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1、第六章 微生物的遗传和变异微生物的遗传和变异优秀基本定义基本定义第一节第一节 微生物的遗传微生物的遗传第二节第二节 微生物的变异微生物的变异第三节第三节 基因重组基因重组第四节第四节 遗传工程在环境保护中的应用遗传工程在环境保护中的应用微生物的遗传和变异优秀遗传：生物的上一代将自己的一整套遗传因遗传：生物的上一代将自己的一整套遗传因子传递给下一代的行为或功能。它具有极其稳子传递给下一代的行为或功能。它具有极其稳定的特性。定的特性。基因：基因是基因：基因是DNA分子上具有一定功能的区分子上具有一定功能的区段，分为结构基因和调节基因段，分为结构基因和调节基因遗传型：又称基因型，指某一生物个体所含遗
2、传型：又称基因型，指某一生物个体所含有的全部遗传因子即基因的总和。有的全部遗传因子即基因的总和。表型：指某一生物所具有的一切外表特征及表型：指某一生物所具有的一切外表特征及内在特性的总和。遗传型在一定环境下的表现内在特性的总和。遗传型在一定环境下的表现微生物的遗传和变异优秀变异：生物体在某种外因或内因的作用下所变异：生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变，亦即遗传引起的遗传物质结构或数量的改变，亦即遗传型的改变。型的改变。饰变：指不涉及遗传物质结构改变而发生在饰变：指不涉及遗传物质结构改变而发生在转录、转译水平上的表型变化转录、转译水平上的表型变化 微生物的遗传和变异优
3、秀第一节第一节 微生物的遗传微生物的遗传经典实验经典实验核外核外DNADNA的种类的种类DNADNA的结构与复制的结构与复制DNADNA的变性和复性的变性和复性微生物的遗传和变异优秀经典试验：证明核酸是遗传信息的载体经典试验：证明核酸是遗传信息的载体1、转转化化实实验验：1928年年，Griffith等等分分别别用用肺肺炎炎R型型/S型型双双球球菌菌感感染染小小鼠鼠，得得知知S型型菌菌株株具具有感染能力；有感染能力；利利用用热热死死的的S菌菌株株与与R型型菌菌株株同同时时感感染染小小鼠鼠，发发现现小小鼠鼠染染病病，得得出出S型型肺肺炎炎双双球球菌菌可可以以将将具具有遗传功能的物质传递给有遗传功
4、能的物质传递给R型肺炎双球菌。型肺炎双球菌。1944年年，在在以以上上基基础础上上用用将将S型型菌菌的的各各组组分分分分别别与与R型型共共同同培培养养，得得出出结结论论S型型菌菌传传递给递给R型菌的不是性状本身而是遗传物质基础。型菌的不是性状本身而是遗传物质基础。微生物的遗传和变异优秀Griffith转化试验示转化试验示意意混合培养混合培养RII型活菌型活菌SIII型活菌型活菌SIII型热死菌型热死菌RII型活菌型活菌SIII型活菌型活菌健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康健康病死病死病死病死病死病死微生物的遗传和变异优秀加加S菌菌DNA加加S菌菌DNA及及DNA酶以酶以外的酶
5、外的酶加加S菌的菌的DNA和和DNA酶酶加加S菌的菌的RNA加加S菌的蛋白质菌的蛋白质加加S菌的荚膜多糖菌的荚膜多糖活活R菌菌长出长出S菌菌只有只有R菌菌1944年年O.T.Avery、C.M.MacLeod和和M。McCarty从从热热死死S型型S. pneumoniae中中提提纯纯了了可可能能作作为为转转化化因因子子的的各各种种成成分分，并在离体条件下进行了转化试验：并在离体条件下进行了转化试验：微生物的遗传和变异优秀只只有有S型型细细菌菌的的DNA才才能能将将S. pneumoniae的的R型型转转化化为为S型型。且且DNA纯纯度度越越高高，转转化化效效率率也也越越高高。说说明明S型型菌
6、菌株株转转移移给给R型型菌菌株株的是遗传因子的是遗传因子,即即DNA。微生物的遗传和变异优秀核外核外DNA的种类的种类核外染色核外染色体体真真核核生生物物的的“质质粒粒”原原核核生生物物的质粒的质粒线粒体线粒体细胞质基因细胞质基因叶绿体叶绿体（质体）（质体）中心体中心体卡巴颗粒卡巴颗粒酵母菌的酵母菌的2 m质粒质粒F因子因子R因子因子Col质粒质粒Ti质粒质粒巨大质粒巨大质粒降解性质粒降解性质粒微生物的遗传和变异优秀卡巴颗粒微生物的遗传和变异优秀DNA的结构与复制的结构与复制DNA的结构：双螺旋结构，每条链都由脱的结构：双螺旋结构，每条链都由脱氧核糖、磷酸交替排列构成，其中夹有碱氧核糖、磷酸交
7、替排列构成，其中夹有碱基。基。微生物的遗传和变异优秀脱氧脱氧核糖核糖碱基碱基磷酸磷酸A G C T基本单位脱氧核苷酸基本单位脱氧核苷酸微生物的遗传和变异优秀AGCT腺嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸胞嘧啶脱氧核苷酸胞嘧啶脱氧核苷酸 胸腺嘧啶脱氧核苷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸脱氧核苷酸的种类脱氧核苷酸的种类微生物的遗传和变异优秀连连 接接 ATGCATGCDNADNA的化学结构示意图的化学结构示意图微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀DNA的复制微生物的遗传和变异优秀DNA的变性和复性的变性和复性核酸变性：是指核酸双螺旋结构解开，氢键断裂，但并不涉及核苷酸间磷酸二
8、酯键的断裂。DNA的复性：变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分离的链重新缔合而形成双螺旋结构，这一过程又称为退火。复性后的DNA可基本恢复一系列的理化性质，生物学活性也可得到部分恢复。微生物的遗传和变异优秀RNA：核糖核酸，与：核糖核酸，与DNA相似，只是以相似，只是以核糖代替脱氧核糖，以尿嘧啶代替胸腺核糖代替脱氧核糖，以尿嘧啶代替胸腺嘧啶。嘧啶。RNA有有tRNA、rRNA、mRNA及及反义反义RNA，由，由DNA转录而成。转录而成。微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀第二节 微生物的变异基因突变的定义突变率突变的类型微生物的遗传和变异优秀变异的实质变异的实质基因突变基因突变基基
9、因因突突变变：变变异异的的一一种种，指指生生物物体体内内遗遗传传物物质质的的分分子子结结构构突突然然发发生生的的可可遗遗传传的的变变化化（106109）微生物的遗传和变异优秀突变率：每一细胞在每一世代中发生某一性突变率：每一细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率或每一单位群体在每一世代中产状突变的几率或每一单位群体在每一世代中产生突变株的数目来表示。生突变株的数目来表示。 测定方法：回复突变测定方法：回复突变 抗药性突变抗药性突变微生物的遗传和变异优秀菌名菌名 突变性状突变性状 突变率突变率E. coliE. coli 抗抗T1T1噬菌体噬菌体 3 103 1088E. coliE. coli
10、 抗抗T3T3噬菌体噬菌体 1 101 10E. coliE. coli 不发酵乳糖不发酵乳糖 1 101 101010E. coliE. coli 抗紫外线抗紫外线 1 101 1055Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus抗青霉素抗青霉素 1 101 1077S. S. aureusaureus 抗抗链霉素链霉素 1 101 1099 Salmonella Salmonella typhityphi 抗抗2525 g/Lg/L链霉素链霉素 11011066 Bacillus Bacillus megateriummegaterium 抗异烟肼抗
11、异烟肼 5 105 1055 微生物的遗传和变异优秀突变的类型突变的类型自发突变自发突变定义：指某微生物在自然条件下，没有人工定义：指某微生物在自然条件下，没有人工参与而发生的基因突变参与而发生的基因突变微生物的遗传和变异优秀自发突变机制：自发突变机制： 背景辐射和环境因素的诱变，即低剂量诱变背景辐射和环境因素的诱变，即低剂量诱变因因 素反复作用素反复作用 微生物自身有害产物的诱变效应微生物自身有害产物的诱变效应 过氧化氢过氧化氢（内源性诱变剂）（内源性诱变剂） 互变异构效应（酮式、烯醇式的互变）互变异构效应（酮式、烯醇式的互变） 环出效应（环状突出环出效应（环状突出复制复制遗传缺失）遗传缺失
12、）微生物的遗传和变异优秀A-T G(-OH)-T G-C A:G微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀诱发突变诱发突变定义：利用物理的或化学的因素处理微生物定义：利用物理的或化学的因素处理微生物群体，促使少数几个细胞的群体，促使少数几个细胞的DNA分子结构发分子结构发生变化，引起微生物的遗传性状发生突变。生变化，引起微生物的遗传性状发生突变。诱变剂：凡能提高突变率的因素都称为诱发诱变剂：凡能提高突变率的因素都称为诱发因素或诱变剂因素或诱变剂微生物的遗传和变异优秀物理诱变物理诱变紫外线对紫外线对DNA的损伤及其修复的损伤及其修复紫紫外外线线的的主主要要作作用用是是使使用用链链DNA的的相相
13、邻邻嘧嘧啶啶间间形形成成共共价价结结合合的的胸胸腺腺嘧嘧啶啶二二聚聚体体(双双链链扭扭曲变形，不能正常配对曲变形，不能正常配对) 微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀胸腺嘧啶二聚体胸腺嘧啶二聚体微生物的遗传和变异优秀修复机制：修复机制：光复活（光复活（reactixlation）紫外线照射后的微紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光下，可明显降低死亡率生物立即暴露于可见光下，可明显降低死亡率的现象。光复活酶（的现象。光复活酶（photo reacivating enzyme PRE）（）（光裂合酶）与二聚体结合，光裂合酶）与二聚体结合，在可见光下获得能量，使二聚体解聚，受损伤在可见光下获
14、得能量，使二聚体解聚，受损伤的的DNA得到修复。得到修复。微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀暗修复作用（暗修复作用（dark repair）（切除修复）（切除修复）不但可以修复紫外线损伤的不但可以修复紫外线损伤的DNA，还可以修复，还可以修复一些受到诱变剂（如烷化剂、一些受到诱变剂（如烷化剂、x射线、射线、射线）射线）损伤的损伤的DNA内切核酸酶在内切核酸酶在5-侧切出一个侧切出一个3-OH和和5-P的单的单链缺口，外切核酸酶从链缺口，外切核酸酶从5-P向向3-OH切除二聚体，切除二聚体，DNA聚合酶以聚合酶以DNA的另一条互补链为模板，从的另一条互补链为模板，从原有链上暴露的原有链
15、上暴露的3-OH端起逐个延长，重新合成端起逐个延长，重新合成一段缺失的一段缺失的DNA链，连接酶把寡核苷酸的链，连接酶把寡核苷酸的3-OH末端与原链的末端与原链的5-P末端连接末端连接微生物的遗传和变异优秀暗修复微生物的遗传和变异优秀化学诱变化学诱变直接作用：亚硝酸等氧化剂及硫酸二乙脂、直接作用：亚硝酸等氧化剂及硫酸二乙脂、甲基硫酸乙脂等烷化剂，可与一个或多个核甲基硫酸乙脂等烷化剂，可与一个或多个核苷酸碱基起化学作用，引起变异。苷酸碱基起化学作用，引起变异。AHG CUT GX微生物的遗传和变异优秀亚硝酸引起的亚硝酸引起的AT-GC转换细节转换细节微生物的遗传和变异优秀亚硝酸引起亚硝酸引起DN
16、A碱基对的改变碱基对的改变 图中图中A被其脱去氨基后可变成次黄嘌呤被其脱去氨基后可变成次黄嘌呤（H），），H不能不能再与再与T配对，而变为与配对，而变为与C配对，经配对，经DNA复制后，可形成复制后，可形成T-AC-G的转换的转换微生物的遗传和变异优秀烷化剂引起的DNA碱基对的改变 微生物的遗传和变异优秀间接作用：引起置换的诱变剂间接作用：引起置换的诱变剂5溴尿嘧啶溴尿嘧啶（5BU）、）、5氨基尿嘧啶（氨基尿嘧啶（5-AU）、）、8N鸟嘌呤（鸟嘌呤（8-NG）等为碱基结构类似物，）等为碱基结构类似物，掺入到掺入到DNA分子中，使分子中，使DNA无意义，因此可无意义，因此可引起变异。引起变异。微
17、生物的遗传和变异优秀5-溴尿嘧啶微生物的遗传和变异优秀5-BU引起的转换引起的转换微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀移码突变（移码突变（frameshift mutation）诱变剂使诱变剂使DNA分子中的分子中的1个或少数几个核苷酸的个或少数几个核苷酸的增添（插入）或缺失从而使该部位后面的全部遗增添（插入）或缺失从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。丫啶黄传密码发生转录和转译错误的一类突变。丫啶黄 原黄素、丫啶橙和原黄素、丫啶橙和氨基丫啶等染料氨基丫啶等染料 ABC ABC ABC ABC ABC ABC ABC AB+ CAB CAB C ABC BCA B
18、CA BCA BC ABC AB+ CAB +CA B+C ABC ABC ACA BCA BAB CAC ABC ABC微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀诱变剂的复合处理及其协同效应的方法：诱变剂的复合处理及其协同效应的方法： 两种或多种诱变剂先后使用；两种或多种诱变剂先后使用； 同一种诱变剂重复使用；同一种诱变剂重复使用； 两种或多种诱变剂同时使用两种或多种诱变剂同时使用微生物的遗传和变异优秀定向培育和驯化定向培育和驯化定向培育是人为用一特定环境条件长期处理定向培育是人为用一特定环境条件长期处理某一微生物群体，同时不断将它们进行移种某一微生物群体，同时不断将它们进行移种传代，以达
19、到累积和选择合适的自发突变体传代，以达到累积和选择合适的自发突变体的一种古老的育种方法。的一种古老的育种方法。驯化：驯化：微生物的遗传和变异优秀第三节第三节 基因重组基因重组基因重组基因重组杂交杂交转化转化转导转导微生物的遗传和变异优秀基基因因重重组组（gene recombination）：两两个个不不同同性性状状个个体体内内的的遗遗传传基基因因转转移移到到一一起起，经经过过遗遗传传分分子子间间的的重重新新组组合合，形形成成新新型型个个体的方式。体的方式。主主要要通通过过杂杂交交、转转化化、转转导导、接接合合及及细细胞胞质质体融合等方式实现。体融合等方式实现。微生物的遗传和变异优秀杂交杂交通
20、过两个亲本细胞的融合，使整套染色体的通过两个亲本细胞的融合，使整套染色体的基因重组，或者是通过双亲细胞的沟通，使基因重组，或者是通过双亲细胞的沟通，使部分染色体基因重组。部分染色体基因重组。 包括原生质体融合、有性杂交及准性杂交包括原生质体融合、有性杂交及准性杂交微生物的遗传和变异优秀原生质体融合是将两种不同的细菌经溶菌酶或原生质体融合是将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进行彼此融合的过程。行彼此融合的过程。 聚乙二醇可促使二种原生质体的融合。聚乙二醇可促使二种原生质体的融合。原生质体融合是一种人工基因转移系统，本质原生质体
21、融合是一种人工基因转移系统，本质上与基因转移无关或关系很小。上与基因转移无关或关系很小。微生物的遗传和变异优秀原生质体融合的主要步骤：原生质体融合的主要步骤：选择亲株选择亲株 制备原生质体制备原生质体原生质体原生质体融合融合 原生质体原生质体 再生再生 筛选优良筛选优良性状的融合重组子性状的融合重组子微生物的遗传和变异优秀原生质体融合微生物的遗传和变异优秀真菌的准性生殖真菌的准性生殖(Parasexuality)：是指异核体：是指异核体真菌菌丝细胞中两个遗传物质不同的细胞核可以真菌菌丝细胞中两个遗传物质不同的细胞核可以结合成杂合二倍体的细胞核，这种二倍体细胞核结合成杂合二倍体的细胞核，这种二倍
22、体细胞核在有丝分裂过程中可以发生染色体交换和单倍体在有丝分裂过程中可以发生染色体交换和单倍体化，最后形成遗传物质重组的单倍体的过程。准化，最后形成遗传物质重组的单倍体的过程。准性生殖和有性生殖的主要区别在于，有性生殖是性生殖和有性生殖的主要区别在于，有性生殖是通过减数分裂进行遗传物质重组和产生单倍体。通过减数分裂进行遗传物质重组和产生单倍体。 微生物的遗传和变异优秀转化转化转转化化：受受体体菌菌接接受受供供体体菌菌的的DNA片片段段而而获获得得部部分分新新的的遗遗传传性性状状的的现现象象。脱脱氧氧核核糖糖核核酸酸酶酶可可以以抑制转化作用。抑制转化作用。 感感受受态态：在在一一个个生生长长过过程
23、程中中的的细细菌菌培培养养物物中中只只有有某某一一阶阶段段中中的的细细菌菌才才能能作作为为可可转转化化的的受受体体。能接受转化的这一生理状态称为感受态。能接受转化的这一生理状态称为感受态。 微生物的遗传和变异优秀降解降解吸附吸附切割成切割成45106单链入胞单链入胞同源部同源部分配对、分配对、整合整合复制分裂，只复制分裂，只有一个子代有一个子代DNA分子获得分子获得供体基因供体基因非转化子非转化子转化子转化子微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀感受态出现在指数后期感受态出现在指数后期诱发感受态的方法：诱发感受态的方法：a、先培养在营养丰富的培养基中，再培养在、先培养在营养丰富的培养基中
24、，再培养在营养贫瘠的培养基中，会出现感受态。营养贫瘠的培养基中，会出现感受态。b、用氯化钙也可诱发感受态的发生。、用氯化钙也可诱发感受态的发生。微生物的遗传和变异优秀转染：噬菌体和其他病毒的转染：噬菌体和其他病毒的DNA（或（或RNA）抽提出来让它去感染感受态的宿主细胞，并抽提出来让它去感染感受态的宿主细胞，并进而产生正常的噬菌体或病毒后代进而产生正常的噬菌体或病毒后代.微生物的遗传和变异优秀转导转导转转导导：通通过过完完全全缺缺陷陷或或部部分分缺缺陷陷噬噬菌菌体体的的媒媒介介，把把供供体体细细胞胞的的DNA片片段段携携带带到到受受体体细细胞胞中中，通通过过交交换换和和整整合合，从从而而使使后
25、后者者获获得得前前者者部部分分遗遗传传性性状状的现象。（重组的细胞称为转导子）的现象。（重组的细胞称为转导子）微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀普遍转导（普遍转导（generalized transduction）利用完全缺陷噬菌体来完成利用完全缺陷噬菌体来完成完全普遍转导：外源完全普遍转导：外源DNA在受体细胞中与核染在受体细胞中与核染色体整合，随其一起复制、表达。色体整合，随其一起复制、表达。流产普遍转导：外源流产普遍转导：外源DNA在受体菌中既不进行在受体菌中既不进行交换、整合和复制，也不迅速消失而仅进行转交换、整合和复制，也不迅速消失而仅进行转录、转译和性状表达。录、转译和性
26、状表达。 局限转导（局限转导（restricted transduction）部分缺陷噬菌体，转导子不稳定。部分缺陷噬菌体，转导子不稳定。微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀普遍性转普遍性转导导微生物的遗传和变异优秀流产普遍转导流产普遍转导微生物的遗传和变异优秀溶源转变（溶源转变（lysogenic coversion） 不同于转导，只是由于溶源而被赋予新的性不同于转导，只是由于溶源而被赋予新的性状（不携带外源基因）噬菌体是完整的；是状（不携带外源基因）噬菌体是完整的；是溶源化的宿主而非转导子，随噬菌体消失则溶源化的宿主而非转导子，随噬菌体消失则新性状亦消失。新性状亦消失。微生物的遗传
27、和变异优秀微生物的遗传和变异优秀第四节第四节 遗传工程技术在环境保护中的应用遗传工程技术在环境保护中的应用遗传工程技术在环境保护中的作用遗传工程技术在环境保护中的作用基因工程在环境保护中的应用基因工程在环境保护中的应用PCR技术在环境保护中的应用技术在环境保护中的应用微生物的遗传和变异优秀遗传工程技术在环境保护中的作用遗传工程技术在环境保护中的作用 质粒育种：接合质粒育种：接合通过质粒的媒介，使受体通过质粒的媒介，使受体细胞获得供体细胞的某些性状的过程细胞获得供体细胞的某些性状的过程 供供体体菌菌（F）通通过过其其性性菌菌毛毛与与受受体体菌菌（F）相相结结合合，前前者者传传递递不不同同长长度度
28、的的ssDNA给给后后者者，并并在在后后者者细细胞胞中中进进行行双双链链化化或或进进一一步步与与核核染染色色体体发发生生交交换换整整合合，从从而而使使后后者者获获得得供供体体菌菌的遗传性状的现象。的遗传性状的现象。微生物的遗传和变异优秀DonorRecipient微生物的遗传和变异优秀F+F-F+F-F+F+F+F+微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀质粒育种的应用质粒育种的应用多功能超级细菌的构建：将降解芳烃、多功能超级细菌的构建：将降解芳烃、多环芳烃等的质粒转移到能降解脂烃的多环芳烃等的质粒转移到能降解脂烃的假单胞菌体内，变可得到能降解三
29、种烃假单胞菌体内，变可得到能降解三种烃类的超级菌。类的超级菌。降解抗汞质粒菌的构建降解抗汞质粒菌的构建:将降解辛烷、乙将降解辛烷、乙烷、癸烷功能的烷、癸烷功能的OCT质粒和抗汞质粒质粒和抗汞质粒MER同时转移到对同时转移到对20mg/L汞敏感的恶汞敏感的恶臭假单胞菌体内，使其转变为抗臭假单胞菌体内，使其转变为抗5070mg/L汞，同时具有分解辛烷等烷烃。汞，同时具有分解辛烷等烷烃。微生物的遗传和变异优秀基因工程在环境保护中的应用基因工程在环境保护中的应用基因工程：用人工方法将所需要的某一供体微基因工程：用人工方法将所需要的某一供体微生物的生物的DNA提取出来，在离体条件下用限制性提取出来，在离
30、体条件下用限制性内切酶将离体内切酶将离体DNA切割成带有目的基因的切割成带有目的基因的DNA片断（每一片断平均长度为几千个核苷酸）把片断（每一片断平均长度为几千个核苷酸）把它与载体它与载体DNA分子连接起来，然后与载体一起分子连接起来，然后与载体一起导入某一更容易生长繁殖的受体细胞中，从而导入某一更容易生长繁殖的受体细胞中，从而获得新的物种。获得新的物种。微生物的遗传和变异优秀操作方法：先从供体细胞中选择性地获取带操作方法：先从供体细胞中选择性地获取带有目的基因的有目的基因的DNA片断；将目的片断；将目的DNA片断和片断和载体在体外进行重组；将重组体导入受体细载体在体外进行重组；将重组体导入受
31、体细胞；重组体克隆的筛选和鉴定。胞；重组体克隆的筛选和鉴定。微生物的遗传和变异优秀基因工程菌的构建基因工程菌的构建 载 体 目的基因酶切PCR扩增，酶切载体片段 目的基因片段+连接重组质粒转化重组子阳性鉴定微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀体外重组体外重组1 1、粘末端连接、粘末端连接1 1）全同源粘末端连接）全同源粘末端连接 最方便简单最方便简单 高背景高背景- -载体自身环化载体自身环化 双向插入双向插入微生物的遗传和变异优秀PCR技术在环境保护中的应用技术在环境保护中的应用PCR：DNA多聚酶链式反应，多聚酶链式反应，DNA体外扩体外扩增的技术。增的技术。PCR检测速度快，只需
32、检测速度快，只需56h就可出结果。就可出结果。微生物的遗传和变异优秀PCR技术的操作步骤：技术的操作步骤：加热变性：将待扩增的加热变性：将待扩增的DNA置于置于9495的高的高温水浴中加热温水浴中加热5min，使双链，使双链DNA解链为单链解链为单链DNA，作为模板，作为模板退火：将变性的单链退火：将变性的单链DNA溶液的温度缓慢降至溶液的温度缓慢降至55，此间将引物，此间将引物DNA的碱基与单链模板的碱基与单链模板DNA一端碱基互补配对一端碱基互补配对延伸：温度降至延伸：温度降至72时，在耐热性时，在耐热性TaqDNA多聚多聚酶作用下寡核苷酸引物碱基和模板酶作用下寡核苷酸引物碱基和模板DNA结合延结合延伸成双链伸成双链DNA。经过。经过3035次循环，扩增倍数次循环，扩增倍数达达106。微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀微生物的遗传和变异优秀
