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1、微生物的常规鉴定技术微生物的常规鉴定技术微生物的常规鉴定技术一、形态结构和培养特性观察 二、生理生化试验二、生理生化试验微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 二、生理生化试验、糖酵解试验 、淀粉水解试验 3、V-P试验 4、甲基红(Methyl Red)试验 5、靛基质(Imdole)试验6、硝酸盐(Nitrate)还原试验二、生理生化试验7、明胶(Gelatin)液化试验 8、尿素酶(Urease)试验 9、氧化酶(Oxidase)试验 10、硫化氢(H2S)试验11、
2、三糖铁(TSI)琼脂试验 12、硫化氢-靛基质-动力(SIM)琼脂试验其他鉴定手段染色体DNAG+Cmol%含量 生物体的遗传物质DNA中四种碱基G、C、A、T的排列和比例是DNA特性的决定因素。染色体DNA G+Cmol%含量即DNA的碱基组成具有种特异性且不受菌龄和外界因素的影响,成为细菌分类和菌种鉴定的重要指标 测定方法:纸层析法纸、浮力密度法、高效液相色谱法、热变性温度(Tm)测定法 、连续荧光检测法 微生物与乳酸菌的鉴定参见伯杰氏细菌手册与乳酸细菌分类鉴定及方法 API微生物鉴定试剂条法国梅里埃公司生产法国梅里埃公司生产3、V-P试验 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生
3、丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。 4、甲基红(Methyl Red)试验 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖,在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸,进一步分解中,由于糖代谢的途径不同,可产生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物,可使培养基pH值下降至pH4.5以下,使甲基红指示剂变红。 5、靛基质(Imdole)试验 某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。 6、硝酸盐(Nitrate)还原试验有些细菌具有还原硝酸盐的能力,可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。 结束语结束语谢谢大家聆听!谢谢大家聆听!22