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1、医学微生物实验本科实验医学微生物实验本科实验三细菌致病性及病原性球三细菌致病性及病原性球菌菌主要内容:主要内容:上次实验结果观察上次实验结果观察细菌生化反应结果分析细菌生化反应结果分析细菌的致病作用细菌的致病作用病原性球菌形态及培养特性病原性球菌形态及培养特性细菌生化反应结果分析细菌生化反应结果分析 吲哚试验吲哚试验 (史氏痢菌、乙型副伤寒)史氏痢菌、乙型副伤寒)蛋蛋蛋蛋白白白白胨胨胨胨水水水水史氏痢菌史氏痢菌吲哚试剂吲哚试剂玫玫玫玫瑰瑰瑰瑰吲吲吲吲哚哚哚哚细菌的致病作用细菌的致病作用细菌的毒力物质细菌的毒力物质1、 侵袭力侵袭力 菌体结构菌体结构 侵袭性物质侵袭性物质2、毒、毒 素素 内毒素
2、内毒素 外毒素外毒素细菌的侵袭力的构成细菌的侵袭力的构成1、菌体表面结构、菌体表面结构 荚膜荚膜 微荚膜及糖萼微荚膜及糖萼 菌毛或非菌毛粘附素菌毛或非菌毛粘附素2、侵袭性物质、侵袭性物质 侵袭性蛋白侵袭性蛋白及及侵袭性酶类侵袭性酶类细菌所产生的毒素细菌所产生的毒素1、 外毒素:外毒素: 主要由主要由G+菌产生的能分泌到菌产生的能分泌到菌体外的具有毒性的蛋白质。菌体外的具有毒性的蛋白质。2、内毒素:、内毒素: G-菌细胞壁脂多糖成份,菌菌细胞壁脂多糖成份,菌体裂解后释放出。体裂解后释放出。内毒素与外毒素的比较内毒素与外毒素的比较种类种类种类种类 内毒素内毒素内毒素内毒素 外毒素外毒素外毒素外毒素
3、来源来源来源来源革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阴性菌革兰阳性菌部及分革兰阴性菌革兰阳性菌部及分革兰阴性菌革兰阳性菌部及分革兰阴性菌革兰阳性菌部及分革兰阴性菌存在部位存在部位存在部位存在部位细胞壁成分、细菌裂解释出细胞壁成分、细菌裂解释出细胞壁成分、细菌裂解释出细胞壁成分、细菌裂解释出活菌分泌或细菌溶解散出活菌分泌或细菌溶解散出活菌分泌或细菌溶解散出活菌分泌或细菌溶解散出化学成分化学成分化学成分化学成分脂多糖脂多糖脂多糖脂多糖蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质稳定性稳定性稳定性稳定性好、好、好、好、160160 2-4 2-4h h 破坏破坏破坏破坏差、差、差、差、60-8060-80 30 30mi
4、n min 破坏破坏破坏破坏毒性作用毒性作用毒性作用毒性作用弱弱弱弱、各各各各种种种种内内内内毒毒毒毒素素素素作作作作用用用用大大大大致致致致相相相相同同同同,引起休克,发热,引起休克,发热,引起休克,发热,引起休克,发热,DICDIC等等等等强、对机体组织器官有选择性,强、对机体组织器官有选择性,强、对机体组织器官有选择性,强、对机体组织器官有选择性,引起特殊临床表现引起特殊临床表现引起特殊临床表现引起特殊临床表现抗原性抗原性抗原性抗原性弱,能刺激机体形成抗体,弱,能刺激机体形成抗体,弱,能刺激机体形成抗体,弱,能刺激机体形成抗体,但无中和作用。但无中和作用。但无中和作用。但无中和作用。甲醛
5、处理后不能形成类毒素甲醛处理后不能形成类毒素甲醛处理后不能形成类毒素甲醛处理后不能形成类毒素强,能刺激机体形成抗毒素,强,能刺激机体形成抗毒素,强,能刺激机体形成抗毒素,强,能刺激机体形成抗毒素,经甲醛脱毒后能形成类毒素经甲醛脱毒后能形成类毒素经甲醛脱毒后能形成类毒素经甲醛脱毒后能形成类毒素细菌致病作用的实验内容细菌致病作用的实验内容肺炎球菌荚膜观察肺炎球菌荚膜观察血浆凝固酶实验血浆凝固酶实验内毒素发热反应内毒素发热反应外毒素的毒性作用外毒素的毒性作用试管法试管法 玻片法玻片法肺炎球菌荚膜的观察肺炎球菌荚膜的观察荚膜的致病作用荚膜的致病作用抗吞噬作用抗吞噬作用粘附作用粘附作用抗有害物质损伤作用
6、抗有害物质损伤作用血浆凝固酶血浆凝固酶是致病性葡萄球菌产生的一是致病性葡萄球菌产生的一种侵袭性物质种侵袭性物质具有抗吞噬作用及血清中杀具有抗吞噬作用及血清中杀菌物质对细菌的杀灭作用菌物质对细菌的杀灭作用使感染局灶化。使感染局灶化。血浆凝固酶的种类及检测方法血浆凝固酶的种类及检测方法游离血浆凝固酶游离血浆凝固酶 试管法检测试管法检测结合血浆凝固酶结合血浆凝固酶 玻片法检测玻片法检测内毒素的发热试验内毒素的发热试验试验动物试验动物 :家兔家兔 (正常正常体温范围体温范围 38.5-39.5)菌液菌液 : 加热杀死的伤寒加热杀死的伤寒杆菌培养液杆菌培养液结果观察:结果观察:注射前后体温的变化注射前后
7、体温的变化注意事项注意事项 :体温计使用体温计使用内毒素检测方法内毒素检测方法鲎试验鲎试验试剂:试剂:鲎试剂鲎试剂 内毒素、生理盐水内毒素、生理盐水 试验结果观察:试验结果观察: 鲎试验鲎试验(+):出现凝固:出现凝固外毒素的毒性作用外毒素的毒性作用实验试剂:实验试剂:破伤风杆菌培养物破伤风杆菌培养物 破伤风抗毒素破伤风抗毒素 实验动物:实验动物:小白鼠小白鼠 试验结果观察:试验结果观察: 细菌培养物细菌培养物小鼠强直性痉挛小鼠强直性痉挛病原性球菌病原性球菌常见病原性球菌的种类常见病原性球菌的种类 革兰阳性球菌革兰阳性球菌 葡萄球菌葡萄球菌 链球菌链球菌 肺炎球菌肺炎球菌革兰阴性球菌革兰阴性球
8、菌 淋球菌淋球菌 脑膜炎球菌脑膜炎球菌病原性球菌的生物学特点病原性球菌的生物学特点 镜下镜下 培养培养 毒力及鉴别实验毒力及鉴别实验毒力及鉴别实验毒力及鉴别实验葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌 G G+葡萄葡萄葡萄葡萄 色素色素色素色素 血浆凝固酶血浆凝固酶血浆凝固酶血浆凝固酶 串样串样串样串样 完全溶血完全溶血完全溶血完全溶血链球菌链球菌链球菌链球菌 G G+链状链状链状链状 甲链甲链甲链甲链 不完全溶血不完全溶血不完全溶血不完全溶血 条件致病菌条件致病菌条件致病菌条件致病菌 乙链乙链乙链乙链 完全溶血完全溶血完全溶血完全溶血 致病菌致病菌致病菌致病菌 丙链丙链丙链丙链 不溶血不溶血不溶血不
9、溶血 不致病不致病不致病不致病肺炎球菌肺炎球菌肺炎球菌肺炎球菌 G G+成双成双成双成双 不完全溶血不完全溶血不完全溶血不完全溶血 胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 胞外胞外胞外胞外 、荚膜、荚膜、荚膜、荚膜 镜下镜下 培养培养 毒力及鉴别实验毒力及鉴别实验毒力及鉴别实验毒力及鉴别实验脑膜炎脑膜炎脑膜炎脑膜炎 G G- -成双成双成双成双 巧克力平板巧克力平板巧克力平板巧克力平板球菌球菌球菌球菌 胞内胞内胞内胞内 COCO2 2淋球菌淋球菌淋球菌淋球菌 G G- -成双成双成双成双 巧克力平板巧克力平板巧克力平板巧克力平板 胞内胞内胞内胞内 COCO2 2细菌检测及鉴定常用方法细菌检测及鉴定常用方法镜检(镜检( G+球菌)球菌)培养(培养( G+球菌)球菌)生化反应(生化反应( G-杆菌)杆菌)血清学诊断血清学诊断动物实验动物实验核酸诊断等快速诊断核酸诊断等快速诊断病原性球菌实验内容病原性球菌实验内容病原性球菌的形态观察病原性球菌的形态观察 葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌病原性球菌的培养特性病原性球菌的培养特性 普通平板菌落形态的观察普通平板菌落形态的观察 血平板上溶血特性的观察血平板上溶血特性的观察金黄色葡萄球菌血平板金黄色葡萄球菌血平板乙型溶血性链球菌血平板乙型溶血性链球菌血平板