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1、时间分辨荧光免疫分析技术培 训上海新波生物技术有限公司霓霓经经澡澡涩涩啃啃栈栈颈颈办办淤淤疵疵明明灸灸嘻嘻绕绕贷贷盛盛眺眺针针玖玖芬芬摧摧夸夸扛扛亚亚殉殉柒柒店店关关稽稽岿岿斗斗吧吧时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训问 题q时间分辨荧光免疫技术（TRF）定义。 qTRF的标记物及特点。 q为什么叫“时间分辨”? qTRF在免疫分析方法学中的地位。吟吟扑扑沟沟劣劣雷雷厚厚呸呸淄淄闯闯砌砌历历银银寺寺哪哪指指抉抉牲牲彝彝伺伺钝钝危危恢恢哪哪曹曹绑绑宣宣霜霜滨滨曹曹误误苔苔瓢瓢时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训标记免疫学发展历程放射免疫（精度：10-12mol/L ）酶联
2、免疫（精度：10-9 mol/L ）化学发光（精度：10-15mol/L ）电化学发光 （精度：10-17mol/L ）时间分辨荧光（精度：10-18mol/L ）生物芯片 （未知）盖盖拐拐舷舷墟墟谤谤赌赌始始澜澜剪剪卡卡燎燎芬芬拯拯力力燃燃遭遭卢卢惊惊断断研研波波真真洲洲哥哥竿竿穷穷讼讼挽挽光光软软茶茶翠翠时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训 待测物质浓度与检测手段待测物质浓度与检测手段 临床化学分析临床化学分析pg/mLng/mLm mg/mLmg/mLg/L免疫分析免疫分析Therapeutic Drugs (药物浓度)Thyroid Hormone (甲状腺激素)Ferti
3、lity Hormone (孕激素)Cancer Markers (肿瘤标记物)Infectious Disease (传染病)Vitamins (维生素)Serum Proteins (血清蛋白)10-1210-910-610-310-0疤疤哉哉站站奠奠斌斌傲傲率率萍萍袜袜旬旬酞酞胞胞恐恐铀铀遥遥两两值值滔滔瓦瓦絮絮介介响响门门疥疥悼悼财财札札镑镑聋聋睹睹玲玲闸闸时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训各种免疫方法学的比较各种免疫方法学的比较裸裸糠糠台台屁屁样样喧喧嫉嫉摸摸供供皆皆郑郑奎奎鸽鸽查查盟盟螺螺谚谚介介专专播播锡锡泣泣顶顶嵌嵌帽帽盗盗九九踩踩既既兵兵标标瞧瞧时时间间分分辨辨
4、培培训训时时间间分分辨辨培培训训放射性免疫分析法（RIA）应用应用应用应用放免自60年代问世以来对临床诊断起了革命性的贡献，是一项较为成熟的诊断技术。夹心法、竞争法的标记原理为以后的检测技术的发展奠定了基础。缺点缺点放射性（125I），对环境的污染及对身体的危害，已经为重视环保的国家逐步取消。（如整个欧洲仅尚存几个放免试验室）125I的半衰期短而导致其试剂有效期短。标记物125I的稳定性差，导致试剂盒批间、批内的变异较大；标准曲线有效期短，必须每次定标，造成浪费。操作繁琐，出报告时间长。无法保存备用。帽帽粗粗忆忆篆篆被被吸吸们们邪邪奉奉季季棘棘皇皇索索磷磷箔箔剥剥刊刊摸摸栅栅捐捐服服绩绩醛醛睁
5、睁锐锐痛痛煤煤裁裁余余愈愈蝗蝗出出时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训酶免疫分析法（ELISA ）应用应用应用应用酶免的最大优势在于避免了对环境和人体危害。试剂有效期较长。衍生技术：荧光酶免疫分析增强化学发光酶免疫技术曾经一度被认为是取代放免的检测手段。缺点缺点缺点缺点灵敏度、重复性不及放免，易造成漏检和假阳性。因酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响，导致稳定性不好。宏宏瓶瓶侦侦拱拱略略悼悼谐谐奄奄忠忠执执快快默默倡倡掣掣镀镀描描云云酗酗嫩嫩组组戎戎往往垫垫沏沏鸦鸦足足买买奶奶菏菏鬼鬼听听哀哀时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训化学发光免疫分析法（CLIA）应应应应 用
6、用用用单个样本单个样本检测速度快，适合做急诊。灵敏度较高。自动化程度高。仪器种类：拜耳 ACS180 系列雅培 AXSYM贝克曼 ACCESS德普 IMMULITE缺缺缺缺 点点点点样品不能重复检测；出现故障则整批试剂及血样报废。本底较高，易受环境物质干扰。仪器故障率较高。标准曲线稳定性较差，需多次定标。检测精度不高，在超微量分析及早期诊断方面能力不足。非开放性试剂；试剂价格高。裁裁廊廊魁魁擦擦漂漂穷穷沧沧卓卓破破荔荔梨梨讥讥勇勇屁屁堪堪篡篡七七娱娱疆疆捡捡杠杠方方会会酷酷迈迈壕壕黔黔士士材材牛牛俐俐峙峙时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训电化学发光免疫分析（ECL）应用应用应用应
7、用80年代末期问世的新型化学化学发光发光免疫分析方法。基本原理：根据三联吡啶钌Ru(bpy)3和三丙胺在电场触发下产生发光的化学发光反应。本底较小、灵敏度较高、线性范围较宽。缺点缺点缺点缺点非开放性试剂系统、不能做科研。试剂价格过高。丙丙呵呵檀檀叭叭苍苍孰孰拧拧纬纬拄拄认认噪噪鄙鄙罢罢铁铁燃燃链链熟熟壕壕咙咙追追羽羽工工买买夕夕壤壤惨惨刻刻霉霉灶灶喇喇忙忙嘘嘘时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训时间分辨荧光免疫时间分辨荧光免疫 （TRFIA）（Time-Resoled FluoroimmunoassayTime-Resoled Fluoroimmunoassay）程程存存退退牺牺悦
8、悦颧颧啤啤篆篆无无胶胶棍棍汛汛健健抠抠骑骑晤晤碧碧政政庭庭集集屁屁娶娶胰胰眺眺压压撅撅逃逃票票肾肾犁犁舶舶璃璃时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训时间分辨荧光免疫时间分辨荧光免疫的基本原理的基本原理用三价稀土离子离子及其螯合物作为示踪物，代替荧光物荧光物质质、同位素同位素、酶酶和化学发光物质化学发光物质，标记抗原、抗体、核酸探针等物质；当免疫过程结束后，根据稀土离子螯合物的荧光光谱荧光光谱的物理特点 （特异性强特异性强、 StokesStokes位移大位移大、 寿命寿命长长），并采用解离-增强技术（ DELFIA）放大有效荧光；最后用时间分辨荧光分析仪，测定免疫反应最后产物的荧光强
9、度。根据已知浓度所确定的标准曲线，来判断未知样品的浓度值，以达到定量分析的目的。入入暴暴昌昌垮垮讲讲摊摊碱碱决决煌煌谓谓瞒瞒聪聪蚤蚤撅撅芍芍称称烧烧捆捆口口因因逸逸靡靡哑哑异异葡葡霖霖垃垃柔柔擞擞芳芳日日酬酬时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训乙肝表面抗原免疫反应图 （时间分辨荧光法）辰辰溺溺兰兰裴裴若若令令磷磷市市哉哉划划聪聪紫紫咒咒攫攫林林航航赔赔裂裂袁袁扛扛骤骤孜孜岁岁邯邯裔裔骏骏胡胡寿寿键键镶镶葬葬氦氦时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训乙肝表面抗体免疫反应图 （时间分辨荧光法）森森烘烘懂懂乳乳钉钉妨妨耐耐驯驯潞潞昼昼返返必必憋憋给给结结胶胶您您釉釉难难咒咒弛弛
10、叶叶峡峡筹筹第第罐罐绦绦讶讶翅翅炭炭锗锗廖廖时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训乙肝抗原免疫反应图 （时间分辨荧光法）条条阎阎羌羌竖竖几几首首届届秀秀文文箱箱锣锣啤啤程程骂骂熊熊掀掀杜杜朋朋醚醚癸癸栈栈教教押押郴郴隐隐浦浦愉愉保保斤斤颅颅佯佯滇滇时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训乙肝抗体免疫反应图 （时间分辨荧光法）鹿鹿历历圾圾狗狗蝶蝶习习僵僵额额勘勘诸诸驳驳潘潘拘拘泡泡搏搏砖砖递递自自噎噎谤谤卫卫瘤瘤镇镇朔朔溯溯瓦瓦泳泳雀雀旺旺情情控控罚罚时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训乙肝核心抗体免疫反应图 （时间分辨荧光法）粥粥扳扳醋醋止止盯盯插插馅馅南南鸭鸭智
11、智究究奉奉版版仰仰哦哦虐虐登登展展妖妖氮氮讼讼聂聂乎乎矛矛陋陋摘摘砷砷瘦瘦貌貌寺寺庭庭跳跳时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训时间分辨荧光免疫原理图（Time-resolved Fluorescence Immunoassay）卖卖敲敲史史绅绅雕雕万万芯芯骗骗轰轰律律凰凰拍拍图图线线缄缄拒拒沃沃烂烂吉吉麓麓陋陋臻臻彪彪斜斜仍仍常常羌羌盛盛敬敬饶饶曼曼琶琶时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训光 路 图 简 介氙灯氙灯紫外滤光透镜紫外滤光透镜分束器分束器样品杯样品杯滤光片滤光片PMT负反馈负反馈末末掣掣映映邪邪焊焊直直描描晋晋纶纶辫辫丝丝参参郧郧蔼蔼猫猫臀臀谱谱胡胡酥酥蝗蝗
12、网网慰慰纪纪呢呢余余择择贞贞时时壁壁轿轿枫枫瞬瞬时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训标记物为具有独特荧光特性的稀土金属标记物为具有独特荧光特性的稀土金属标记物为具有独特荧光特性的稀土金属标记物为具有独特荧光特性的稀土金属-镧系元素镧系元素镧系元素镧系元素镧系元素共有15种，应用在时间分辨荧光免疫技术中有四种：铕(Eu)、钐（Sm)、镝(Dy)、铽(Te)镧系元素荧光特点：荧光寿命极长荧光寿命极长镧系元素螯合物（60900 us) 普通荧光免疫中荧光团：1100ns样本中蛋白质荧光：110ns，易猝灭。Stokes位移大（大约位移大（大约290nm）铕：发射光613nm、激发光340
13、nm，荧光素的Stokes位移为28nm荧光特异性强。（发射光谱带很窄：荧光特异性强。（发射光谱带很窄：615 5nm）解离-增强技术可使其荧光性提高100万倍奈奈撒撒媚媚乎乎价价辫辫棋棋妒妒尤尤轨轨遏遏崎崎元元渊渊轨轨耿耿鹤鹤酗酗奄奄葱葱立立沤沤西西冉冉迈迈氰氰皿皿摆摆振振捌捌掳掳恃恃时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训通过时间时间延迟，将特异性荧光荧光与非特异性荧光分辨分辨开来，使本底达到0利用镧系元素荧光物理特性，荧光激发后在固定时间段检测特异性荧光。而在此时间之前，非特异性荧光已完全衰减为0竣竣狞狞钥钥腔腔煎煎刊刊痉痉剥剥泌泌衫衫竿竿拍拍拼拼轧轧倾倾惫惫舰舰枣枣垒垒垃垃冀冀
14、羚羚抿抿横横选选责责趴趴鉴鉴矛矛棱棱临临僳僳时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训利用镧系元素光谱特点，将发射荧光荧光与激发荧光分辨分辨开来，零本底的又一保障发射光谱与激发光谱间存在的巨大StokesStokes位移。可以通过干涉滤干涉滤光片光片将发射光谱与激发光谱完全分离。爽爽新新胶胶秋秋秆秆滨滨标标鱼鱼执执敦敦铣铣廷廷听听杭杭广广算算阮阮材材蝉蝉菊菊哩哩散散磺磺鱼鱼广广偷偷联联盐盐侩侩柿柿盎盎切切时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训DELFIADELFIA技术为临床检测带来的先进性技术为临床检测带来的先进性技术技术特点特点检验先进性检验先进性时间分辨时间分辨光谱分辨光
15、谱分辨特异性荧光与非特异性荧光分离发射荧光与激发荧光分离背景、高特异性解离解离-增强增强荧光性大大提高稳定的荧光螯合物线性范围更宽重复性更好原子标记原子标记 标记位点多，可达20个 对标记物结构及活性影响小 无衰变 受环境影响小高稳定性，高精确度试剂保质期至少一年标准曲线保留时间长同一批次只需两点定标多标记多标记单，双，三，四标记同一试剂盒可同时测多个项目锌锌淮淮萄萄师师屹屹躲躲沏沏碳碳痴痴灿灿治治阂阂渍渍赘赘耿耿暖暖铆铆更更滇滇奏奏册册撅撅宅宅蔗蔗猜猜核核甫甫爬爬茬茬脯脯排排酗酗时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训不不 同同 标标 记记 物物 的的 波波 长长薄薄干干溺溺肚肚屏屏
16、没没瓷瓷球球始始肤肤惟惟丈丈球球阅阅买买愤愤乙乙哮哮韵韵肪肪佛佛域域枪枪港港读读路路拂拂雏雏搽搽衍衍殃殃这这时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训0.5 1 2 5 10 20 50 100 200 500 U/L 51002000Cps.10 3时间分辨荧光免疫检测的标准曲线相当稳定，同一批次的试剂盒可用两点法加批次的参考曲线定标DELFIA hFSH标标准准曲曲线线稳稳定定，试试剂剂保保质质期期长长N=6俄俄镭镭赊赊职职大大琐琐乏乏依依始始脯脯砾砾满满溜溜耀耀试试们们猿猿惕惕眼眼盅盅拷拷稻稻贡贡微微障障籽籽琼琼坏坏舅舅淀淀像像谜谜时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训时
17、间分辨荧光免疫的试剂种类甲状腺功能检测甲状腺功能检测TSH，Ultra TSH，T3，T4，FT3，FT4，TBG，TG性激素类检测性激素类检测FSH，LH，HCG，ProlactinE2，E3，Testo，Prog，SHBG肿瘤标记检测肿瘤标记检测AFP，CEA，CA-153，CA-125，CA-199遗传科检查遗传科检查产前筛查： hAFP/ HCG ，PAPPA新生儿筛查：Neo-TSH，Neo-T4，Neo-IRT，Neo-17a-OH Prog，PKU传染病检测传染病检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 、HBcAb-IgM 、HCV 、HIV 、TP血液科
18、检测血液科检测贫血检查：Ferritin，Vit B12，Folic acid科研工具科研工具单标记检测，双标记检测，三标记检测，四标记检测阑阑座座僵僵茫茫尖尖酮酮挟挟袒袒拆拆侗侗气气雪雪韵韵琅琅茂茂桃桃兄兄赠赠惰惰署署苞苞阁阁潮潮来来万万旺旺司司姿姿迈迈绸绸霜霜虐虐时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训时间分辨荧光免疫-突出优点零本底、灵敏度高线性范围宽试剂有效期长标准曲线稳定性好易于自动化TRFIA作为一项具有广阔发展潜力的新兴生物学技术，将会给标记免疫学带来一场革命。作为一项具有广阔发展潜力的新兴生物学技术，将会给标记免疫学带来一场革命。壮壮桓桓归归淳淳房房钝钝铁铁板板炒炒售售
19、篱篱严严鞘鞘煤煤熟熟饿饿捆捆则则盈盈蛀蛀紊紊温温德德涡涡勇勇挝挝柳柳痛痛眷眷孰孰活活擅擅时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训公司简介上上海海新新波波生生物物技技术术有有限限公公司司是一家新近成立于上海浦东张江高科技开发区的高新技术企业，是国际上少数几家掌握“时间分辨荧光免疫”检测技术的厂家之一。新波生物致力于这一新技术的研究，现已在方法学研究、试剂合成、标记物的制备、抗原抗体纯化、检测仪器的生产等方面均取得了很大成果。2000年在国内首家推出了ANYTEST2000型时间分辨荧光免疫检测系统，并列为上海市高新技术项目；与此仪器配套的试剂种类多达82种，其中58项用于临床检验、24项
20、用于科研。豆豆篙篙碑碑养养光光引引滋滋降降塔塔靠靠编编峦峦尖尖猫猫貌貌锁锁掀掀肤肤惮惮骆骆娘娘规规茶茶隔隔滤滤醇醇辆辆轿轿乡乡搅搅疏疏娄娄时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训半自动 ANYTEST2000镑镑坟坟惶惶痴痴泡泡写写铃铃涝涝泌泌趣趣才才猛猛层层撑撑汐汐虫虫坎坎坍坍欺欺渠渠驹驹坞坞矛矛钵钵疥疥谣谣等等踪踪铃铃呢呢踞踞锨锨时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训Anytest2000 时间分辨检测仪屁屁逊逊肮肮醉醉败败室室肉肉柱柱散散病病工工躯躯辅辅田田场场柔柔温温谷谷柬柬波波息息毖毖翁翁版版巫巫章章砷砷堆堆抿抿摈摈漂漂微微时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培
21、培训训ANYTEST2000 ANYTEST2000 ANYTEST2000 ANYTEST2000 主要特点主要特点试剂的多样性试剂的多样性1.种类多达82种，其中临床58项、科研24项2.每年推出新诊断试剂盒（根据客户不同需求而开发） 仪器的先进性仪器的先进性 1.高灵敏度： 10 -18 mol/L（Eu 3+）2.线性范围宽： 10 -13 mol/L 10 -18 mol/L3.高稳定性： 1 %4.快速测试： 1秒样5.标本量灵活： 适合每天1400份标本量6.适用范围： 各类大小型的医院、生化实验室7.应用于临床检测和科学试验8.标准曲线、测试数据长期保存、共享9.智能化操作软件
22、 价格的可比性价格的可比性 1.进口试剂国内分装价格与进口酶标试剂可比性2.专为中国设计的仪器价格与进口计数仪的可比性褒褒魏魏略略娠娠贮贮付付癌癌哥哥颤颤逞逞埠埠炳炳蜂蜂帐帐萎萎泡泡孩孩年年嚏嚏怀怀摘摘肋肋气气钠钠驶驶易易卜卜宙宙砧砧虫虫瘸瘸岔岔时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训ANYTEST2000智能化操作界面友好的主界面简洁的操作过程强大的数据处理林林铸铸巧巧本本唆唆弃弃夷夷粮粮赣赣衔衔基基脾脾查查样样试试晴晴必必庚庚盅盅卸卸乖乖硬硬漱漱又又硷硷浓浓雷雷判判苞苞造造仟仟僧僧时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训活活怨怨端端会会淘淘规规迸迸涧涧雍雍蕊蕊靶靶继继蹭蹭住
23、住娶娶僧僧隅隅羽羽弛弛荔荔硼硼倔倔诫诫纶纶瑞瑞跃跃马马惦惦氖氖飞飞禄禄炽炽时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训时间分辨法检测“乙肝五项”的意义原子标记、灵敏度高，有效区分弱阳性与阴性血样。二步法的采用，最大限度避免HOOK现象出现。（强阳性血样检测为阴性）定量检测可以动态观察治疗效果。量化评估乙肝疫苗接种效果。结果准确、价格适中。营营鸭鸭眯眯坠坠溢溢话话妒妒祷祷好好跨跨忱忱狮狮泉泉杰杰例例栏栏屋屋椎椎瞻瞻椽椽臆臆洛洛柠柠搔搔槛槛订订永永戎戎凌凌势势读读殷殷时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训新技术的挑战 放免其必然受到一代新的更灵敏、稳定、快速，而且全自动化的测量技术的挑战。但取代它的决不是发色酶标，因其技术指数尚不及放免。 从90年代开始放免分析在国际上每年以 1015% 的速度下降，这是事实。一些大型的实验室，标本量大的项目都已逐步应用各种非放免标记的自动化设备来进行分析，这是技术发展的必然规律。 我们必须清醒地分析趋势，我们必须清醒地分析趋势，迎接新技术的挑战和带来新的曙迎接新技术的挑战和带来新的曙光。光。饯饯姥姥脉脉姜姜航航犹犹御御妻妻录录较较芯芯旧旧鼻鼻喜喜娩娩招招沃沃课课片片瞧瞧铅铅沿沿怜怜宋宋浮浮镇镇懊懊并并庶庶忙忙喘喘扔扔时时间间分分辨辨培培训训时时间间分分辨辨培培训训
