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1、安全柜安全柜04818为什么使用生物安全柜1. 生物安全柜主要用于各种微生物, 特别是有害微生物的操作和基因 工程操作。 2. 根本目的是保护工作人员健康和柜 外环境安全。3. 根据保护对象和程度的不同,生物 安全柜分为I、II和III级生物安全柜的选择生物安全柜的选择生物安全柜 可以用于操作I 4级生物安全水平的生物因子值得注意的是值得注意的是 根据相应的工作选择生物安全柜在在4 4级生物安全室级生物安全室 须配备正压防护服时才能使用级和级生物安全柜生物安全柜的分级生物安全柜的分级1.I级生物安全柜2. 保护工作人员和环境2.II级生物安全柜3. 保护工作人员、环境和试样(产品)3.III级
2、生物安全柜4. 采用手套箱更严格地保护工作人员、环境5. 和试样(产品)Class I 生物安全柜可开启前窗在负压下操作表面风速在75-100 fpm排出的气体经HEPA 过滤保护操作人员和环境适用于要求生物安全等级 1、2、3的工作 适用于样品不需保护的 实验工作Class II 生物安全柜可开启前窗从前开口向内的气流用于保护人员经HEPA过滤后向下送的层流,以保护样品排出的气体采用HEPA过滤器过滤则用于保护环境表面风速在75-100 fpm 适用于要求生物安全等级为(适用于要求生物安全等级为(- -)的的 工作工作Class II 生物安全柜的分类B1Type BB2 Class IIT
3、ype AA1A2A类和B类的区别Class IIType AType B 废气废气经烟罩排入实验室或室外经烟罩排入实验室或室外必须必须经排风系统将废气经排风系统将废气排至室外,带报警装置排至室外,带报警装置 Class II 生物安全柜的分类1.1.IIII级级A1A1型型生物安全柜生物安全柜2. 70%柜内循环,30%空气排出,工作窗口流速75fpm2.2.IIII级级A2A2型型生物安全柜生物安全柜3. 70%柜内循环,30%空气排至室外,工作窗口流速100fpm3.II级B1型生物安全柜4. 30%柜内循环,70%空气排出,工作窗口流速100fpm4.4.IIII级级B2B2型型生物安
4、全柜生物安全柜 5. 100%空气排出,工作窗口流速100fpm II级生物安全柜1.美国对II级生物安全柜有新的分类方法2.欧洲产品无B2型II级生物安全柜安全柜的选择选选A A类还是类还是B B类生物安全柜的关键:类生物安全柜的关键:不是生物因素,而是操作人员是否会用到不是生物因素,而是操作人员是否会用到挥发性的有害物质或放射性挥发性的有害物质或放射性物质物质Type BType A级级A1A1型生物安全柜型生物安全柜从操作口向内气流的最小平均速度应保持75 ft/min(0.38 m/s);经HEPA过滤器过滤的下送气流,是来自于同一个压力排风系统的下送气流和操作口向内气流的混合气体的一
5、部分;经HEPA过滤器过滤后的空气可以排回实验室或通过排风罩排入环境.Class II 生物安全柜Type A1 Type A1 Type A1 Type A1 不带不带不带不带排风排风排风排风管路管路管路管路最小最小最小最小流速流速流速流速 75 75 75 75 fpmfpmfpmfpm满足满足满足满足生物安全等级生物安全等级生物安全等级生物安全等级1 1 1 1、2 2 2 2、3 3 3 3的要求的要求的要求的要求不不不不涉及放射性涉及放射性涉及放射性涉及放射性物质物质物质物质不不不不涉及挥发性有涉及挥发性有涉及挥发性有涉及挥发性有害化学品害化学品害化学品害化学品建议不应有建议不应有建
6、议不应有建议不应有明火明火明火明火 A1A1型生物安全柜不适于操作挥发性有毒化学物质型生物安全柜不适于操作挥发性有毒化学物质 和挥发性放射性核素和挥发性放射性核素 Class II 生物安全柜Type A1 Type A1 Type A1 Type A1 带带带带排风管排风管排风管排风管路路路路最小最小表面风速表面风速 75 fpm 75 fpm建议不应有明建议不应有明建议不应有明建议不应有明火火火火不不不不涉及放射涉及放射涉及放射涉及放射性物质性物质性物质性物质不不不不涉及挥发性涉及挥发性涉及挥发性涉及挥发性有害化学品有害化学品有害化学品有害化学品满足满足满足满足生物安全等生物安全等生物安全
7、等生物安全等级级级级1 1 1 1、2 2 2 2、3 3 3 3的要的要的要的要求求求求级级A2A2型生物安全柜型生物安全柜 (称为(称为B3B3型)型)从操作口向内气流的最小平均速度应保持100 ft/min(0.5 m/s);经HEPA过滤器过滤的下送气流,是来自于同一个压力排风系统的下送气流和操作口向内气流的混合气体的一部分;经HEPA过滤器过滤后的空气可以排回实验室或通过排风罩排入环境.Class II 生物安全柜Type A2 Type A2 Type A2 Type A2 不带不带不带不带排风管排风管排风管排风管路路路路最小最小表面风速表面风速100 fpm100 fpm满足满足
8、满足满足生物安全生物安全生物安全生物安全等级等级等级等级1 1、2 2、3 3 3 3的要求的要求的要求的要求不不不不涉及放射性物质涉及放射性物质涉及放射性物质涉及放射性物质不不不不涉及挥发性涉及挥发性涉及挥发性涉及挥发性有害化学品有害化学品有害化学品有害化学品建议不应有明建议不应有明建议不应有明建议不应有明火火火火Class II 生物安全柜Type A2 Type A2 Type A2 Type A2 带带带带排风管路排风管路排风管路排风管路最小最小表面风速表面风速100 fpm100 fpm满足满足满足满足生物安全等级生物安全等级生物安全等级生物安全等级1 1 1 1、2 2 2 2、3
9、 3 3 3的要求的要求的要求的要求适用于含痕量放射适用于含痕量放射适用于含痕量放射适用于含痕量放射性物质的工作性物质的工作性物质的工作性物质的工作* * * *适用适用适用适用于含少量挥于含少量挥于含少量挥于含少量挥发性有害化学品发性有害化学品发性有害化学品发性有害化学品的工作的工作的工作的工作* * * *建议不应有明建议不应有明建议不应有明建议不应有明火火火火级级B1B1型生物安全柜型生物安全柜从操作口向内气流的最小平均速度应保持100 ft/min(0.5 m/s);经HEPA过滤器过滤的下送气流大部分是未被污染的循环吸入气流;污染的下送气流经HEPA过滤器过滤后,大多数经过专门的排风
10、管排入大气.Class II 生物安全柜满足满足满足满足生物安全等级生物安全等级生物安全等级生物安全等级1 1 1 1、2 2 2 2、3 3 3 3的要求的要求的要求的要求工作工作工作工作区域的后部可使用区域的后部可使用区域的后部可使用区域的后部可使用少量的放射性物质少量的放射性物质少量的放射性物质少量的放射性物质工作工作工作工作区域的后部可使用区域的后部可使用区域的后部可使用区域的后部可使用少量的挥发性有害化学少量的挥发性有害化学少量的挥发性有害化学少量的挥发性有害化学品品品品Type B1Type B1最小最小表面风速表面风速100 fpm建议不应有明火建议不应有明火建议不应有明火建议不
11、应有明火适用于:适用于:含有微量挥发性有毒化学物质或痕量放射性核素的微生物学研究含有微量挥发性有毒化学物质或痕量放射性核素的微生物学研究级级B2B2型生物安全柜型生物安全柜(称为(称为“全排型全排型”) 从操作口向内气流的最小平均速度应保持100 ft/min(0.5 m/s);经HEPA过滤器过滤的下送气流来自于实验室或室外的空气(亦即安全柜中排出的气体不再循环用作下送气流);操作口向内气流和下送气流经HEPA过滤器过滤后全部排入大气,不再循环送入安全柜或送回实验室;所有污染的风道和压力排风系统均保持负压,或由直接排出的(不再循环经过工作区)负压风道和压力排风系统包围。Class II生物安
12、全柜满足满足满足满足生物安全等级生物安全等级生物安全等级生物安全等级适用适用适用适用于放射性物质于放射性物质于放射性物质于放射性物质* *适用于适用于适用于适用于挥发性有害挥发性有害挥发性有害挥发性有害化学品化学品化学品化学品* * * * 建议不应有明火建议不应有明火建议不应有明火建议不应有明火Type B2Type B2全排风全排风全排风全排风 适于于:适于于: 进行含有挥发性有毒化学物质和放射性核素的微生物学进行含有挥发性有毒化学物质和放射性核素的微生物学研究工作研究工作 1. 箱体完全封闭,将微生物与人完全隔离。 通过手套箱操作。2. 保护工作人员、产品和环境。3. 一般无定型产品,需
13、特殊定货。4. 可将若干III级生物安全柜连在一起使用 全部生物流程的操作均在柜内完成,以 确保安全。Class III 生物安全柜III级生物安全柜III级生物安全柜生物安全柜的操作理论生物安全柜的操作理论颗粒经颗粒经HEPAHEPA过滤去除过滤去除气流为层流气流为层流气流有方向气流有方向所有的生物安全柜均应符合下列要求所有的生物安全柜均应符合下列要求: :HEPAHEPA滤膜滤膜马达马达/ /风扇强制气体流动风扇强制气体流动马达转速的控制部分马达转速的控制部分气体的吸入、平衡控制及管路系统气体的吸入、平衡控制及管路系统生物安全柜的主要部件包括生物安全柜的主要部件包括: :操作理论操作理论
14、层流层流层流气流向下扫过工作区域,捕获气溶胶,经安全柜的内层至HEPA滤膜为实现真正的层流,各点的气流速率必须在平均流速的+/- 20%以内操作理论操作理论 有方向的气流有方向的气流空气从操作人员的前面和周围吸入,使工作区域的气溶胶更难逃逸。这个气流通常以向内吸入的体积或平均流速计算、表示。操作理论操作理论- -烟气分束烟气分束在工作区域的一个垂直平面内烟气被分束,向前方和后方的气孔移动.为最有效的防止烟气逃逸,物品应放在烟气分束以后的区域,操作也应在此进行.生物安全柜的使用1. 正确安装,确保安全柜与外部 排风系统压力平衡,保证安全 柜处于正常工作状态。2.定期维护和检测,确保安全性在生物安
15、全柜上工作在生物安全柜上工作在开始工作前彻底理解操作步骤和所需设备。尽量减少扰动,如减少房间内的走动。准备好消毒剂和处理遗撒事件的物品。定制计划在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作关掉紫外灯,前窗开至适当高度,打开安全柜的关掉紫外灯,前窗开至适当高度,打开安全柜的灯和风扇灯和风扇. .检查出风口是否有障碍物,等待检查出风口是否有障碍物,等待5 5minmin。用消毒液彻底洗净手和手臂;穿长袖工作服和手用消毒液彻底洗净手和手臂;穿长袖工作服和手套;带防护眼镜套;带防护眼镜. .开始在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作用用70%70%的乙醇溶液或适当的消毒剂擦拭工作区的乙醇溶液或适当的消毒剂擦拭工
16、作区域的内壁域的内壁清洁在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作只放入所需的物品。不要让生物安全柜超载。出只放入所需的物品。不要让生物安全柜超载。出风口不要有障碍物。大物体间要保持一定距离风口不要有障碍物。大物体间要保持一定距离把前窗降至适当高度。等把前窗降至适当高度。等2-32-3minmin以吹扫污染物以吹扫污染物上样在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作 所有物品离前窗至少所有物品离前窗至少2 2英寸,所有污染性的操作英寸,所有污染性的操作 尽量远离工作区域的后部尽量远离工作区域的后部 干净和被污染的物品分开放置;被污染的物品干净和被污染的物品分开放置;被污染的物品尽量不要进入干净区域,应放置
17、在工作区域的后部尽量不要进入干净区域,应放置在工作区域的后部 操作时物品和手臂不要穿过前窗操作时物品和手臂不要穿过前窗技巧在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作干净的物品干净的物品理想的工作台摆放被污染的区域被污染的区域 废弃物托盘废弃物托盘 垃圾袋垃圾袋在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作 避免使用明火(可用酒精灯),用适当的灭菌措施避免使用明火(可用酒精灯),用适当的灭菌措施 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段避免使用干扰安全柜内层流的实验手段 如使用中有遗洒,所有物品被拿走前必须经去污染处理如使用中有遗洒,所有物品被拿走前必须经去污染处理 须安全柜处于须安全柜处于操作状态时,操作状态时,操
18、作状态时,操作状态时,彻底消毒内壁彻底消毒内壁技巧-续篇在生物安全柜上操作在生物安全柜上操作工作结束后,安全柜继续开机工作结束后,安全柜继续开机2-32-3minmin吹扫工作区吹扫工作区的污染物的污染物最后的吹扫在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前必须经表面去污处理必须经表面去污处理. . 所有的托盘或容器从安全柜中取出前必须盖上所有的托盘或容器从安全柜中取出前必须盖上下样在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作 用消毒剂清洁所有内壁,待其干燥用消毒剂清洁所有内壁,待其干燥 定期抬起工作面清洁下面的区域;洗净抹布
19、定期抬起工作面清洁下面的区域;洗净抹布 扔掉橡胶手套;适当洗涤工作服,用杀菌液彻底清洁扔掉橡胶手套;适当洗涤工作服,用杀菌液彻底清洁 手和手臂手和手臂清洁在生物安全柜上工作在生物安全柜上工作 关闭灯、风机、关闭前窗,打开紫外灯关闭灯、风机、关闭前窗,打开紫外灯关机l l调整椅子的高度,让肩膀调整椅子的高度,让肩膀放松双肘自然放于两侧。放松双肘自然放于两侧。人体工程学方面的考虑人体工程学方面的考虑肘和肩膀常见说法和错误认识喷灯的火焰会严重影响在工作中的安全柜内的层流,可能会喷灯的火焰会严重影响在工作中的安全柜内的层流,可能会实质性增加工作区域气溶胶的扩散实质性增加工作区域气溶胶的扩散如果喷灯的火
20、苗很大,过量的热可能融化如果喷灯的火苗很大,过量的热可能融化HEPAHEPA滤膜的黏结剂或在滤膜的黏结剂或在滤膜上烧出洞。无人看守的喷灯可能熄灭。在滤膜上烧出洞。无人看守的喷灯可能熄灭。在A A类或类或A/B3A/B3类安全柜类安全柜内,泄露的气体可能达到爆炸极限内,泄露的气体可能达到爆炸极限“我必须在安全柜中使用喷灯.用替代方法,如电热套或可抛的加热环。不要烤容器瓶口。生物安全柜的工作区域应为无菌环境,如果正确使用的话常见说法和错误认识排风柜用来把有害有毒的烟和气溶胶抽走,应该用对多种化学排风柜用来把有害有毒的烟和气溶胶抽走,应该用对多种化学试剂惰性的材料构成试剂惰性的材料构成. .生物安全
21、柜的主要目的是保护操作人员、环境和样品免受生物生物安全柜的主要目的是保护操作人员、环境和样品免受生物有害物质的侵害。生物安全柜及其有害物质的侵害。生物安全柜及其HEPAHEPA滤膜使用对在生物研究滤膜使用对在生物研究中常用化学品表现惰性的材料,但可能会被排风柜中常用的更中常用化学品表现惰性的材料,但可能会被排风柜中常用的更腐蚀性的化学品破坏腐蚀性的化学品破坏“我可以把生物安全柜当排风柜使用.不要把生物安全柜当排风柜使用常见说法和错误认识错! 生物安全柜只在正确使用的情况下保护操作 人员和样品。在生物安全柜上工作什么时候 都得灭菌. 如果我在生物安全柜上工作, 就不必对我的操作很小心常见说法和错
22、误认识错! 紫外灯只是个附件,减少安全柜不用时工作区域 的污染。紫外线实质上没有穿透力,不会杀灭被 灰尘或有机物保护的微生物。避免污染的最好方 法是在每一段工作开始前和结束后对工作面定期 清洁.如果我用紫外灯,就不必清洁工作区域常见说法和错误认识错! I级安全柜适用于一级,二级和三级安全实验室, II级和III级安全柜则适用于所有级别安全实验室。I级安全柜只适用于一级安全实验室, I级安全柜只适用于二级安全实验室,III级安全柜只适用于三级安全实验室,.常见说法和错误认识不能。 工作区域放置大物体会妨碍气流,降低安全柜的效率。离心机、搅拌机等电器通常有冷却风扇,这会破坏安全柜内的气流。离心机内
23、最好使用密封的安全杯,在安全柜内装样和下样。”我能把离心机放在生物安全柜内使用吗?常见说法和错误认识不一定。对于远离挥发性有害化学品的侵害, 对于远离生物有害气溶胶的侵害,则不是 应根据实际工作的要求和研究内容来- 确定使用B类或A类的生物安全柜“B类安全柜和A类相比能提供更好的保护.”常见说法和错误认识某些应用如研究生物毒素药物的工作,为防止有害物质逃逸.建议连续使用安全柜。大多数应用连续使用安全柜会降低HEPA滤膜的寿命.”所有的生物安全柜应连续工作.”常见说法和错误认识假设房间密闭,没有通风系统,没有什么活动,循环式的A类安全柜可能会把空气净度降至100等级。不幸的是,一旦使用人员进入,
24、房间将再次被污染。这样做将降低HEPA滤膜的寿命.”如果我让安全柜连续工作,室内空气净度将达到100等级.”常见说法和错误认识不一定。 HEPA滤膜应在压力差过大时更换(滤膜沾满了颗粒)决定滤膜寿命的两大因素是房间内空气污染的程度以及安全柜工作的时间按时间表更换滤膜而不考虑滤膜被污染的程度可能造成不必要的浪费”我听说应每年更换HEPA滤膜.”生物安全柜的选用生物安全柜的选用1.凡进行有害微生物和转基因操作,均应使用生物安全柜,不可用净化工作台代替。2.根据工作性质和防护要求,选用适当级别和型号的生物安全柜。3.产品质量。4.售后服务。正确安装II/A型生物安全柜级生物安全柜的性能1.微生物防护性能2.物理性能3.通过环境试验基本性能物理性能微生物防护性能1.对工作人员的防护性能2.产品防护性能3.交叉污染防护性能II级安全柜的现场检测对安全柜必须进行物理性能检测、生物验证II级安全柜的现场检测何时检测1.新II级生物安全柜放到指定位置后;2.II级生物安全柜被移动位置后;3.对II级生物安全柜进行检修后;4.II级生物安全柜更换高效过滤器后;5.II级生物安全柜定期常规现场检测。谢谢!结束语结束语谢谢大家聆听!谢谢大家聆听!66