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1、血站血液检测项目血站血液检测项目及各检测项目的意义及各检测项目的意义根据中华人民共和国国家标准根据中华人民共和国国家标准GB 18467-2001献血者健康检查要求,保证献血者的献血者健康检查要求,保证献血者的身体健康和受血者的输血安全。对献血者身体健康和受血者的输血安全。对献血者血液检验要求做了规定,主要包括以下七血液检验要求做了规定,主要包括以下七项内容项内容:血红蛋白检测血红蛋白检测血型检测(血型检测(ABO血型检测和血型检测和RhD血型检血型检测)测)丙氨酸氨基转移酶检测(丙氨酸氨基转移酶检测(ALT)乙型肝炎病毒表面抗原检测(乙型肝炎病毒表面抗原检测(HBsAg)丙型肝炎病毒抗体检测
2、(丙型肝炎病毒抗体检测(HCV抗体)抗体)艾滋病病毒抗体检测(艾滋病病毒抗体检测(HIV抗体)抗体)梅毒螺旋体抗体检测(梅毒螺旋体抗体检测(TP)下面就分别介绍这七个检测项目如下:下面就分别介绍这七个检测项目如下:一、血红蛋白检测:一、血红蛋白检测:方法:方法:1、硫酸铜法、硫酸铜法 2、血红蛋白分析仪检测法、血红蛋白分析仪检测法标准:标准:1、硫酸铜法:、硫酸铜法:男男1.0520 女女1.0500 2、血红蛋白分析仪检测法:、血红蛋白分析仪检测法: 男男120g/l 女女110g/l意义:意义:1、保证献血者健康的要求:、保证献血者健康的要求:通过血红蛋白的检测可以反映献血者的血通过血红蛋
3、白的检测可以反映献血者的血红蛋白水平是否符合献血要求,因为献血红蛋白水平是否符合献血要求,因为献血本身就是一个失血的过程,如果让一个本本身就是一个失血的过程,如果让一个本身就贫血的人去献血的话,就会给献血者身就贫血的人去献血的话,就会给献血者的身体造成更大的损害,所以说血红蛋白的身体造成更大的损害,所以说血红蛋白检测是保证献血者健康的要求。检测是保证献血者健康的要求。2、保证血液质量的要求:、保证血液质量的要求:这一点从何说起呢?这一点从何说起呢?全血及成分血质量要求中有这样一项规定:全血及成分血质量要求中有这样一项规定:血细胞比容(压实红细胞占全血的百分比):血细胞比容(压实红细胞占全血的百
4、分比):ACD方方0.30 CPD方方0.35 (125g/l相当于相当于0.38)采集的血液加上保养液,如果是贫血的话,血细采集的血液加上保养液,如果是贫血的话,血细胞比容很难达到上述要求,所以说血红蛋白检测胞比容很难达到上述要求,所以说血红蛋白检测是保证血液质量的要求。是保证血液质量的要求。二、血型检测(二、血型检测(ABO血型检测和血型检测和RhD血型血型检测)检测)方法:方法:1、试管法、试管法 2、玻片法(纸板法)、玻片法(纸板法) 3、微柱凝胶血型卡法(临床上用的、微柱凝胶血型卡法(临床上用的较多)较多)标准:标准:ABO及及Rh血型相符血型相符意义:正确鉴定血型,保证用血者同型输
5、意义:正确鉴定血型,保证用血者同型输血,保证输血安全。血,保证输血安全。三、丙氨酸氨基转移酶检测(三、丙氨酸氨基转移酶检测(ALT)方法:方法:1、酮体粉法(仅限于初检使用)、酮体粉法(仅限于初检使用) 2、赖氏法、赖氏法 3、速率法、速率法标准:标准:1、酮体粉法:阴性、酮体粉法:阴性 2、赖氏法:、赖氏法:25单位单位 3、速率法:、速率法:40单位单位意义:意义:1、肝胆疾病、肝胆疾病 传染性肝炎、肝癌、中毒性传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎待等。肝炎、脂肪肝和胆管炎待等。 2、心血管疾病、心血管疾病 心肌梗死、心肌炎、心力心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑出血等。衰竭时
6、肝淤血和脑出血等。 3、药物和毒物、药物和毒物 氯丙嗪、异菸肼、奎宁、氯丙嗪、异菸肼、奎宁、水杨酸制剂及乙醇,铅、汞、四氯化碳或有机磷水杨酸制剂及乙醇,铅、汞、四氯化碳或有机磷等。等。 4、创伤、运动、饮酒、疲劳等多种原因。、创伤、运动、饮酒、疲劳等多种原因。 5、在检测过程中,血样的运输、保存、温在检测过程中,血样的运输、保存、温度等多种条件也可以引起度等多种条件也可以引起ALT的升高。的升高。四、乙型肝炎病毒表面抗原检测(四、乙型肝炎病毒表面抗原检测(HBsAg)方法:方法:1、胶体金法(初筛时使用)、胶体金法(初筛时使用) 2、放射免疫法(因有放射污染,已很少用)、放射免疫法(因有放射污
7、染,已很少用) 3、酶联免疫法(采供血单位使用)、酶联免疫法(采供血单位使用) 4、化学发光法(临床在用,成本较高)、化学发光法(临床在用,成本较高)标准:阴性标准:阴性意义:意义:1、急性乙肝、急性乙肝 2、慢性乙肝、慢性乙肝 3、无症状携带者、无症状携带者五、丙型肝炎病毒抗体检测(五、丙型肝炎病毒抗体检测(HCV抗体)抗体)方法:方法:1、重组免疫印迹试验测定、重组免疫印迹试验测定HCV-IgG抗体(确认试验)抗体(确认试验) 2、ELISA法测定法测定HCV-IgG抗体抗体标准:阴性标准:阴性意义:丙型肝炎病毒(意义:丙型肝炎病毒(HCV)是输血后肝炎和散)是输血后肝炎和散发性非甲非乙型
8、肝炎的主要病原。发性非甲非乙型肝炎的主要病原。HCV感染后,感染后,可导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌等多种肝脏可导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌等多种肝脏疾病。疾病。现在用的现在用的ELISA法测定法测定HCV-IgG抗体,主要用于抗体,主要用于献血员的献血员的HCV感染筛查和临床实验室检测,抗感染筛查和临床实验室检测,抗HCV检测阳性提示感染过检测阳性提示感染过HCV;对大部分病例而;对大部分病例而言,抗言,抗HCV阳性常伴有阳性常伴有HCV RNA的存在。因此,的存在。因此,抗抗HCV是判断是判断HCV感染的一个重要标志。抗感染的一个重要标志。抗HCV阳性而血清中没有阳性而血清中没有HCV
9、RNA提示既往感染。有极提示既往感染。有极少数病例少数病例HCV阴性仍可检测到阴性仍可检测到HCV RNA。另外,。另外,某些慢性某些慢性HCV感染者的抗感染者的抗HCV可持续存在。可持续存在。六、艾滋病病毒抗体检测(六、艾滋病病毒抗体检测(HIV抗体)抗体)方法:方法:1、乳胶颗粒凝集试验测定抗、乳胶颗粒凝集试验测定抗HIV抗抗体(初筛时使用)体(初筛时使用) 2、ELISA法测定抗法测定抗HIV抗体(采供抗体(采供血单位使用)血单位使用) 3、免疫印迹法测定抗、免疫印迹法测定抗HIV抗体(确抗体(确认试验)认试验)标准:阴性标准:阴性意义:抗意义:抗HIV抗体阳性提示如下抗体阳性提示如下
10、1、感染了、感染了HIV,可作为传染源将,可作为传染源将HIV传播他人。传播他人。 2、抗、抗HIV阳性者(除外阳性者(除外18个月的婴儿),个月的婴儿),5年年之内将有之内将有10%30%的人发展为艾滋病。的人发展为艾滋病。 3、对抗、对抗HIV阳性的母亲所生婴儿,如阳性的母亲所生婴儿,如18个月个月内检测血清抗内检测血清抗HIV阳性,不能诊断为阳性,不能诊断为HIV感染,尚感染,尚需用需用HIV核酸检测或核酸检测或18个月后的血清抗体检测来个月后的血清抗体检测来判断。判断。七、梅毒螺旋体抗体检测(七、梅毒螺旋体抗体检测(TP)方法:方法:1、甲苯胺红不加热血清试验(、甲苯胺红不加热血清试验
11、(TRUST) 2、ELISA法测定抗梅毒螺旋体(法测定抗梅毒螺旋体(TP)抗)抗体(采供血单位使用)体(采供血单位使用) 3、密螺旋体颗粒凝集试验(、密螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)测定)测定抗抗TP抗体抗体 4、金标记免疫层析测定抗、金标记免疫层析测定抗TP抗体(初筛时抗体(初筛时使用)使用)标准:阴性标准:阴性意义:意义:1、甲苯胺红不加热血清试验、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),为非特异性试验,阴性结果),为非特异性试验,阴性结果不能排除梅毒感染,阳性结果需进一步做不能排除梅毒感染,阳性结果需进一步做抗梅毒螺旋体抗体试验确认。抗梅毒螺旋体抗体试验确认。 2、梅毒的血清学试验阳性,
12、只提示所、梅毒的血清学试验阳性,只提示所测标本中有抗类脂抗体或抗测标本中有抗类脂抗体或抗TP抗体存在,抗体存在,不能作为患者感染梅毒螺旋体的绝对依据,不能作为患者感染梅毒螺旋体的绝对依据,阴性结果也不能排除梅毒螺旋体感染,检阴性结果也不能排除梅毒螺旋体感染,检测结果应结合临床综合分析。测结果应结合临床综合分析。引起引起ELISA试验假阳性或假阴性试验假阳性或假阴性结果的主要标本因素:结果的主要标本因素:1、内源性物质、内源性物质由于一些人体内含有内源性物质,可以不由于一些人体内含有内源性物质,可以不同程度地影响检测结果。常见的内源性物同程度地影响检测结果。常见的内源性物质有:类风湿因子、补体、
13、嗜异性抗体、质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原的自身抗体、高免疫球蛋白血、嗜靶抗原的自身抗体、高免疫球蛋白血、超氧化物歧化酶、交叉反应物质和其它的超氧化物歧化酶、交叉反应物质和其它的物质等。另外,标本中脂质过高、胆红素、物质等。另外,标本中脂质过高、胆红素、血红蛋白等,均对血红蛋白等,均对ELISA检测结果有干扰作检测结果有干扰作用。用。2、外源性物质、外源性物质外源性物质常常是由于标本采集、运输或外源性物质常常是由于标本采集、运输或贮存不当所致。如标本溶血、细菌污染、贮存不当所致。如标本溶血、细菌污染、贮存不当、凝集不全、抗凝剂等的影响。贮存不当、凝集不全、抗凝剂等的影响。(1)标
14、本溶血标本溶血 各种原因引起的标本溶血,均各种原因引起的标本溶血,均会因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过会因红细胞破坏溶解时释放出大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为标记物的化物酶为标记物的ELISA检测中,会导致非检测中,会导致非特性显色,从而造成假阳性结果,因此,特性显色,从而造成假阳性结果,因此,在标本采集、运输或贮存过程中要尽量避在标本采集、运输或贮存过程中要尽量避免标本溶血。免标本溶血。(2)细菌污染细菌污染 一此菌体中可能含有内源性过一此菌体中可能含有内源性过氧化物酶,可能会干扰检测,因此,在标氧化物酶,可能会干扰检测,因此,在
15、标本采集、运输或贮存过程中要尽量避免标本采集、运输或贮存过程中要尽量避免标本被细菌污染。本被细菌污染。(3)贮存不当贮存不当 在冰箱中贮存时间过长的标本,在冰箱中贮存时间过长的标本,血清中的血清中的IgG可聚合成多聚体、可聚合成多聚体、AFP可形成可形成二聚体,在间接法二聚体,在间接法ELISA检测中可导致本底检测中可导致本底过高,造成假阳性结果;标本贮存时间过过高,造成假阳性结果;标本贮存时间过长,有时抗原或抗体的免疫活性减弱,也长,有时抗原或抗体的免疫活性减弱,也可造成假阴性结果。为了避免上述干扰,可造成假阴性结果。为了避免上述干扰,ELISA检测的标本最好为新鲜采集,如不能检测的标本最好
16、为新鲜采集,如不能立即检测,立即检测,5天内检测的标本需分离出血清天内检测的标本需分离出血清或血浆,于或血浆,于4冰箱中贮存,冰箱中贮存,1周后检测的周后检测的标本要低温冰冻贮存。标本要低温冰冻贮存。(4)凝集不全凝集不全 标本在采集后,需要一定时间标本在采集后,需要一定时间的凝集,才可以分离出血清。在实际工作的凝集,才可以分离出血清。在实际工作中,为了争取快速检测,常在标本未完全中,为了争取快速检测,常在标本未完全凝集时开始分离,使血清中含有纤维蛋白凝集时开始分离,使血清中含有纤维蛋白原,在原,在ELISA检测过程中形成肉眼可见的纤检测过程中形成肉眼可见的纤维蛋白凝块,造成假阳性结果,这类标
17、本维蛋白凝块,造成假阳性结果,这类标本在完全凝集后复查时变为阴性结果。为了在完全凝集后复查时变为阴性结果。为了避免上述干扰,这类标本要在完全凝集后避免上述干扰,这类标本要在完全凝集后在进行检测或采集时加入促凝剂。在进行检测或采集时加入促凝剂。(5)抗凝剂抗凝剂 为了快速进行检测,常在标本采为了快速进行检测,常在标本采集时加入一些抗凝剂,得到血浆进行检测。集时加入一些抗凝剂,得到血浆进行检测。常用抗凝剂有肝素、常用抗凝剂有肝素、EDTA、枸橼酸钠等,、枸橼酸钠等,这些抗凝剂均会对这些抗凝剂均会对ELISA检测存在一定的干检测存在一定的干扰。为了避免上述干扰,在进行检测时应扰。为了避免上述干扰,在进行检测时应根据检测目的选择合适的抗凝剂。(用肝根据检测目的选择合适的抗凝剂。(用肝素作为抗凝剂对素作为抗凝剂对ELISA检测影响较大)检测影响较大)综上所述,影响综上所述,影响ELISA检测的因素很多,因检测的因素很多,因此,仅凭此,仅凭ELISA检测不能进行诊断,只能为检测不能进行诊断,只能为临床诊断提供依据。临床诊断提供依据。结合我站的实际工作情况,对献血员进行结合我站的实际工作情况,对献血员进行解释时,一定要注意分寸,建议献血员去解释时,一定要注意分寸,建议献血员去医院结合临床进行诊断。医院结合临床进行诊断。