《31.2体外受精和早期胚胎培养》由会员分享，可在线阅读，更多相关《31.2体外受精和早期胚胎培养（27页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、 知知 识识 回回 顾顾精子的发生精子的发生卵子的发生卵子的发生受受精精过过程程准备阶段准备阶段受精阶段受精阶段卵子成熟卵子成熟精子获能精子获能穿越透明带穿越透明带穿越放射冠穿越放射冠进入卵黄膜进入卵黄膜雌雄原核形成雌雄原核形成合子形成合子形成早早期期胚胚胎胎发发育育减数分裂减数分裂受精卵受精卵2 2细胞细胞4 4细胞细胞8 8细胞细胞桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚原肠胚原肠胚罗伯特爱德华兹获2010诺贝尔生理医学奖罗伯特罗伯特爱德华兹爱德华兹首个试管婴儿路易斯首个试管婴儿路易斯. .布朗布朗路易斯路易斯.布朗布朗2525岁生岁生日聚会日聚会“代孕”专题专题3 3 胚胎工程3.23.2 体外受精和早期胚
2、胎培养体外受精和早期胚胎培养 试管动物技试管动物技术术通通过人工操作使人工操作使卵子和精子卵子和精子在在体外体外条件下条件下成熟和受精成熟和受精，并通，并通过培养培养发育育为早期胚胎早期胚胎后，再移植后，再移植产生后代。生后代。概念概念生殖方式生殖方式有性生殖有性生殖体外受精体外受精 + + 胚胎培养胚胎培养技术基础技术基础 体外受精体外受精其中包含哪几个关其中包含哪几个关键步步骤？1、卵母、卵母细胞的采集和培养胞的采集和培养2、精子的采集和、精子的采集和获能能3、体外受精、体外受精 胚胎培养胚胎培养4、胚胎的早期培养、胚胎的早期培养1、卵母、卵母细胞的采集胞的采集（1）几种采集方法）几种采集
3、方法（3）采集部位）采集部位（4）具体操作）具体操作过程程（5）得到的卵子可否可以直接受精）得到的卵子可否可以直接受精（2）适用）适用动物物2、体外、体外获能能（3）使用的培养液）使用的培养液（1）几种）几种获能方法能方法（2）适用）适用动物物2、卵母、卵母细胞的培养胞的培养（1）培养到哪个）培养到哪个时期期1、精子的采集、精子的采集（1）几种采集方法）几种采集方法（2）具体操作）具体操作过程程 体外受精体外受精（1）受精的）受精的环境境（2）受精的要求）受精的要求胚胎的早期培养胚胎的早期培养（1）培养的目的）培养的目的（2）培养液的成分）培养液的成分（3）培养后的早期胚胎的）培养后的早期胚胎
4、的处理方式理方式（4）不同）不同动物物进行移植的行移植的时间是否相同是否相同（3）精液）精液为什么要什么要进行离心行离心处理理一一 组组二二 组组三三 组组四四 组组采集采集方法方法采集采集部位部位适宜适宜动物物操作操作卵子可否卵子可否直接受精直接受精 卵母细胞的采集卵母细胞的采集超数超数排卵法排卵法卵巢卵巢取卵取卵法法输输卵卵管管卵卵巢巢小小鼠鼠、兔兔、猪猪、羊羊大家畜大家畜或大型或大型动物，动物，如牛如牛用用促性腺激素促性腺激素处理，处理，使其排出更多的卵子，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取然后从输卵管中冲取卵子卵子已已屠宰屠宰母畜的母畜的卵巢卵巢中采集卵母细胞中采集卵母细胞借助工具
5、借助工具，直接从，直接从活体动物活体动物的的卵巢卵巢中吸中吸取卵母细胞取卵母细胞采集的卵子采集的卵子可可直接直接参与参与体外受精体外受精采集的卵母细采集的卵母细胞，要胞，要体外人体外人工培养成熟后工培养成熟后，才能参与才能参与受精受精 精精 子子 的的 采采 集集采集方法采集方法 适宜动物适宜动物操作操作手握法手握法电刺刺激法激法体型小，易体型小，易控制的家畜，控制的家畜，如，猪、犬如，猪、犬野生野生动物或物或经济动物物麻醉麻醉动物，用物，用特制特制电极极伸入伸入动物直物直肠，直接刺激射精中枢神直接刺激射精中枢神经(腰骶部腰骶部)无需无需设备，徒手或戴上橡胶手套，徒手或戴上橡胶手套，直接把握直
6、接把握雄性雄性动物的阴茎，物的阴茎，给予适予适当的当的压力和刺激力和刺激采用采用仿生学仿生学方法，方法，模仿模仿发情雌性情雌性动物阴道物阴道环境境，满足雄性足雄性动物交配物交配时对压力、温度和力、温度和润滑度的要求，同滑度的要求，同时配有配有活台畜活台畜或或假台畜假台畜体型体型较大大的家畜的家畜假阴假阴道法道法获能方法获能方法适宜动物适宜动物培养液培养液啮齿类动物、物、家兔和猪等家兔和猪等人工配制的人工配制的获能液能液牛、羊等家畜牛、羊等家畜一定一定浓度的度的肝素肝素或或钙离子离子载体体中中 精精 子子 的的 获获 能能培养法培养法化学化学诱导法法获能溶液或能溶液或专用的受精溶液用的受精溶液精
7、子和卵子一般要放在精子和卵子一般要放在培养液小滴内培养液小滴内共同培养共同培养一段一段时间才能完成受精才能完成受精 受受 精精环境环境要求要求 受受 精精卵巢卵巢卵母卵母细胞胞新新鲜或或解解冻精液精液卵母卵母细胞培养胞培养精液离精液离心心处理理精子精子获能能处理理MM期期期期卵母卵母卵母卵母细细胞胞胞胞 受精卵培养受精卵培养获获能精子能精子能精子能精子体外受精体外受精分离精子和精液分离精子和精液培养法培养法化学化学诱导法法 获能液能液/专用受精溶液用受精溶液 体体 外外 受受 精精哺乳哺乳动物的卵子和精子在体外人工控制的物的卵子和精子在体外人工控制的环境境中完成受精中完成受精过程的技程的技术概
8、念概念基本原理基本原理人工模人工模拟体内体内环境境，（，（营养物养物质、PH、温度等）、温度等）使卵母使卵母细胞成熟、精子胞成熟、精子获能，最能，最终完成受精完成受精受精卵移入受精卵移入发育培养液育培养液中中继续培养，以培养，以检查受精状况受精状况和和受精卵的受精卵的发育能力育能力 受受精精 植入子植入子宫宫 ？受精卵受精卵应移入移入发育培养液育培养液中中继续培养，以培养，以检查受精状况受精状况和和受精卵的受精卵的发育能力育能力 胚胎的早期培胚胎的早期培养养原因和目的原因和目的培养液成分培养液成分无机无机盐与与有机有机盐维生素、激素、氨基酸、核苷酸等生素、激素、氨基酸、核苷酸等血清血清胚胎后期
9、操作胚胎后期操作向受体移植向受体移植 / 冷冷冻保存保存培养条件培养条件1、无菌、无菌2、适宜的温度和、适宜的温度和PH值3、营养物养物质和激素和激素动物动物胚胎移植时间胚胎移植时间 胚胎的早期培胚胎的早期培养养胚胎移植的时间不同胚胎移植的时间不同牛、羊等牛、羊等小鼠、家兔等小鼠、家兔等实验动物物人人桑椹胚或囊胚桑椹胚或囊胚阶段段桑椹胚或囊胚前桑椹胚或囊胚前阶段段816个个细胞胞阶段段澳大利亚海福特牛澳大利亚海福特牛荷兰黑白花奶牛荷兰黑白花奶牛3 3万万5 5万万1 1、价格昂贵，资金的限制、价格昂贵，资金的限制2 2、牛生育力低，一生只能生育、牛生育力低，一生只能生育4-54-5头头体外受精
10、和早期胚胎培养技术的应体外受精和早期胚胎培养技术的应用用快速繁殖快速繁殖优良品种良品种 试管牛工厂化生产试管牛工厂化生产采集良种母牛的卵母细胞采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子采集良种公牛精子精子体外获能精子体外获能体外受精体外受精良种牛体外受精胚胎良种牛体外受精胚胎胚胎移植胚胎移植受体牛受体牛良种犊牛良种犊牛成熟期牛成熟期牛屠宰加工厂屠宰加工厂市场市场采集卵巢中的卵母细胞采集卵巢中的卵母细胞“试试管管牛牛”工工厂厂化化生生产产的的技技术术流流程程图图 试管动物技试管动物技术术通通过人工操作使人工操作使卵子和精子卵子和精子在在体外体外条件下条件下成熟和受
11、精成熟和受精，并通，并通过培养培养发育育为早期胚胎早期胚胎后，再移植后，再移植产生后代。生后代。概念概念生殖方式生殖方式有性生殖有性生殖+ 胚胎培养胚胎培养 技术基础技术基础体外受精体外受精工业化生产意义工业化生产意义实现优良家畜的快速繁殖良家畜的快速繁殖总结总结： 试管动物 与 克隆动物相比生殖方式：技术手段：遗传规律：有性生殖 无性生殖核移植技术、胚胎移植遵循遵循 无无体外受精体外受精胚胎移植胚胎移植 及及 时时 巩巩 固固1、下列关于体外受精和早期胚胎培养的、下列关于体外受精和早期胚胎培养的说法法错误的是（的是（ ）A、在体外受精前，要在体外受精前，要对精子精子进行行获能能处理理B、精子
12、和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养精子和卵子一般要放在培养液小滴内共同培养一段一段时间才能完成受精作用才能完成受精作用C、受精卵在受精溶液中受精卵在受精溶液中进行早期行早期发育育D、胚胎胚胎发育到适当育到适当阶段可段可进行冷行冷冻保存保存C受精溶液受精溶液区分：区分：获能溶液能溶液受精溶液受精溶液发育培养液育培养液2、根据下、根据下图回答回答卵卵细胞胞母体母体精子精子所作的所作的处理理为 ，是是 ，是是 ，是是 。精子精子获能能受精受精过程程胚胎的早期培养胚胎的早期培养胚胎移植胚胎移植 及及 时时 巩巩 固固 活体卵巢采卵法示意活体卵巢采卵法示意图1、超数排卵法用、超数排卵法用 处理，理，而非直接注射而非直接注射性激素。性激素。2、采集部位的不同：超数排卵法、采集部位的不同：超数排卵法为输卵管卵管，卵巢，卵巢取卵法是在取卵法是在卵巢卵巢。3、卵子状、卵子状态不同：超数排卵法采到的卵子已达到不同：超数排卵法采到的卵子已达到成熟成熟阶段，可段，可直接参与受精直接参与受精，卵巢取卵法采到的，卵巢取卵法采到的卵母卵母细胞需胞需进一步一步培养培养。4、超数排卵法取要尽量取、超数排卵法取要尽量取新新鲜的卵巢，卵巢取卵的卵巢，卵巢取卵法操作法操作过程尽量程尽量不不损伤动物物组织 要要 点点 透透 析析促性腺激素促性腺激素
