰、乳头的分泌物、尿、胸、腹水等。针吸或小针穿刺对体表和内脏肿物进行细胞学检查。小针的外径不超过mm或不超过0.9mm。体表肿物操作方便,经皮取材；内脏肿物在模拟定位机、CT、超声检查等引导下经皮取材。理论上针吸可能引起针道种植，实际发生极少，有报道发生率0.005%。针吸或小针穿刺对病人预后有没有不良影响，小针吸或小针穿刺对病人预后有没有不良影响，小针穿刺是否安全？！针穿
6、刺是否安全？！争论的焦点在乳腺肿物穿刺与否，实践证明如下述：（a）鲁宾(Robbing)等通过美国纽约纪念医院1576例乳癌根治术患者的追踪研究，认为针吸对乳癌5年存活率没有影响。（b）勃尔(Berg)等将患者按年龄、肿瘤组织型、组织分级、原发瘤大小和淋巴结转移五项指标分针吸组和非针吸组370对，连续观察15年，结果两组病人5年、10年和15年生存率相仿，无统计学差异。（c）阚秀等总结713例行根治术乳癌病人，分为针吸与非针吸两组，两组原发肿瘤大小，淋巴转移及病理类型几种较重要的影响预后因素基本一致。结果两组5年存活率分别为79.5%及72.7%；2年内死亡率分别为7.9%和10.8%，均无统
7、计学差异。当今在国际和国内广泛开展针吸细胞病理学检查，行之安全。2应用研究范围广泛应用研究范围广泛 全身各系统器官几乎都能应用细胞学检查方法。鼻咽刮片、食管拉网、溢乳涂片、宫内膜吸片、宫颈和阴道刮片、痰检、尿检、内镜刷片等；以及甲状腺、纵隔和肺、胸膜、肝、胰腺、腹膜后肿物、前列腺、骨、皮肤和软组织肿物等，针吸均可用细胞病理学方法进行诊断。 五、细胞病理学的应用价值五、细胞病理学的应用价值3诊断的敏感性和特异性尚满意诊断的敏感性和特异性尚满意 “敏感性和特异性”为评价细胞学诊断水平的指标。涂片细胞形态结构清晰，核内微细结构清楚，对诊断起了不可忽视的作用。 五、细胞病理学的应用价值五、细胞病理学的
8、应用价值4 4难于获取组织病理诊断时，细胞病理难于获取组织病理诊断时，细胞病理学可以达到形态学诊断目的：学可以达到形态学诊断目的： 如肺和纵隔或腹腔肿物不适宜手术的病例，经皮穿刺细胞学大部分能够明确肿物性质和基本的组织类型。给放疗或化疗提供形态学诊断依据。五、细胞病理学的应用价值五、细胞病理学的应用价值5细胞病理学可代替部分冷冻切片检查细胞病理学可代替部分冷冻切片检查 如乳腺肿物针吸细胞学报告肯定是癌，术中一般不再做冷冻切片检查，缩短了手术时间。又如某些部位肿物，术中取活检困难时可针吸涂片诊断，确诊性质时直接手术切除。此时，细胞学专家掌握的诊断标准严格，若形态不十分肯定时，必须冷冻切片检查。五
9、、细胞病理学的应用价值五、细胞病理学的应用价值细胞病理学诊断多基于光学显微镜观察，在作出诊断前，不仅应仔细考虑相关的组织学变化，而且应考虑标本的质量标本的质量！细胞病理学的标本采集及处理细胞病理学的标本采集及处理所获细胞能否代表病变靶组织或器官的细胞群体，是细胞病理学诊断结果准确和可靠的前提。细胞病理学标本采集方式：细胞病理学标本采集方式：（一）自行脱落细胞标本（一）自行脱落细胞标本自行脱落细胞标本自上皮表面，包括：咳出：如痰液。排泄、导尿或膀胱镜：如尿液。挤压：如乳头分泌物等。自行脱落细胞标本主要特点有：自行脱落细胞标本主要特点有：宜从临床病变器官获取标本。标本内常含大量各种不同来源、不同类
10、型的细胞。细胞成分保存较差。标本内可含有炎症细胞、巨噬细胞、微生物和外源性污染物。能进行多次采样。（二）刮擦细胞标本（二）刮擦细胞标本指通过物理作用刮擦取得的细胞标本，包括：刷取（brushings）：如气管、子宫颈。刮取（scrapings）：如乳头、皮肤、 子宫颈。灌洗（lavage）：用等渗生理盐水溶液 冲洗所得液体，如 支气管。 细胞病理学标本采集方式：细胞病理学标本采集方式：刮擦细胞标本特点：刮擦细胞标本特点： 、能直接从病变器官表面采样，如子宫颈和支气管。 、使用纤维支气管镜能直接从器官内部获取标本。 、细胞成分保存良好，但在结果解释时，不能采用与自行脱落细胞相同的标准。 、能获得
11、上皮细胞下的病变标本。（三）细针吸取（穿刺）细胞标本（三）细针吸取（穿刺）细胞标本除少数体内器官外，都能通过穿刺法取得细胞标本。放射影像技术有助于对小而深、移动且难以触摸的病变部位定位。通过穿刺吸取或非吸取法，从充满液体的器官或实体性器官中获得细胞标本，如肿瘤、心包腔积液、胸腔积液、腹腔积液、脑脊液和玻璃体液等。 细胞病理学标本采集方式：细胞病理学标本采集方式：“手枪式”（Pistol grip） 手柄握笔式针吸器（Tao Aspirator）细针吸取（穿刺）细胞标本主要特点有：细针吸取（穿刺）细胞标本主要特点有：良好的穿刺和制片技术可获得最佳的结果。良好的穿刺和制片技术可获得最佳的结果。体内
12、任何实体器官都能通过触摸或导引法采样，如借助体内任何实体器官都能通过触摸或导引法采样，如借助内窥镜技术可经直肠、阴道、胸腔、腹腔等部位穿刺。内窥镜技术可经直肠、阴道、胸腔、腹腔等部位穿刺。需要借助外科病理学知识解释结果。需要借助外科病理学知识解释结果。方法简捷、费用低、创伤小、并发症少、禁忌证少，经方法简捷、费用低、创伤小、并发症少、禁忌证少，经皮肤穿刺术无需麻醉，易为病人接受，尤适用于门诊。皮肤穿刺术无需麻醉，易为病人接受，尤适用于门诊。局限性：对结缔组织、透明变性、血管性病变、大量坏局限性：对结缔组织、透明变性、血管性病变、大量坏死物、囊性变或出血性病变等，可能采样不足。死物、囊性变或出血
13、性病变等，可能采样不足。细胞病理学标本的制备涂片方法：A、直接涂片（direct smear）是将新鲜标本直接涂在载玻片上。B、间接涂片（indirect smear）是将各种液体标本（如生理盐水或运送培养基）进行浓缩处理，适用于细胞少的标本。直接涂片法直接涂片法间接涂片法间接涂片法CELL TRANSFER METHOD RepresentativeHomogenousSample（具有代表性的样品）100% collected cells transferredSurePath Slide细胞涂片的制备：细胞病理学标本的固定方法；细胞病理学标本的浓缩技术；细胞病理学标本的染色方法。细胞标本
14、的固定方法：细胞标本的固定方法：（一）湿固定（一）湿固定（二）空气干燥固定（二）空气干燥固定 （一）湿固定（一）湿固定 湿固定（湿固定（wet fixation）是使细胞的原生质脱水、）是使细胞的原生质脱水、蛋白质凝固达到固定目的。蛋白质凝固达到固定目的。 常用固定液为乙醇类液体，有浸润法或包被法，常用固定液为乙醇类液体，有浸润法或包被法，湿固定可引起细胞皱缩。湿固定可引起细胞皱缩。（二）空气干燥固定（二）空气干燥固定 空气干燥固定（空气干燥固定（air drying fixation）是通过空）是通过空气蒸发的方式达到固定目的。最好是逆着气流方气蒸发的方式达到固定目的。最好是逆着气流方向尽快
15、干燥。向尽快干燥。 细胞标本的浓缩技术：细胞标本的浓缩技术：1离心法和细胞离心法离心法和细胞离心法 ；2滤膜过滤法（滤膜过滤法（membrane filtration） 3细胞块法细胞块法 4液基细胞学（液基细胞学（liquid based cytology，LBC）技术）技术 1离心法和细胞离心法离心法和细胞离心法 ： 适用于大量液体标本，如浆膜腔积液、尿液或生理盐水冲洗液等。细胞离心机2滤膜过滤法（滤膜过滤法（membrane filtration） 适用于大量液体、少量细胞的标本； 是用各种孔径的滤膜（如醋酸纤维薄膜、聚碳酸酯微孔膜），通过施加一定压力使液体标本中细胞过滤到滤膜上，制成涂片。与离心法相比，能最大限度的捕获标本中的细胞。滤膜过滤法
