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1、第三节第三节中药药理实验设计的基本原则中药药理实验设计的基本原则小学教育09中药药理实验方法学1.对照对照n n（1）正常对照组（空白对照、阴性对照）正常对照组（空白对照、阴性对照）n n（2）模型对照组）模型对照组n n（3）阳性对照组）阳性对照组n n意义：意义：检验实验体系是否可靠检验实验体系是否可靠n n粗略估计受试药与对照药相比，作粗略估计受试药与对照药相比，作用强度与特点上有哪些差异。用强度与特点上有哪些差异。小学教育09中药药理实验方法学n n（4）假手术对照组）假手术对照组n n有时可以替代正常对照有时可以替代正常对照n n（5）自身对照）自身对照n n观察同一个体给药前、后的
2、区别观察同一个体给药前、后的区别.小学教育09中药药理实验方法学2.随机：随机：目的：目的：（1）避免非研究因素影响。）避免非研究因素影响。（2）除研究因素外，提高各比较组的除研究因素外，提高各比较组的其他因素的均衡性、可比性。其他因素的均衡性、可比性。（3）满足统计学假设检验的要求。）满足统计学假设检验的要求。小学教育09中药药理实验方法学抽签随机法：抽签随机法：例：例：30只小鼠，要求随机分为只小鼠，要求随机分为3组：组：可先将可先将30只小鼠按只小鼠按1至至30编号，做编号，做1-30号签，充分混合号签后，随机各取号签，充分混合号签后，随机各取10枚为一组。枚为一组。 小学教育09中药药
3、理实验方法学随机数字表法：随机数字表法：取取P.187,表表221，第，第16行行 小学教育09中药药理实验方法学顺序号顺序号:A组：组：1，9，12，13，15B组组:2，3，5，7，10，11C组：组：4，6，8，14按原随机数字顺序继续抄一随机号按原随机数字顺序继续抄一随机号:08除以除以6余数余数:2,将将8组第二只，即组第二只，即3号小鼠编入号小鼠编入C组。组。调整后各组的编号调整后各组的编号 :A组：组：1，9，12，13，15B组：组：2，5，7，10，11C组组:3，4，6，8，14小学教育09中药药理实验方法学练习：练习：20个小鼠，根据下例随机数顺序，将其个小鼠，根据下例随
4、机数顺序，将其随机分成随机分成4组。组。取取P.187,表表221，第，第1行行随机号：随机号：22176865846895239235870222575161094395065824820347小学教育09中药药理实验方法学鼠号：鼠号：12345678910随机号：随机号：22176865846895239235除以除以4余数：余数：2101003303鼠号：鼠号：11121314151617181920随机号：随机号：87022257516109439506除以除以4余数：余数：3221311332随机号：随机号：5824820347小学教育09中药药理实验方法学根据余数分组鼠号：根据余数
5、分组鼠号：A组：组：24141617B组：组：1121320C组：组：781011151819D组：组：3569继续按顺序抄继续按顺序抄2个随机号：个随机号：582458/7余数为余数为2，即，即C组第组第2个动物（个动物（8号）编号）编入入B组。组。24/6余数为余数为0，即，即C组余下的组余下的6个动物中的个动物中的第第6个（个（19号）编入号）编入D组。组。小学教育09中药药理实验方法学调整后随机分组的结果为（按动物号）：调整后随机分组的结果为（按动物号）：A组：组：24141617B组：组：18121320C组：组：710111518D组：组：356919小学教育09中药药理实验方法学
6、按随几号大小顺序分组法将按随几号大小顺序分组法将20只小鼠随机只小鼠随机分成分成4组组(取取P.187,表表221，第，第1行行)鼠号：鼠号：12345678910随机号：随机号：22176865846895239235鼠号：鼠号：11121314151617181920随机号：随机号：87022257516109439506鼠号：鼠号：12201721138101815随机号：随机号：02060917222223354351鼠号：鼠号：14164365119719随机号：随机号：57616568688487929595小学教育09中药药理实验方法学分层随机分层随机先将需严格控制的主要因素，如
7、性别、先将需严格控制的主要因素，如性别、体重等分为不同类别，或层次；在每体重等分为不同类别，或层次；在每一类别或层次中分别随机分成一定组。一类别或层次中分别随机分成一定组。将每一类别或层次随机分成的组将每一类别或层次随机分成的组,组次组次相同的分别合并。相同的分别合并。小学教育09中药药理实验方法学n n3.重复重复：n n目的：验证在类似的条件是否可获得结果目的：验证在类似的条件是否可获得结果的重现以及结果的变异情况的重现以及结果的变异情况。n n要点：要点：n nA.确定适当的样本数。确定适当的样本数。n nB.各组动物数目尽量相同。各组动物数目尽量相同。n n按动物类型确定样本数：按动物
8、类型确定样本数：n n（1）小动物：计量）小动物：计量10例例;计数计数30例例n n（2）中等动物：计量）中等动物：计量8;计数计数20例例n n（3）大动物）大动物5-8例例小学教育09中药药理实验方法学第四节第四节中药药理实验设计的注意事项中药药理实验设计的注意事项 一、实验动物一、实验动物1、按要求选择不同级别符合医学实验标准、按要求选择不同级别符合医学实验标准的动物的动物一级：普通动物（亦称常规动物或无疾病一级：普通动物（亦称常规动物或无疾病的动物）；的动物）；二级：清洁动物（饲养在温度恒定，普通二级：清洁动物（饲养在温度恒定，普通设施中的动物，饲料、垫料，用具均经过设施中的动物，饲
9、料、垫料，用具均经过高压消毒）；高压消毒）；小学教育09中药药理实验方法学三级：无特殊病原体动物（三级：无特殊病原体动物（specific-pathogenfree,简称简称SPF动物）；在清洁动物）；在清洁级基础上还需不带干扰实验的微生物，在级基础上还需不带干扰实验的微生物，在隔离室或层流室饲养隔离室或层流室饲养。四级：无菌动物（机体内外均无任何寄生四级：无菌动物（机体内外均无任何寄生虫的动物，一般是临产前按无菌手术虫的动物，一般是临产前按无菌手术剖腹剖腹取出胎仔，在无菌条件下用无菌饲料繁养取出胎仔，在无菌条件下用无菌饲料繁养获得的动物）。获得的动物）。小学教育09中药药理实验方法学2、根据
10、实验目的选择敏感种系、根据实验目的选择敏感种系心血管系统心血管系统:大鼠猫、犬、小型猪等。大鼠猫、犬、小型猪等。体温调节：兔体温调节：兔 呕吐实验：鸽、猫或狗等。呕吐实验：鸽、猫或狗等。免疫调节：纯种小鼠免疫调节：纯种小鼠 原则原则:选择对药物的反应与人体相近的选择对药物的反应与人体相近的种系。种系。 小学教育09中药药理实验方法学3、性别、性别 ：根据要求选择根据要求选择 用一种性别比两种性别兼用所得结果离散用一种性别比两种性别兼用所得结果离散度较小。度较小。 4、年龄体重、年龄体重 ： 每批动物的体重，年龄越接近越好每批动物的体重，年龄越接近越好 通常：小鼠通常：小鼠:18-22g，大鼠，
11、大鼠:20025g，豚鼠豚鼠:250-300g，兔、猫，兔、猫:1.5-2Kg,犬犬:10-15kg。大鼠、小鼠大鼠、小鼠:6-8周龄周龄 小学教育09中药药理实验方法学4、数量、数量：计量研究：小鼠每组计量研究：小鼠每组10只只大鼠每组大鼠每组8只只豚鼠或兔每组豚鼠或兔每组6只只猪或狗猪或狗5只只计数研究：计数研究：小鼠每组小鼠每组30只只大鼠每组大鼠每组20只只小学教育09中药药理实验方法学5.习性习性:小鼠、大鼠均为群居动物，不宜单小鼠、大鼠均为群居动物，不宜单独饲养。独饲养。 小学教育09中药药理实验方法学二、二、受试药受试药 1.制备情况：制备情况：（1）新药受试药要求：用处方固定，
12、质量）新药受试药要求：用处方固定，质量稳定、工艺、质控指标恒定后的中试产品。稳定、工艺、质控指标恒定后的中试产品。（2）一般受试中药：生药经鉴定，科属种）一般受试中药：生药经鉴定，科属种清楚；提取制备工艺明确，含量确。清楚；提取制备工艺明确，含量确。（3）中药单体：化学结构式清楚。）中药单体：化学结构式清楚。（4）动物给药量：以动物给药量：以g/kg或或mg/kg生药量生药量或有效组分含量表示。或有效组分含量表示。 小学教育09中药药理实验方法学2、给药途径、给药途径 实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。 中药粗制剂一般不用注射给药或体外实验中药粗制剂一
13、般不用注射给药或体外实验的方法检测药物效应的方法检测药物效应。小学教育09中药药理实验方法学3、给药时间、给药时间注明首次给药时间及每次给药的注明首次给药时间及每次给药的间隔时间。间隔时间。预防性给药预防性给药：治疗给药治疗给药： 小学教育09中药药理实验方法学4、剂量：、剂量：剂量组数：剂量组数：新药研究至少设新药研究至少设3个剂量组。个剂量组。三者最好成等比，能反应量效关系。三者最好成等比，能反应量效关系。给药容量相等，浓度不等。给药容量相等，浓度不等。合理选择剂量：合理选择剂量：（1）参考）参考LD50：在：在LD50的的1/10、1/20、1/40等范围内设置高、中、低剂量组。等范围内
14、设置高、中、低剂量组。（2）根据临床用药等效量计算）根据临床用药等效量计算 ： 小学教育09中药药理实验方法学不同种类动物等效用药量的计算不同种类动物等效用药量的计算小小 白白鼠鼠20g大大白白鼠鼠200g豚豚鼠鼠400g兔兔1.5kg猫猫2.0kg猴猴4.0kg狗狗12.0kg人人70.0kg小小 白白 鼠鼠20g1.07.012.2527.829.764.1124.2387.9大大 白白 鼠鼠200g0.141.01.743.94.29.217.856.0豚鼠豚鼠400g0.030.571.02.252.45.210.231.5兔兔1.5kg0.040.250.441.01.082.44.
15、514.2猫猫2.0kg0.030.230.410.921.02.24.113.0猴猴4.0kg0.0160.110.190.420.451.01.96.1狗狗12.0kg0.0080.060.100.220.230.521.03.1人人70.0kg0.00260.0180.0310.070.0780.160.321.0小学教育09中药药理实验方法学应用举例：应用举例：某复方的总药量是某复方的总药量是60g/剂，每天剂，每天1剂。按剂。按实验动物与人用药量折算表计算实验动物与人用药量折算表计算，200g重重大鼠等效量是多少？（按大鼠等效量是多少？（按g/kg计算）。计算）。200g重大鼠等效量
16、为：重大鼠等效量为：60g0.018=1.08g/只，只，或：或： 60g561.07g/只只 大鼠每公斤的给药量是：大鼠每公斤的给药量是：1.08g1000/200=5.4g/Kg小学教育09中药药理实验方法学人的每公斤体重给药量为：人的每公斤体重给药量为：60g70=0.857g/Kg。按体重计算，要达到等效，大鼠的剂按体重计算，要达到等效，大鼠的剂量应为人用剂量的量应为人用剂量的5.4g/Kg0.857g/Kg=6.3（倍）。（倍）。小学教育09中药药理实验方法学如同一复方要用小鼠实验，小鼠每如同一复方要用小鼠实验，小鼠每只的给药量为：只的给药量为：600.00260.156g/只；只；
17、0.1561000/20=7.8g/Kg；按体重计算，要达到等效，小鼠的剂按体重计算，要达到等效，小鼠的剂量应为人用剂量的量应为人用剂量的7.80g/Kg0.857g/Kg=9.1（倍）。（倍）。小学教育09中药药理实验方法学豚鼠应用量为豚鼠应用量为6031.5=1.90g/只；只；1.901000/400=4.762g/Kg。按体重计算，要达到等效，豚鼠的剂按体重计算，要达到等效，豚鼠的剂量为人用量的量为人用量的4.7620.8575.56（倍）。（倍）。小学教育09中药药理实验方法学兔：兔：6014.24.225g/只；只；4.2251.52.816g/Kg。按体重计算，要达到等效，按体重
18、计算，要达到等效，兔的剂量应为人用量的兔的剂量应为人用量的2.8160.8573.287（倍）。（倍）。小学教育09中药药理实验方法学狗用量为狗用量为60g3.119.35g/只；只；19.3512=1.61g/Kg。按体重计算，要达到等效，按体重计算，要达到等效，狗的给药量应为人的狗的给药量应为人的1.610.8571.88（倍）（倍）小学教育09中药药理实验方法学根据不同种类动物等效用药量表根据不同种类动物等效用药量表练习：练习：某利尿某利尿中药对中药对250g重大鼠的有效量为重大鼠的有效量为240mg/kg，试计算，试计算12kg犬的等效实犬的等效实验剂量？（按验剂量？（按mg/kg计算
19、）计算）小学教育09中药药理实验方法学答案：答案：240mg/kg4=60mg/只只60mg/只只17.8=1068mg/只只1068mg/只只12=89mg/kg小学教育09中药药理实验方法学小学教育09中药药理实验方法学噻嗪类 小学教育09中药药理实验方法学不同种类动物间用药剂量换算表不同种类动物间用药剂量换算表（转换因子（转换因子计算法）计算法）某利尿某利尿中药中药250g重大鼠的有效量为重大鼠的有效量为250mg/kg，试计算，试计算15kg犬的等效实犬的等效实验剂量？验剂量？犬的等效实验剂量犬的等效实验剂量250mg/kg6.922=78.4mg/kg小学教育09中药药理实验方法学不
20、同种类动物间用药剂量换算表不同种类动物间用药剂量换算表（体表面积（体表面积/kg体重体重比值法）比值法）某利尿某利尿中药中药250g重大鼠的有效量为重大鼠的有效量为250mg/kg，试计算，试计算15kg犬的等效实犬的等效实验剂量？验剂量？犬的等效实验剂量犬的等效实验剂量250mg/kg0.160.47=85.1mg/kg小学教育09中药药理实验方法学按体型分数换算法按体型分数换算法,采用下列公式：采用下列公式：式中式中dB是欲求算的是欲求算的B种动物（包括人）的种动物（包括人）的kg体重剂量，体重剂量，dA是已知是已知A种动物（包括人）的种动物（包括人）的kg体重剂量；体重剂量；WA、WB是
21、已知动物是已知动物A、B的体重；的体重；RA、RB是动物的体型系数是动物的体型系数 动物与人的体型系数动物与人的体型系数动物种类动物种类小鼠小鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠兔兔猫猫猴猴犬犬人人R（体型系（体型系数）数）0.060.090.0990.0930.0820.1110.1040.11小学教育09中药药理实验方法学例：已知家兔例：已知家兔2kg，用药，用药50mg/kg，求算家，求算家犬犬5kg体重的用药量。体重的用药量。dA=50，RA=0.093，RB=0.104，WA=2，WB=5，代入上述公式：，代入上述公式：小学教育09中药药理实验方法学（3）根据文献估计剂量）根据文献估计剂量如有相关的药
22、物，相似的复方，其使如有相关的药物，相似的复方，其使用剂量可作为参考。用剂量可作为参考。（4）通过预试估计剂量）通过预试估计剂量小学教育09中药药理实验方法学5给药容量：给药容量：小鼠口服：小鼠口服：0.1ml-0.25ml/10g最大不最大不超过超过0.4ml/10g其他途径不超过其他途径不超过0.25ml/10g。大鼠口服：大鼠口服：10ml/kg,不超过不超过2.0ml/100g其他途径不超过其他途径不超过1.0ml/100g.小学教育09中药药理实验方法学药物溶液配置药物溶液配置例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有例：戊巴比妥钠对小鼠腹腔注射的有效麻醉剂量为效麻醉剂量为40mg/kg。现有
23、体重为。现有体重为20g左右的左右的30只小鼠要麻醉。试问要只小鼠要麻醉。试问要称量多少克的戊巴比妥钠，设计的给称量多少克的戊巴比妥钠，设计的给药容量为多少，配成怎样浓度药容量为多少，配成怎样浓度？小学教育09中药药理实验方法学药物溶液配置药物溶液配置答：答：20g左右的左右的30只小鼠总体重只小鼠总体重600g.40mg/kgx0.6kg=24mg24mg4mg/ml=6ml称量戊巴比妥钠称量戊巴比妥钠30mg，加生理盐水至，加生理盐水至7.5ml,使浓度为使浓度为4mg/ml,小鼠腹腔注小鼠腹腔注射射0.1ml/10g(即即10ml/kg)。小学教育09中药药理实验方法学三、 对照药 合法
24、性：中国药典收载或符合部颁合法性：中国药典收载或符合部颁标准，或新批准合法生产的药物。标准，或新批准合法生产的药物。可比性：其功用、主治、剂型（给药途可比性：其功用、主治、剂型（给药途径）与受试药相似。特殊情况下，在合理径）与受试药相似。特殊情况下，在合理范围内可适当灵活掌握。范围内可适当灵活掌握。择优选用：有多种同类药可供选用时，择优选用：有多种同类药可供选用时，应择优选用公认疗效较好的药物。应择优选用公认疗效较好的药物。小学教育09中药药理实验方法学选择的阳性对照药要注意有无批准文号。选择的阳性对照药要注意有无批准文号。如：麝香保心丸：国药准字如：麝香保心丸：国药准字Z31020068生产
25、单位：生产单位：有效期：必须用有效期内产品。有效期：必须用有效期内产品。恬尔心注射用：国药准字（恬尔心注射用：国药准字（2001）J53号：号：进口药品注册证号：进口药品注册证号：BX20010122）小学教育09中药药理实验方法学四、四、实验条件控制实验条件控制 时辰时辰：动物生理活动有其昼夜节律，：动物生理活动有其昼夜节律，如小鼠夜间活动增加，白天活动减少。如小鼠夜间活动增加，白天活动减少。最好每批实验在每天相同的时间测定。最好每批实验在每天相同的时间测定。环境温度：环境温度：室温稳定、适宜。室温稳定、适宜。饮食饮食：有些实验需对动物禁食。：有些实验需对动物禁食。预适应预适应：37天。天。
26、小学教育09中药药理实验方法学五、五、数据表达和常用统计分析数据表达和常用统计分析的注意事项的注意事项(一一)数据表达数据表达和精确度：和精确度：一般应至少有一般应至少有3位有效数字，位有效数字，标准差至少有标准差至少有2位有效数字，位有效数字，均数的小数位数应与标准差相同，均数的小数位数应与标准差相同，出示的结果应包括均数，标准差，例数，出示的结果应包括均数，标准差，例数，P值情况（值情况（0.05,或具体或具体P值）值）数字的精确度要与测量仪器所能达到的精数字的精确度要与测量仪器所能达到的精确度一致。确度一致。小学教育09中药药理实验方法学表表5增液增液汤、四逆、四逆汤对腹主腹主动脉不完全
27、脉不完全结扎致心室重构大鼠扎致心室重构大鼠动脉血脉血压的影响的影响组别剂量量n nSBP(mmHg)SBP(mmHg)DBP(mmHg)DBP(mmHg)MAP(mmHg)MAP(mmHg)假手假手术组10144.27.2*110.912.7*124.511.7*模型模型组10186.923.7133.717.2158.122.7卡托普利卡托普利组40mg/kg9146.015.5*112.116.9*125.616.7*增液增液汤组28.08g/kg9161.312.6*115.529.6131.717.5*四逆四逆汤组10.8g/kg9208.624.6147.013.6172.216.2
28、与模型与模型组相比相比,* P0.05;*PF0.05时时可判断为方差可判断为方差不齐。不齐。F=s12/s22 F0.05=1.2+(8/n1)+14/(n2-3)(式中式中S较大者为较大者为S1、n1，较小者为，较小者为S2,n2)。F0.05也可通过可查也可通过可查“方差齐性检验方差齐性检验F值表值表”获得（注：与获得（注：与“方差检验方差检验F值表值表”不同）。不同）。小学教育09中药药理实验方法学如：有两组数据如：有两组数据,需统计有无显著差异：需统计有无显著差异：甲组：甲组：11.5，14.1，12.3,10.8，13.0,13.2,13.912.3,10.6乙组：乙组：10.0,
29、11.9,12.0,12.8,14.9,17.4,19.3,20.2,23.1计算计算x1s1：12.411.26(n=9)x2s2:15.734.48(n=9)查无应舍数据。查无应舍数据。有无方差不齐：有无方差不齐：F=4.482/1.262=12.64 F0.051.2+8/9+14/(9-3)=4.422FF0.05说明两组方差不齐，用说明两组方差不齐，用t检验。检验。小学教育09中药药理实验方法学方差不齐时的校正t值 计算公式甲组甲组：11.521.26(n=9)乙组乙组：15.734.48(n=9)按上式计算按上式计算t=2.142小学教育09中药药理实验方法学相相应自由度界自由度界
30、值近似近似值的的计算公式如下：算公式如下： t上式中上式中t1为自由度自由度为n n1 1-1-1时的界的界值；t t2 2为自由度自由度为n n2-1-1时的界的界值。当当tt当前的当前的绝对值大于或等于上述界大于或等于上述界值时，PP小学教育09中药药理实验方法学t0.050.05本例自由度本例自由度(n1-1)及及(n2-1)均均为（91）8;查表得表得t0.05的界的界值为2.306，代入公式，代入公式计算得算得t0.05。两两组间比比较无无显著性差异。著性差异。 2.306甲组甲组：11.521.26(n=9)乙组乙组：15.734.48(n=9)按上式计算按上式计算t=2.142小
31、学教育09中药药理实验方法学但以但以“t”检验，上述两组数据检验，上述两组数据f=9+9-2=16f=16时时t0.05=2.120，将得出将得出:P30，10等）不用等）不用t检验，检验，改为中位数表达改为中位数表达，用非参数统计法用非参数统计法。如如Mann-Whitney秩和检验，等级和检验，序秩和检验，等级和检验，序值法等。值法等。小学教育09中药药理实验方法学(2)配对资料配对资料t检验：（检验：（pairedttest）适用情况：适用情况：同一批受试对象试验前后的配对数据。同一批受试对象试验前后的配对数据。同一批受试对象身体两个部位试验测得同一批受试对象身体两个部位试验测得的数据。
32、的数据。同一批受试对象用两种检验方法的测试同一批受试对象用两种检验方法的测试的结果。的结果。检验方法：检验方法：t=s 小学教育09中药药理实验方法学如某次对中药提取物的降压实验结果如下，是否如某次对中药提取物的降压实验结果如下，是否降压？（降压？（1pKa=7.5006mmHg）：）：用药前用药前:12.0,14.0,13.0,18.0,16.0,15.0,15.0,19.015.32.4(n=8)用药后用药后:10.0,11.0,13.0,16.0,13.0,14.0,13.0,17.013.42.3(n=8)两组直接进行组间比较，两者间并无显著差异。两组直接进行组间比较，两者间并无显著差
33、异。小学教育09中药药理实验方法学用药前用药前:12.0,14.0,13.0,18.0,16.0,15.0,15.0,19.0用药后用药后:10.0,11.0,13.0,16.0,13.0,14.0,13.0,17.0差值：差值：2.0,3.0,02.0,3.0,1.02.0,2.0,xs1.870.99(n=8)配对配对t检验检验 ：t=（1.87/0.99）8=5.357p0.01（F=7时，时，t0.05=2.565t0.01=3.499)小学教育09中药药理实验方法学但进行配对但进行配对t检验时，要确信除待分析检验时，要确信除待分析的因素外，其他可控条件一致。否则的因素外，其他可控条件
34、一致。否则可分别取配对变化值或变化率可分别取配对变化值或变化率;求均数求均数及标准差。同时设对照组，同样处理及标准差。同时设对照组，同样处理后，再进行两组间的后，再进行两组间的t检验，这样更能检验，这样更能提高检验效率。提高检验效率。小学教育09中药药理实验方法学例：某药给药例：某药给药2周前后血压变化如下，问该药有无降压周前后血压变化如下，问该药有无降压作用？作用？组组1大鼠血压大鼠血压（xsmmHg)给药前给药前180165190200192158175185178给药后给药后150140170160159130145153155变化变化302520403328303223计算：计算：xs
35、29.05.93t=（29.0/5.93）3=14.67f=9-1=8,t0.01=3.355p0.01小学教育09中药药理实验方法学在本例自身对照（自身前后配对）实验时，在本例自身对照（自身前后配对）实验时，同一个体在经历一段时间后（如同一个体在经历一段时间后（如2周），即周），即使不作任何处理（给药），所得指标也可使不作任何处理（给药），所得指标也可能有变化，为鉴别该组血压变化是否为非能有变化，为鉴别该组血压变化是否为非药物因素引起，实验时宜设立一个平行对药物因素引起，实验时宜设立一个平行对照组进行比较。这样就有实验组观察前后照组进行比较。这样就有实验组观察前后和对照组观察前后和对照组观察
36、前后4组数据。可分别求出给组数据。可分别求出给药组和对照组的变化值（差值）或变化率药组和对照组的变化值（差值）或变化率及标准差，再进行两组间的及标准差，再进行两组间的t检验。如：检验。如：小学教育09中药药理实验方法学组组2大鼠血压（大鼠血压（给对照液组）给对照液组）（xsmmHg)前前175165195205150145180171176后后160155185190145145171162165变化变化151010155099119.34.7配对配对t检验：检验：t=（9.3/4.7）3=5.936；f=9-1=8,t0.01=3.355P0.05两周后：给药组：两周后：给药组：151.31
37、1.9对照组：对照组：164.215.8t=1.957p0.05小学教育09中药药理实验方法学两组差值组间比较：两组差值组间比较：组组1：给药前后差值：给药前后差值：29.16.0组组2：给对照液前后差值：给对照液前后差值：9.34.7t=7.794f=16,t0.05=2.120t0.01=2.921p1,说明组间变异说明组间变异组内变异。方差分析即组内变异。方差分析即计算计算F值，并根据自由度，判断组间变异即值，并根据自由度，判断组间变异即研究因素引起的可能性有多大（确定研究因素引起的可能性有多大（确定P值）。值）。如如p0.05,再进行组间两两比较。再进行组间两两比较。小学教育09中药药
38、理实验方法学使用方差分析的条件：使用方差分析的条件：各组样本是相互独立的随机样本；各组样本是相互独立的随机样本；各样本符合正态分布；各样本符合正态分布；各处理组总体方差齐性。各处理组总体方差齐性。若符合正态分布，方差齐性，则进行综合比若符合正态分布，方差齐性，则进行综合比较，当较，当F0.05时，说明综合比较有显著差异，时，说明综合比较有显著差异，再进行组间两两比较。再进行组间两两比较。小学教育09中药药理实验方法学组间多重两两比较组间多重两两比较,常用常用LSD(leastsignificantdifference)t检验，或检验，或q检验检验(student-newman-keulstes
39、t)。如一次实验多个组中有一个共同的对照组，如一次实验多个组中有一个共同的对照组，所关心的是各实验组与对照组间的比较，所关心的是各实验组与对照组间的比较，而各实验组间并不需要相互比较时，宜选而各实验组间并不需要相互比较时，宜选用用Dunnett检验（检验（Dunnettstest）小学教育09中药药理实验方法学SPSS软件具有软件具有Homogeneityofvariances程序，可预先对多组间比较进行程序，可预先对多组间比较进行方差齐性检验。方差齐性检验。方差齐时采用方差齐时采用LSD,q或或Dunnett检验法进检验法进行两组间比较。行两组间比较。小学教育09中药药理实验方法学若方差不齐
40、时可考虑作如下处理：若方差不齐时可考虑作如下处理：（1）通过数据转换可成正态分布时，先进）通过数据转换可成正态分布时，先进行数据转换（如取对数）后再进行方差分行数据转换（如取对数）后再进行方差分析；析；（2）采用非参数检验，如秩和检验、序值）采用非参数检验，如秩和检验、序值法等法等。小学教育09中药药理实验方法学计量资料统计方法的选择计量资料统计方法的选择小学教育09中药药理实验方法学2.质反应资料质反应资料又称计数资料。有时机体对药物的反应只又称计数资料。有时机体对药物的反应只有有“是是”或或“否否”两种，如用药后动物死两种，如用药后动物死与不死。翻正反射的存在或消失，某种病与不死。翻正反射
41、的存在或消失，某种病理症状（如惊厥）出现或不出现等，实验理症状（如惊厥）出现或不出现等，实验结果可以是百分比或自然比，其显著性检结果可以是百分比或自然比，其显著性检验一般采用卡方检验（验一般采用卡方检验（22法）。法）。小学教育09中药药理实验方法学 X2= 有效有效无效无效总计总计有效率有效率甲药甲药35(a)15(b)50(a+b)70%乙药乙药25（C)25(d)50(c+d)50%总计总计60(A+c)40(b+d)100(n) 小学教育09中药药理实验方法学四格表的自由度恒等于四格表的自由度恒等于1。0.05的机率点界值为的机率点界值为3.841。X20.05,两药作用无显著性差异。
42、两药作用无显著性差异。小学教育09中药药理实验方法学样本较小（两组总数样本较小（两组总数40例）或数据中例）或数据中有有0或或1时：不用卡方检验，而用精确时：不用卡方检验，而用精确概率法或简化直接概率法。概率法或简化直接概率法。例：使用甲药例：使用甲药16例中例中5例出现不良反应，使例出现不良反应，使用乙药用乙药16例无不良反应，两药有无区别？例无不良反应，两药有无区别？ 小学教育09中药药理实验方法学组别组别有有不良反应不良反应无无不良反应不良反应合计合计甲药甲药5(a)11(b)16(a+b)乙药乙药016(d)16(c+d)合计合计5(a+c)27(b+d)32(a+b+c+d)小学教育
43、09中药药理实验方法学p= p=16!16!5!27!/5!0!11!16!32!=0.0217注：上式为单侧概率值，当注：上式为单侧概率值，当a+b=c+d时，时，四格表内各种组合呈对称分布，单侧检验四格表内各种组合呈对称分布，单侧检验p值乘以值乘以2即得双则检验概率值。因而，本例即得双则检验概率值。因而，本例双侧检验双侧检验P0.0217x2=0.0434,P0.05。结论：乙药的不良反应小于甲药，两者有结论：乙药的不良反应小于甲药，两者有显著差异。显著差异。小学教育09中药药理实验方法学注：本例如用卡方检验注：本例如用卡方检验X2(80-0.5x32)2x32/(5x27x16x16)=
44、3.793,X20.05结论出现差错。结论出现差错。小学教育09中药药理实验方法学3.等级资料等级资料:可以认为是一种有序的计量资可以认为是一种有序的计量资料，它包括：料，它包括：时反应资料，如潜伏期，凝血时间。时反应资料，如潜伏期，凝血时间。病变程度及临床疗效按等级分组的资料，如、病变程度及临床疗效按等级分组的资料，如、或痊愈、显效、好转、无效等。或痊愈、显效、好转、无效等。两端确切数据不明的分组资料，如血清滴度两端确切数据不明的分组资料，如血清滴度1：40，1：80，1：60，1：320等。等。这些资料不宜用均数及标准差作常规的统这些资料不宜用均数及标准差作常规的统计分析，可用等比差值法，
45、等级序值法，计分析，可用等比差值法，等级序值法，秩和法，及秩和法，及Ridit法等非参数统计分析。法等非参数统计分析。小学教育09中药药理实验方法学(四四)常用统计软件包常用统计软件包SAS（statisticsanalysissystem）由美）由美国国SAS软件有限公司研制并发行已有软件有限公司研制并发行已有30多多年的历史，该软件采用窗口菜单或命令方年的历史，该软件采用窗口菜单或命令方法或交互方式选择各种统计方法，适合统法或交互方式选择各种统计方法，适合统计专业人员使用。计专业人员使用。SPSS(statisticalpackageforthesocialseience),version
46、13,由美国由美国SPSS公司研制。公司研制。小学教育09中药药理实验方法学BMDP(biomedicalcomputerprograms)由美国由美国BMDP统计软机公统计软机公司研制，由多个功能模块组成，采用司研制，由多个功能模块组成，采用交互式，图形界面设计操作较直观，交互式，图形界面设计操作较直观，方便、较适宜于医学统计。方便、较适宜于医学统计。新药开发权威统计软件新药开发权威统计软件Drugandstatistics小学教育09中药药理实验方法学使用统计软件的注意事项使用统计软件的注意事项1.选择合适的方法选择合适的方法计量资料如符合正态分布，但方差不计量资料如符合正态分布，但方差不
47、齐时可通过数据转换，如取对数后再齐时可通过数据转换，如取对数后再进行方差分析。进行方差分析。2.论文中除说明采用的软件名称外，论文中除说明采用的软件名称外，需说明采用的方法。需说明采用的方法。 小学教育09中药药理实验方法学(五五)结论结论:经过统计分析，要有结论，要注意的是经过统计分析，要有结论，要注意的是:判断结果不能绝对化判断结果不能绝对化：例如，判断两例如，判断两组差别有无显著性时，一般按组差别有无显著性时，一般按P0.05而拒而拒绝绝“检验假设检验假设”。P0.05的意思是说，仅的意思是说，仅仅由于抽样误差造成如此大的差别的概率仅由于抽样误差造成如此大的差别的概率很小（很小（P0.0
48、5）而已，并不是说）而已，并不是说“检验假检验假设设”绝对不能成立，当然绝对不能成立，当然P越小越有理由拒越小越有理由拒绝绝“检验假设检验假设”。小学教育09中药药理实验方法学与专业知识相结合：与专业知识相结合：指的是即使指的是即使P0.05两者有显著差异，还要考虑专两者有显著差异，还要考虑专业知识方面有无意义。如降血压药，业知识方面有无意义。如降血压药，用后血压下降用后血压下降5mmHg，P0.05，但，但是这个药还是没什么应用价值。是这个药还是没什么应用价值。又如抗肿瘤药，用药组较对照组对小又如抗肿瘤药，用药组较对照组对小鼠实体瘤重抑制率为鼠实体瘤重抑制率为20，P0.05,但从专业角度来看，对瘤重增长抑制但从专业角度来看，对瘤重增长抑制仅仅30%并无明显实用价值。并无明显实用价值。小学教育09中药药理实验方法学
