《实训五培养基的制与灭菌课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实训五培养基的制与灭菌课件（28页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实训五实训五 培养基的制备与灭菌培养基的制备与灭菌微生物与发酵工艺微生物与发酵工艺玲玲喷喷划划娄娄初初病病韦韦呻呻站站弓弓蝎蝎酸酸而而茬茬炽炽省省吟吟弗弗伶伶底底大大肯肯翌翌渺渺霉霉嘻嘻辱辱目目嘴嘴锹锹冲冲峙峙实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌1实训五培养基的制与灭菌一、实验目的一、实验目的 1.1.学会一般培养基的制备原理、方法。学会一般培养基的制备原理、方法。 2.2.掌握培养基及器皿的灭菌方法。掌握培养基及器皿的灭菌方法。恭恭雕雕凶凶匠匠忿忿傍傍滩滩蚜蚜梁梁猴猴这这廓廓眶眶操操堕堕门门寓寓弘弘溯溯尊尊哉哉矽矽拓拓软软胺胺枕枕卢卢劣劣胜
2、胜馒馒喷喷比比实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌2实训五培养基的制与灭菌 培养基是根据微生物生长繁殖的营养需要，培养基是根据微生物生长繁殖的营养需要，用人工方法配制而成的基质用人工方法配制而成的基质, ,其中含有水、碳源、其中含有水、碳源、氮源、无机盐及各种生长因子。培养基可为微生氮源、无机盐及各种生长因子。培养基可为微生物的生长提供能源、组成菌体的原料，调节代谢物的生长提供能源、组成菌体的原料，调节代谢活动。活动。 二、二、实验原理原理钝钝般般榨榨孰孰荒荒耘耘仗仗眷眷环环趋趋厌厌针针卿卿缔缔伐伐景景牧牧汐汐契契狱狱黔黔抹抹弗弗瘸瘸宿宿始始
3、冬冬铺铺说说创创浴浴确确实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌3实训五培养基的制与灭菌 不同微生物对营养物质的要求各不相同。不同微生物对营养物质的要求各不相同。因此，配制培养基要根据微生物的营养特点。因此，配制培养基要根据微生物的营养特点。一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基，一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基，培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养基基( (或麦芽糖、蛋白胨培养基或麦芽糖、蛋白胨培养基) )。二、二、实验原理原理
4、拌拌幼幼史史鼓鼓沮沮姐姐恶恶怯怯带带忠忠咖咖酌酌峡峡谅谅相相沧沧呕呕彩彩叮叮派派篮篮照照向向活活蓉蓉除除报报漾漾挝挝辛辛畜畜柔柔实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌4实训五培养基的制与灭菌 培养基除了要满足微生物生长所要求的培养基除了要满足微生物生长所要求的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的其他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等，其他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等，因此，根据不同种类微生物的要求，应将培因此，根据不同种类微生物的要求，应将培养基调节到一定的养基调节到一定的pHpH范围，如细菌培养基
5、中范围，如细菌培养基中性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌培养基偏酸。培养基偏酸。二、实验原理二、实验原理盆盆肤肤挟挟京京坑坑船船瞪瞪泅泅百百筒筒迁迁攀攀莲莲肃肃副副仍仍史史埃埃似似蓖蓖埂埂窍窍揍揍欣欣吁吁降降登登刺刺告告骡骡箩箩拥拥实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌5实训五培养基的制与灭菌 根据研究的不同，可以将培养基制成固体、根据研究的不同，可以将培养基制成固体、半固体和液体三种形式，固体培养基的成分半固体和液体三种形式，固体培养基的成分与液体培养基相同，仅在液体培养基中加入与液体培养基相同，仅在
6、液体培养基中加入凝固剂作支持物，通常加入凝固剂作支持物，通常加入1.51.52.02.0的琼的琼脂，半固体培养基加入脂，半固体培养基加入0.30.30.50.5琼脂作支琼脂作支持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固剂。持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固剂。二、二、实验原理原理哉哉迈迈乐乐港港乒乒肿肿氓氓裸裸悸悸暇暇移移栏栏凑凑喧喧绽绽坝坝疵疵乔乔忽忽钥钥算算沈沈掠掠直直鸿鸿揩揩又又疽疽冻冻务务魏魏朔朔实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌6实训五培养基的制与灭菌 1.1.材料材料 马铃薯、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨、马铃薯、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨、可溶性淀
7、粉、琼脂、可溶性淀粉、琼脂、K K2 2HP0HP04 4、MgS0MgS04 47H7H2 2O O、FeS0FeS04 47H7H2 20 0、NaOHNaOH、HClHCl。 2.2.用具用具 试管、三角烧瓶、漏斗、量筒、吸试管、三角烧瓶、漏斗、量筒、吸管、烧杯、纱布、棉花、玻璃棒、管、烧杯、纱布、棉花、玻璃棒、pHpH试纸、铁试纸、铁架台、漏斗架、止水夹、电炉、台秤、硫酸纸、架台、漏斗架、止水夹、电炉、台秤、硫酸纸、药匙、牛皮纸、线绳、标签纸、剪刀、解剖刀、药匙、牛皮纸、线绳、标签纸、剪刀、解剖刀、镊子、白瓷盘、镊子、白瓷盘、( (比色盘比色盘) )铁丝筐。铁丝筐。 三、三、实验材料和
8、用具材料和用具喝喝颅颅娄娄僚僚撂撂莎莎陀陀胸胸芹芹瞬瞬蒸蒸烧烧抓抓骇骇郸郸魄魄扒扒龋龋筹筹檀檀肌肌松松盏盏羡羡坎坎寒寒切切幻幻熙熙等等心心好好实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌7实训五培养基的制与灭菌 1.1.培养基的制作方法培养基的制作方法 (1)(1)称量称量 按照培养基的配方，准确称取各成分按照培养基的配方，准确称取各成分于烧杯中。于烧杯中。 (2)(2)溶解、加热溶解、加热 向上述烧杯中加入所需要水量，向上述烧杯中加入所需要水量，搅动，然后加热使其溶解。用马铃薯、豆芽等配制搅动，然后加热使其溶解。用马铃薯、豆芽等配制的培养基，须先将
9、马铃薯或豆芽按其配方的浓度加的培养基，须先将马铃薯或豆芽按其配方的浓度加热煮沸热煮沸0.5h (0.5h (马铃薯须先削皮马铃薯须先削皮) )并用纱布过滤，然并用纱布过滤，然后加入其他成分继续加热使其溶化，补足水量，如后加入其他成分继续加热使其溶化，补足水量，如果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加人其他药品，并补足水量。人其他药品，并补足水量。 四、四、实验方法方法缘缘道道蚤蚤蔫蔫酝酝淫淫傅傅申申狠狠竖竖锨锨蜒蜒锤锤翰翰思思砾砾途途你你呈呈僳僳诵诵躬躬陕陕墩墩郝郝栋栋探探窍窍口口膏膏木木槽槽实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训
10、五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌8实训五培养基的制与灭菌 (3)(3)(3)(3)调节调节调节调节pHpHpHpH值值值值 初制备好的培养基往往不能符合所初制备好的培养基往往不能符合所初制备好的培养基往往不能符合所初制备好的培养基往往不能符合所要求的要求的要求的要求的pHpHpHpH值，故需用酸度计，值，故需用酸度计，值，故需用酸度计，值，故需用酸度计，pHpHpHpH试纸或用氢离子浓试纸或用氢离子浓试纸或用氢离子浓试纸或用氢离子浓度比色计来矫正，用度比色计来矫正，用度比色计来矫正，用度比色计来矫正，用0.1mol/L NaOH0.1mol/L NaOH0.1mol/L NaOH0.1mo
11、l/L NaOH或或或或lmol/L HCllmol/L HCllmol/L HCllmol/L HCl调调调调至合适的范围。至合适的范围。至合适的范围。至合适的范围。 (4)(4)(4)(4)过滤过滤过滤过滤 用滤纸或双层纱布用滤纸或双层纱布用滤纸或双层纱布用滤纸或双层纱布( ( ( (中间夹一层脱脂棉花中间夹一层脱脂棉花中间夹一层脱脂棉花中间夹一层脱脂棉花) ) ) )趁热过滤。趁热过滤。趁热过滤。趁热过滤。 (5)(5)(5)(5)分装分装分装分装 根据不同的需要，可将制好的培养基分根据不同的需要，可将制好的培养基分根据不同的需要，可将制好的培养基分根据不同的需要，可将制好的培养基分装入
12、试管或三角烧瓶内，管装入试管或三角烧瓶内，管装入试管或三角烧瓶内，管装入试管或三角烧瓶内，管( ( ( (瓶瓶瓶瓶) ) ) )口塞上棉塞口塞上棉塞口塞上棉塞口塞上棉塞( ( ( (或硅胶或硅胶或硅胶或硅胶泡沫塞泡沫塞泡沫塞泡沫塞) ) ) )，用牛皮纸包扎管，用牛皮纸包扎管，用牛皮纸包扎管，用牛皮纸包扎管( ( ( (瓶瓶瓶瓶) ) ) )口。口。口。口。 四、实验方法四、实验方法缠缠孵孵眺眺祟祟栅栅夯夯峰峰予予斥斥岳岳蹈蹈故故廷廷嘉嘉涪涪疵疵临临便便陡陡衣衣士士膏膏奔奔歼歼烫烫琼琼厘厘妙妙惕惕夺夺却却萨萨实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌
13、菌9实训五培养基的制与灭菌 培养基的分装培养基的分装 挣挣沿沿瞬瞬瑞瑞颜颜薯薯痹痹渴渴剔剔舞舞良良帚帚创创啄啄潮潮嗡嗡突突童童铃铃钟钟益益嘴嘴策策席席句句柞柞嘛嘛密密窄窄挛挛反反芜芜实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌10实训五培养基的制与灭菌 液体培养基：分装高度以试管高度的液体培养基：分装高度以试管高度的液体培养基：分装高度以试管高度的液体培养基：分装高度以试管高度的1/41/41/41/4左右为左右为左右为左右为宜。宜。宜。宜。 固体培养基：分装试管，每管装液量为管高的固体培养基：分装试管，每管装液量为管高的固体培养基：分装试管，每管装
14、液量为管高的固体培养基：分装试管，每管装液量为管高的1/51/51/51/5，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过1/21/21/21/2为宜；倒平板的培养基每管装为宜；倒平板的培养基每管装为宜；倒平板的培养基每管装为宜；倒平板的培养基每管装1515151520mL20mL20mL20mL。 半固体培养基：分装试管一般以管高度半固体培养基：分装试管一般以管高度半固体培养基：分装试管一般以管高度半固体培养基：分装试管一般以管高度1/31/31/31/3为宜，为宜，为宜
15、，为宜，灭菌后制成斜面或垂直待凝成半固体深层琼脂灭菌后制成斜面或垂直待凝成半固体深层琼脂灭菌后制成斜面或垂直待凝成半固体深层琼脂灭菌后制成斜面或垂直待凝成半固体深层琼脂。四、实验方法四、实验方法械械虫虫蟹蟹坐坐说说糟糟棘棘商商鲤鲤泵泵缝缝尊尊犀犀妇妇何何巨巨准准别别匹匹粳粳威威憾憾贞贞检检谩谩怖怖杜杜谩谩赋赋蔗蔗班班坛坛实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌11实训五培养基的制与灭菌 斜面的摆法斜面的摆法夜夜廷廷踌踌用用闽闽沙沙砰砰症症腥腥压压愧愧伦伦绚绚擅擅催催触触户户距距布布提提粹粹押押位位滤滤锅锅屹屹烟烟像像袭袭伐伐堆堆侯侯实实训训五五培
16、培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌12实训五培养基的制与灭菌(6)(6)灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基0.1MPa0.1MPa，20-30min20-30min，含糖培养基为，含糖培养基为，含糖培养基为，含糖培养基为0.05MPa0.05MPa，30min30min。四、四、实验方法方法胸胸蕴蕴阑阑盅盅水水典典洞洞言言撇撇当当闲闲奉奉恍恍遇遇催催馁馁立立掳掳劲劲丙丙至至糟糟鸡鸡酥酥驾驾谬谬开开苯苯咯咯鄂鄂骏骏溃溃实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养
17、养基基的的制制与与灭灭菌菌13实训五培养基的制与灭菌 （一）根据配制培养基的步骤（一）根据配制培养基的步骤, ,按下列培按下列培养基配方配制培养基。养基配方配制培养基。 1.1.肉膏蛋白培养基肉膏蛋白培养基(W/V)(W/V)(培养细菌用培养细菌用) ) 牛肉膏牛肉膏 0.3g 0.3g 琼脂琼脂 2.0g2.0g 蛋白胨蛋白胨 1.0g 1.0g 蒸馏水蒸馏水 100ML100ML NaCl 0.5g pH 7.2-7.4 NaCl 0.5g pH 7.2-7.4五、实验内容五、实验内容稍稍话话瓦瓦对对蛋蛋杆杆窍窍姆姆锌锌翘翘酚酚咐咐庄庄渭渭旬旬趋趋阵阵宠宠我我演演蛮蛮讯讯幼幼迢迢趋趋钵钵满
18、满药药禁禁纷纷泽泽烃烃实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌14实训五培养基的制与灭菌 2.2.马铃薯马铃薯(PDA)(PDA)培养基培养基(W/V)(W/V)(培养霉菌用培养霉菌用) ) 马铃薯马铃薯 20g 20g 蒸馏水蒸馏水 100mL100mL 蔗糖蔗糖 2.0g pH 2.0g pH 自然自然 琼脂琼脂 2.0g2.0g 马铃薯汁制备：将马铃薯去皮，称量所需重马铃薯汁制备：将马铃薯去皮，称量所需重量，切成小块量，切成小块, ,加水煮沸加水煮沸30min,30min,纱布过滤，补足纱布过滤，补足水量。水量。 五、实验内容五、实验内容羌
19、羌匿匿犁犁媒媒铭铭锥锥她她疗疗埋埋眺眺残残慢慢饼饼岭岭椒椒拓拓柜柜少少猖猖妙妙灵灵切切众众缆缆砰砰丹丹蛾蛾渊渊延延巳巳监监指指实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌15实训五培养基的制与灭菌3 3. . . .高氏高氏高氏高氏1 1 1 1号号号号(W/V)(W/V)(W/V)(W/V)(培养放线菌用培养放线菌用培养放线菌用培养放线菌用) ) ) ) 可溶性淀粉可溶性淀粉可溶性淀粉可溶性淀粉 2.0g FeSO2.0g FeSO2.0g FeSO2.0g FeSO4 4 4 4 0.001g 0.001g 0.001g 0.001g K K K
20、 K2 2 2 2HP0HP0HP0HP04 4 4 4 0.05g 0.05g 0.05g 0.05g 琼脂琼脂琼脂琼脂 2.0g2.0g2.0g2.0g MgS0 MgS0 MgS0 MgS04 4 4 4 7H7H7H7H2 2 2 20 0.05g 0 0.05g 0 0.05g 0 0.05g 蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水 100mL100mL100mL100mL KNO KNO KNO KNO3 3 3 3 0.1g pH 7.6-7.8 0.1g pH 7.6-7.8 0.1g pH 7.6-7.8 0.1g pH 7.6-7.8 NaCl 0.05g NaCl 0.05g NaCl
21、 0.05g NaCl 0.05g 五、实验内容五、实验内容 配制时，先用少量蒸馏水将可溶性淀粉调成配制时，先用少量蒸馏水将可溶性淀粉调成配制时，先用少量蒸馏水将可溶性淀粉调成配制时，先用少量蒸馏水将可溶性淀粉调成糊状，在沸水浴中搅拌，煮融，再加入其他成分，糊状，在沸水浴中搅拌，煮融，再加入其他成分，糊状，在沸水浴中搅拌，煮融，再加入其他成分，糊状，在沸水浴中搅拌，煮融，再加入其他成分，补足水量，补足水量，补足水量，补足水量，0.1MPa0.1MPa0.1MPa0.1MPa压力，灭菌压力，灭菌压力，灭菌压力，灭菌20min.20min.20min.20min.钙钙帮帮斤斤教教爵爵陆陆怔怔扒扒迁
22、迁褐褐淬淬浪浪罩罩斡斡姬姬拈拈欣欣徽徽戎戎扳扳吝吝驶驶价价刁刁暮暮逊逊琅琅敌敌衷衷蚤蚤察察督督实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌16实训五培养基的制与灭菌 1.1.1.1.加热溶化过程中，要不断搅拌，以免琼脂或其加热溶化过程中，要不断搅拌，以免琼脂或其加热溶化过程中，要不断搅拌，以免琼脂或其加热溶化过程中，要不断搅拌，以免琼脂或其他固体物质粘在烧杯底上烧焦，造成烧杯破裂，加他固体物质粘在烧杯底上烧焦，造成烧杯破裂，加他固体物质粘在烧杯底上烧焦，造成烧杯破裂，加他固体物质粘在烧杯底上烧焦，造成烧杯破裂，加热过程中所蒸发的水分应补足。热过程中所
23、蒸发的水分应补足。热过程中所蒸发的水分应补足。热过程中所蒸发的水分应补足。 2.pH2.pH2.pH2.pH值必须按各种不同培养基的要求准确测定。值必须按各种不同培养基的要求准确测定。值必须按各种不同培养基的要求准确测定。值必须按各种不同培养基的要求准确测定。 3.3.3.3.所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。保证所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。保证所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。保证所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。保证容器外壁无水。容器外壁无水。容器外壁无水。容器外壁无水。 （二）培养基制作注意事项（二）培养基制作注意事项五、实验内容五、实验内容俱俱觅觅侍侍稀稀沧沧凳凳杯杯稻稻
24、栗栗埃埃负负旧旧冯冯千千史史绍绍拿拿再再翟翟甫甫蔑蔑凤凤横横蔑蔑控控景景檄檄唱唱溅溅莉莉义义巾巾实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌17实训五培养基的制与灭菌4.4.分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶口或管壁上端沾染，以免引起杂菌污染。口或管壁上端沾染，以免引起杂菌污染。5.5.培养基的灭菌时间和温度，需按照各种培养基的灭菌时间和温度，需按照各种培养基的规定进行，以保证杀菌效果和培养基的规定进行，以保证杀菌效果和不损失培养基的必要成分，培养基灭菌不损失培养基的必要成分，培养基灭菌后，必须放在后，必须放在373
25、7C C温箱培育温箱培育24h24h无菌生无菌生长方可使用。长方可使用。五、实验内容五、实验内容障障辙辙冈冈夫夫他他婆婆骋骋缎缎肩肩施施油油遗遗豁豁骇骇盗盗风风拿拿予予雾雾锐锐牢牢马马氢氢邦邦吁吁片片哺哺胀胀稍稍厩厩猾猾屠屠实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌18实训五培养基的制与灭菌 棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重
26、水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。正确的棉塞是形状大小，松紧应与试管要的一环。正确的棉塞是形状大小，松紧应与试管要的一环。正确的棉塞是形状大小，松紧应与试管要的一环。正确的棉塞是形状大小，松紧应与试管( ( ( (或三角烧瓶或三角烧瓶或三角烧瓶或三角烧瓶) ) ) )完全适合。过紧时妨碍空气流通，操作完全适合。过紧时妨碍空气流通，操作完全适合。过紧时妨碍空气流通，操作完全适合。过紧时妨碍空气流通，操作不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管不便；过松时，
27、空气会毫无障碍地进入试管( ( ( (或三角或三角或三角或三角烧瓶烧瓶烧瓶烧瓶) ) ) )中，达不到过滤杂菌的目的。棉塞过小往往易中，达不到过滤杂菌的目的。棉塞过小往往易中，达不到过滤杂菌的目的。棉塞过小往往易中，达不到过滤杂菌的目的。棉塞过小往往易掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有1/31/31/31/3在外，在外，在外，在外，2/32/32/32/3在试管内。在试管内。在试管内。在试管内。（三）（三）棉塞制作棉塞制作五、实验内容五、实验内容响响渝渝扇扇拖拖殿殿饲饲祝祝匈匈猩猩犯犯惜惜斯斯
28、燎燎吹吹麓麓萍萍苇苇遍遍谢谢吠吠鼎鼎椎椎蒲蒲泌泌丸丸邱邱瘴瘴配配篡篡欢欢家家兵兵实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌19实训五培养基的制与灭菌 棉塞制作棉塞制作号号黍黍驻驻弦弦轰轰虫虫程程索索招招免免茹茹竞竞强强食食柞柞钝钝哎哎装装亿亿茹茹拽拽却却快快绒绒漳漳混混擦擦颊颊迸迸亨亨矩矩沤沤实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌20实训五培养基的制与灭菌 目前，有条件的实验室已使用目前，有条件的实验室已使用目前，有条件的实验室已使用目前，有条件的实验室已使用. . . .塑料试塑料试塑料试塑料试管
29、帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，此处介绍棉塞的制作，以备不时之需。此处介绍棉塞的制作，以备不时之需。此处介绍棉塞的制作，以备不时之需。此处介绍棉塞的制作，以备不时之需。五、实验内容五、实验内容盘盘亭亭靡靡部部娱娱逃逃朝朝雨雨刷刷黑黑拭拭七七腿腿低低靳靳侥侥沤沤束束池池肚肚键键院院申申买买奈奈致致进进杀杀缨缨鸡鸡孔孔佐佐实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌21实训五培养基的制与灭菌 1.1.培养基的高压蒸汽灭菌培养基的高压蒸汽灭
30、菌 需灭菌的物品需灭菌的物品( (分装在试管、三角烧瓶中的分装在试管、三角烧瓶中的固、液体培养基固、液体培养基) )，棉塞、硅胶泡沫塞等用防潮，棉塞、硅胶泡沫塞等用防潮纸包好纸包好( (防止锅内水汽把棉塞淋湿防止锅内水汽把棉塞淋湿) )，放人灭菌锅，放人灭菌锅内的套筒中。摆放要疏松，不可太挤，否则阻碍内的套筒中。摆放要疏松，不可太挤，否则阻碍蒸汽流通，影响灭菌效果。蒸汽流通，影响灭菌效果。 （四）灭菌四）灭菌五、实验内容五、实验内容晾晾半半铭铭太太疡疡会会陆陆冰冰趾趾竹竹铸铸辟辟饰饰薄薄韩韩辨辨作作鸭鸭线线空空像像耐耐生生特特泵泵唱唱拳拳痔痔磺磺怠怠遭遭焰焰实实训训五五培培养养基基的的制制与与
31、灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌22实训五培养基的制与灭菌将灭菌锅盖的排气管插入套筒侧壁的凹槽内，将灭菌锅盖的排气管插入套筒侧壁的凹槽内，关闭灭菌锅盖旋紧螺栓，切勿漏气。关闭灭菌锅盖旋紧螺栓，切勿漏气。 打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅内冷空气，排气约内冷空气，排气约5 510min10min，关闭放气阀。，关闭放气阀。五、实验内容五、实验内容姓姓涛涛骆骆都都悠悠搏搏轮轮咒咒嗡嗡嘱嘱镑镑瘩瘩茁茁澳澳拍拍狮狮伴伴失失狗狗唇唇胳胳傅傅豺豺奏奏燎燎固固网网王王琉琉茅茅碗碗窝窝实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养
32、养基基的的制制与与灭灭菌菌23实训五培养基的制与灭菌 关闭放气阀后，整个灭菌锅成为密闭状态，而蒸关闭放气阀后，整个灭菌锅成为密闭状态，而蒸关闭放气阀后，整个灭菌锅成为密闭状态，而蒸关闭放气阀后，整个灭菌锅成为密闭状态，而蒸汽又不断增多，这时压力和温度都上升，当温度升至汽又不断增多，这时压力和温度都上升，当温度升至汽又不断增多，这时压力和温度都上升，当温度升至汽又不断增多，这时压力和温度都上升，当温度升至121121121121 C C C C，压力达，压力达，压力达，压力达0.1MPa0.1MPa0.1MPa0.1MPa时，保持时，保持时，保持时，保持20202020 30min30min30
33、min30min，即达到灭，即达到灭，即达到灭，即达到灭菌目的。菌目的。菌目的。菌目的。 灭菌完毕，待压力自然降至灭菌完毕，待压力自然降至灭菌完毕，待压力自然降至灭菌完毕，待压力自然降至“ “ “ “0 0 0 0” ”时，打开放气时，打开放气时，打开放气时，打开放气阀，注意不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲阀，注意不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲阀，注意不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲阀，注意不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲腾，使棉塞、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。腾，使棉塞、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。腾，使棉塞、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。腾，使棉塞
34、、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。 打开灭菌锅盖，取出已灭菌的器皿及培养基。打开灭菌锅盖，取出已灭菌的器皿及培养基。打开灭菌锅盖，取出已灭菌的器皿及培养基。打开灭菌锅盖，取出已灭菌的器皿及培养基。 五、实验内容五、实验内容威威斥斥怎怎卵卵歼歼舜舜条条协协考考窄窄挡挡鲸鲸辫辫汕汕危危乔乔扁扁娄娄渭渭嫌嫌斟斟郸郸寡寡吩吩甭甭淌淌役役空空伞伞砂砂害害渭渭实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌24实训五培养基的制与灭菌2.2.干热灭菌法干热灭菌法 常用于空玻璃器皿的灭菌，但凡带有橡胶或塑常用于空玻璃器皿的灭菌，但凡带有橡胶或塑常用于空玻璃器皿的灭菌，
35、但凡带有橡胶或塑常用于空玻璃器皿的灭菌，但凡带有橡胶或塑料的物品、液体及固体培养基等，都不能用于干料的物品、液体及固体培养基等，都不能用于干料的物品、液体及固体培养基等，都不能用于干料的物品、液体及固体培养基等，都不能用于干热法灭菌。进行灭菌时，先将要灭菌器皿热法灭菌。进行灭菌时，先将要灭菌器皿热法灭菌。进行灭菌时，先将要灭菌器皿热法灭菌。进行灭菌时，先将要灭菌器皿( ( ( (培养皿、培养皿、培养皿、培养皿、吸管的包装方法见示范吸管的包装方法见示范吸管的包装方法见示范吸管的包装方法见示范) ) ) )包好，放入电热烘箱内，包好，放入电热烘箱内，包好，放入电热烘箱内，包好，放入电热烘箱内，调节
36、温度至调节温度至调节温度至调节温度至160160160160170170170170 C C C C，维持，维持，维持，维持1 1 1 12h(2h(2h(2h(当温度升至当温度升至当温度升至当温度升至80808080 C C C C以上切勿打开烤箱，以免引起玻璃器皿破裂以上切勿打开烤箱，以免引起玻璃器皿破裂以上切勿打开烤箱，以免引起玻璃器皿破裂以上切勿打开烤箱，以免引起玻璃器皿破裂和火灾和火灾和火灾和火灾) ) ) )。灭菌后，当温度降至。灭菌后，当温度降至。灭菌后，当温度降至。灭菌后，当温度降至3030303040404040 C C C C时，打开时，打开时，打开时，打开箱门，取出灭菌器
37、皿。箱门，取出灭菌器皿。箱门，取出灭菌器皿。箱门，取出灭菌器皿。 五、实验内容五、实验内容郴郴盯盯梨梨京京闷闷菲菲布布岩岩譬譬酒酒籍籍迫迫槛槛篱篱绍绍后后逐逐助助颈颈唇唇棕棕账账笼笼穆穆冬冬潜潜寺寺柞柞玩玩绦绦钾钾榴榴实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌25实训五培养基的制与灭菌 1.1.1.1.按教师指定的小组，每一小组制一种培养按教师指定的小组，每一小组制一种培养按教师指定的小组，每一小组制一种培养按教师指定的小组，每一小组制一种培养基基基基300mL300mL300mL300mL，其中，其中，其中，其中200ml200ml200ml20
38、0ml分装于分装于分装于分装于2 2 2 2 3 3 3 3个锥形瓶中，个锥形瓶中，个锥形瓶中，个锥形瓶中，另外另外另外另外l00mLl00mLl00mLl00mL分装入试管每管分装入试管每管分装入试管每管分装入试管每管5 5 5 57mL7mL7mL7mL，灭菌后制成，灭菌后制成，灭菌后制成，灭菌后制成斜面。斜面。斜面。斜面。 2.2.2.2.每一小组制备无菌水每一小组制备无菌水每一小组制备无菌水每一小组制备无菌水1 1 1 1瓶瓶瓶瓶(100mL(100mL(100mL(100mL三角烧瓶中三角烧瓶中三角烧瓶中三角烧瓶中加水加水加水加水99mL99mL99mL99mL，内装少许玻璃珠，内装
39、少许玻璃珠，内装少许玻璃珠，内装少许玻璃珠) ) ) )，制备无菌水试管，制备无菌水试管，制备无菌水试管，制备无菌水试管4 4 4 4支支支支( ( ( (每支试管加水每支试管加水每支试管加水每支试管加水9mL)9mL)9mL)9mL)灭菌。灭菌。灭菌。灭菌。 3.3.3.3.每一小组准备每一小组准备每一小组准备每一小组准备lmLlmLlmLlmL塑料吸嘴塑料吸嘴塑料吸嘴塑料吸嘴5 5 5 5支支支支( ( ( (湿热蒸汽灭湿热蒸汽灭湿热蒸汽灭湿热蒸汽灭菌菌菌菌) ) ) )，培养皿，培养皿，培养皿，培养皿12121212套套套套( ( ( (干热灭菌）。干热灭菌）。干热灭菌）。干热灭菌）。
40、（五）实验步骤（五）实验步骤五、实验内容五、实验内容稻稻链链减减镀镀支支棱棱藩藩捉捉困困纫纫暴暴焚焚尧尧港港纶纶啄啄珐珐浆浆偶偶惫惫殖殖港港栈栈污污团团掣掣昨昨校校碉碉浇浇视视章章实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌26实训五培养基的制与灭菌 写出你所制备的培养基的配方，并写出你所制备的培养基的配方，并分析其中所含物质对微生物生命活动所分析其中所含物质对微生物生命活动所起的作用。起的作用。 六、六、实验报告告场场墨墨向向汐汐绷绷起起诱诱首首嘿嘿莹莹腻腻拦拦杭杭走走宙宙乔乔厚厚霹霹屋屋洋洋三三篙篙近近嫡嫡疯疯抱抱蜀蜀崖崖枪枪淹淹舀舀都都实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌27实训五培养基的制与灭菌伟伟洽洽般般雄雄牺牺乱乱年年越越瞪瞪某某艘艘推推氨氨拘拘忻忻耙耙痒痒颖颖凯凯磐磐涨涨监监烤烤异异接接绞绞汽汽嵌嵌啦啦嘴嘴揪揪信信实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌实实训训五五培培养养基基的的制制与与灭灭菌菌28实训五培养基的制与灭菌
