细菌形态结构观察

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1、实 验 二 细菌形态和结构观察（）（细菌的简单染色和革兰氏染色）一、实验目的一、实验目的1 1、观察细菌菌落征。、观察细菌菌落征。2 2、掌握细菌简单染色、革兰氏染色技术。、掌握细菌简单染色、革兰氏染色技术。3 3、在油镜下观察细菌个体形态。、在油镜下观察细菌个体形态。二、实验原理二、实验原理1 1、细菌菌落特征、细菌菌落特征2 2、细菌基本形态、细菌基本形态3 3、细菌革兰氏染色机理、细菌革兰氏染色机理共有特征：湿润，较光滑，较透明，较粘稠，易挑取，质地均匀，颜色多样，菌落正反面及边缘与中央颜色一致。特有特征： 有鞭毛：菌落大而平坦，边缘多缺刻、不规则 有糖被：菌落大，透明，呈蛋清状 有芽孢

2、：菌落外观粗糙，“干燥”，不透明且表面多褶基本形态：球状，杆状，螺旋状。其它形态： 星形，方形，带柄状，畸形，衰退形G：细胞壁厚，内肽聚糖含量高，且交联度大，网孔小，不含脂类。G ：细胞壁薄，内肽聚糖含量低，交联度小，网孔大，脂类含量高。革兰氏染色过程：初染媒染脱色复染。三、实验材料三、实验材料1 1、菌种：大肠杆菌（、菌种：大肠杆菌（Escherichia coliEscherichia coli）、枯草芽孢杆）、枯草芽孢杆菌（菌（B.subtilisB.subtilis）、金黄色葡萄球菌（）、金黄色葡萄球菌（S.aureusS.aureus）（培）（培养养1824 h1824 h的菌落平板

3、各一个）。的菌落平板各一个）。2 2、染液、染液（1 1）简单染色：吕氏美蓝染液或齐氏石炭酸复红染）简单染色：吕氏美蓝染液或齐氏石炭酸复红染液。液。（2 2）革兰氏染液：草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、）革兰氏染液：草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、95%95%乙醇、番红染液。乙醇、番红染液。3 3、其他物品：普通光学显微镜、载玻片、接种环、其他物品：普通光学显微镜、载玻片、接种环、镊子、酒精灯、无菌水、吸水纸、香柏油、香柏油、镊子、酒精灯、无菌水、吸水纸、香柏油、香柏油、二甲苯、擦镜纸。二甲苯、擦镜纸。四、实验步骤四、实验步骤1 1、菌落形态观察：、菌落形态观察：2 2、细菌简单染色：、细菌简单染

4、色：3 3、细菌革兰氏染色。、细菌革兰氏染色。 注意：菌落颜色、湿度、形状、大小、透明度、颜色、边缘是否规则等特征。染色过程：涂片干燥固定染色（1min）水洗干燥镜检注意事项： 涂片：取菌量不能太大 干燥：自然干燥 水洗：水流不能直接冲在涂菌处滴加少量水滴加少量水挑取菌体挑取菌体涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色水洗水洗干燥干燥细菌革兰氏染色过程细菌革兰氏染色过程 涂片涂片涂片涂片干燥干燥干燥干燥固定固定固定固定初染（草酸铵结晶紫染色初染（草酸铵结晶紫染色初染（草酸铵结晶紫染色初染（草酸铵结晶紫染色1min1min）水洗水洗水洗水洗媒染（碘液冲洗后覆盖媒染（碘液冲洗后覆盖媒染（碘液冲洗后覆盖媒染

5、（碘液冲洗后覆盖1min1min）水洗水洗水洗水洗脱色（脱色（脱色（脱色（9595乙醇脱色至流下乙醇无色为止）乙醇脱色至流下乙醇无色为止）乙醇脱色至流下乙醇无色为止）乙醇脱色至流下乙醇无色为止）立即用水冲洗立即用水冲洗立即用水冲洗立即用水冲洗复染（番红染色复染（番红染色复染（番红染色复染（番红染色2 23min3min）水水水水洗洗洗洗干燥干燥干燥干燥镜检镜检镜检镜检染色结果染色结果金黄色葡萄球菌革兰氏染色结果染色结果染色结果大肠杆菌革兰氏染色结果染色结果染色结果金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合菌样的革兰氏染色结果染色结果染色结果枯草芽孢杆菌革兰氏染色结果实实 验验 要要 求求n n每个同学必须做

6、枯草芽孢杆菌简单染色涂片。每个同学必须做枯草芽孢杆菌简单染色涂片。每个同学必须做枯草芽孢杆菌简单染色涂片。每个同学必须做枯草芽孢杆菌简单染色涂片。n n每组同学必须做金黄色葡萄球菌或大肠杆菌革兰每组同学必须做金黄色葡萄球菌或大肠杆菌革兰每组同学必须做金黄色葡萄球菌或大肠杆菌革兰每组同学必须做金黄色葡萄球菌或大肠杆菌革兰氏染色涂片。氏染色涂片。氏染色涂片。氏染色涂片。n n每组同学必须做枯草芽孢杆菌革兰氏染色涂片。每组同学必须做枯草芽孢杆菌革兰氏染色涂片。每组同学必须做枯草芽孢杆菌革兰氏染色涂片。每组同学必须做枯草芽孢杆菌革兰氏染色涂片。五、实验报告五、实验报告1 1、记录三种菌的革兰氏染色结果，绘出菌体细胞形、记录三种菌的革兰氏染色结果，绘出菌体细胞形态。态。2 2、要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操、要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？作？3 3、当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作、当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？正确，结果可靠？