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1、ICS 11.020C 59WS中华人民共和国卫生行业标准WS 2692019代替WS 2692007布鲁氏菌病诊断Diagnosis for brucellosis2019-01-02 发布2019-07-01 实施WS 2692019中华人民共和国国家卫生健康委员会发布前言 本标准第6章为强制性条款，其余为推荐性条款。本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准代替WS 2692007布鲁氏菌病诊断标准。本标准与WS 2692007相比，主要技术变化如下：增加了规范性引用文件（见第2章）； 增加了缩略语（见第3章）；增加了胶体金免疫层析试验（见4.3.1.2、附录C.2）；增加
2、了酶联免疫吸附试验（见4.3.1.3、附录C.3）；增加了布鲁氏菌培养物涂片革兰染色检出疑似布鲁氏菌（见4.3.1.4） 修订了诊断原则，增加了临床诊断（见第5章和6.2）；增加了布鲁氏菌的培养，血培养仪培养布鲁氏菌的方法（见D.1和D.1.1）；修订了布鲁氏菌的培养中双相血培养瓶培养布鲁氏菌方法（见D.1.2）；修订了布鲁氏菌的培养中病理材料培养布鲁氏菌培养方法（见D.1.3）；增加了布鲁氏菌的鉴定及相关具体试验（见D.2）；增加了布鲁氏菌的核酸检测及 BCSP31聚合酶链式反应（见D.2.5和 D.2.5.1）；增加了 AMOS聚合酶链式反应（见D.2.5.2）；增加了布鲁氏菌基因组DNA
3、提取操作方法（见D.2.6）；增加了布鲁氏菌实验生物安全要求（见D.3）；删除了平板凝集试验（PAT）（见2007年版的C.1.1）；删除了皮肤过敏试验（见2007年版的C.2）；删除了布鲁氏菌培养的接种未受精鸡卵法（见2007年版的C.3.1.2）；删除了布鲁氏菌培养的尿液培养法（见2007年版的C.3.2）；删除了血培养的生物学分离布氏菌法（见2007年版的C.3.4）。本标准起草单位：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、北京地坛医院、 中国疾病预防控制中心鼠疫布氏菌病预防控制基地、山西省疾病预防控制中 心、辽宁省疾病预防控制中心、湖北省疾病预防控制中心、内蒙古自治区综 合疾病预防控制中
4、心、杭州市疾病预防控制中心、青海省地方病预防控制所。 本标准主要起草人：崔步云、李兴旺、王大力、姜海、张秋香、毛玲玲、程 均福、米景川、徐卫民、徐立青、田国忠、刘熹。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：WS 2692007。布鲁氏菌病诊断1范围本标准规定了人间布鲁氏菌病的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。 本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其医务人员对布鲁氏菌病 的诊断。2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅 注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种
5、或样本运输管理规定卫生 部令第45号2005年人间传染的病原微生物名录卫生部(卫科教发200615号)危险品航空安全运输技术细则国际民航组织(Doc 9284号文件)3缩略语下列缩略语适用于本文件。CFT：补体结合试验(complement fixation test)DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid)dNTPs:脱氧核苷三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate)ELISA：酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay)GICA:胶体金免疫层析试验(gold immunochromatog
6、raphy assay)PBS：磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline)PCR:聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)RBT:虎红平板凝集试验(rose bengal plate agglutination test)RTD：常规试验稀释度（routine test dilution）SAT :试管凝集试验（serum aggl utination test）4诊断依据4.1流行病学史发病前病人与疑似布鲁氏菌感染的家畜、畜产品有密切接触史，或生食 过牛、羊乳及肉制品，或生活在布鲁氏菌病疫区；或从事布鲁氏菌培养、检 测或布鲁氏菌疫苗生产、使用等
7、工作。其他流行病学参见附录A。4.2临床表现4.2.1出现持续数日乃至数周发热（包括低热） ，多汗，乏力，肌肉和关节 疼痛等。4.2.2部分患者淋巴结、肝、脾和睾丸肿大，少数患者可出现各种各样的皮 疹和黄疸；急慢性期患者可以表现为骨关节系统损害。具体临床表现参见附 录B。4. 3实验室检査（实验方法见附录C、附录D）4.3.1实验室初筛4.3.1.1虎红平板凝集试验（RBT）结果为阳性。4.3.1.2胶体金免疫层析试验（GICA）结果为阳性。4.3.1.3酶联免疫吸附试验（ELISA）结果为阳性。4.3.1.4布鲁氏菌培养物涂片革兰染色检出疑似布鲁氏菌。4.3.2实验室确诊4.3.2.1从病人
8、血液、骨髓、其他体液及排泄物等任一种病理材料培养物中 分离到布鲁氏菌。4.3.2.2试管凝集试验（SAT）滴度为1:100+及以上，或者患者病程持续一 年以上且仍有临床症状者滴度为1:50+及以上。4.3.2.3补体结合试验（CFT）滴度为1:10+及以上。4.3.2.4抗人免疫球蛋白试验（Coomb s）滴度为1:400+及以上。 5诊断原则布鲁氏菌病的发生、发展和转归比较复杂，其临床表现多种多样，很难 以某一种症状来确定诊断。对布鲁氏菌病的诊断，应结合病人流行病学接触史、临床表现和实验室 检查等情况综合判断。6诊断6.1疑似病例符合4.1，并同时符合4.2。6.2临床诊断病例符合疑似病例并
9、同时符合4.3.1中任一项。6.3确诊病例符合疑似或临床诊断病例并同时符合4.3.2中任一项。6.4隐性感染符合4.1，并同时符合4.3.2中任一项，且不符合4.2。7. 鉴别诊断主要应与风湿热、伤寒、副伤寒、结核病、风湿性关节炎、脊柱炎、脑 膜炎、睾丸炎等疾病鉴别诊断,具体参见附录E。附录A （资料性附录）布鲁氏菌病流行病学A. 1布鲁氏菌病布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属的细菌侵入机体，引起的人兽共患的传染 - 变态反应性疾病。A. 2贮存宿主及传染源布鲁氏菌的贮存宿主很多，已知有60多种动物（家畜、家禽、野生动物、 驯化动物）可以作为布鲁氏菌贮存宿主。布鲁氏菌病往往先在家畜或野生动 物中传播，随
10、后波及人类，是人畜共患的传染病。疫畜是布鲁氏菌病的主要 传染源，我国大部分地区以羊作为主要传染源，有些地方牛是传染源，南方 个别省份的猪可作为传染源。鹿和犬等经济动物也可成为传染源。A. 3传播途径及传播因子病原体可以通过体表皮肤黏膜、消化道、呼吸道侵入机体。人的感染途 径与职业、饮食、生活习惯有关。含有布鲁氏菌的各种污染物及食物均可成为传播媒介，主要有病畜流产 物、病畜的乳、肉、内脏，被布鲁氏菌污染的皮毛、水、土壤、尘埃等。A. 4易感人群人类对布鲁氏菌普遍易感。人群布鲁氏菌病感染率与传染源和传播媒介 密切接触的机会、程度有关。布鲁氏菌病患者可以重复感染布鲁氏菌。A. 5分布A. 5.1职业
11、有明显的职业性，凡与病畜、染菌畜产品接触多者发病率高。农民、牧 民、兽医、皮毛和乳、肉加工人员及相关实验人员感染率比一般人高。A. 5.2性别人对布鲁氏菌易感，无性别差异，主要取决于接触机会多少。A53年龄各年龄组均可感染发病。由于青壮年是主要劳动力，接触病畜频繁，因 而感染率比其他年龄组高。A. 5.4季节一年四季各月均可发病。羊种布鲁氏菌流行区有明显的季节性高峰。我 国北方农牧区人群发病高峰在4月5月，夏季剪羊毛和乳肉食品增多，也可 出现一个小的发病高峰。牛种、猪种布鲁氏菌的布鲁氏菌病季节性不明显。A. 5.5地区布鲁氏菌病感染率在农牧区高于城镇，农牧区人与家畜接触频繁，感染 机会多，城市
12、病人则多集中在一些皮毛乳肉加工企业。A. 6不同疫区的流行特点A. 61羊种布鲁氏菌疫区羊种布鲁氏菌疫区的主要传染源是病羊。羊种布鲁氏菌 1、2、3生物型 对人、畜均有较强的侵袭力和致病力，易引起人、畜间布鲁氏菌病暴发流行， 疫情重。大多出现典型的临床症状和体征。A.62牛种布鲁氏菌疫区牛种布鲁氏菌疫区的主要传染源是病牛。牛种布鲁氏菌生物型较多，毒 力不一。就总体而言，牛种布鲁氏菌毒力较弱，但有较强的侵袭力，即使是 弱毒株，也可使牛发生暴发性流产或不孕，严重影响畜牧业发展。但对人致 病较轻，感染率高而发病率低，呈散发性。临床症状和体征多不典型，病程 短，后遗症较少。A.6. 3猪种布鲁氏菌疫区
13、猪种布鲁氏菌疫区主要传染源是病猪。通常由猪种1型和猪种3型布鲁氏 菌致病，毒力介于羊种布鲁氏菌和牛种布鲁氏菌之间。同一生物型菌株，既 有强毒株，也有弱毒株。猪种布鲁氏菌对猪致病力强，对羊、牛致病力较弱。 对人致病力比牛种布鲁氏菌强，除少数病例病情较重外，大多数无急性期临 床表现。A.64犬种布鲁氏菌疫区 犬种布鲁氏菌疫区主要传染源是病犬。犬种布鲁氏菌除了侵袭犬，引起 犬流产外，也可使猫、牛、猪、兔、梅花鹿、鼠等动物感染，产生抗犬种布 鲁氏菌抗体。人也可被感染，鲜有发病。A. 65混合型布鲁氏菌疫区2种或2种以上布鲁氏菌同时在一个疫区存在，这与羊、牛同在一个牧场 放牧或圈舍邻近有关。由于彼此接触
14、密切，不同菌种可以发生转移，从羊种 布鲁氏菌转移到牛多见，也有羊种布鲁氏菌转移到猪；猪种、牛种布鲁氏菌 也可转移到羊。混合型疫区流行特点取决于当地存在的主要菌种。附录B （资料性附录）布鲁氏菌病临床表现B. 1主要症状B. 1.1发热是布鲁氏菌病常见的临床表现，典型病例表现为波状热，常伴有寒战等 症状，可见于各期患者。部分病例可表现为低热和不规则热型，且多发生在 午后或夜间。布鲁氏菌病患者在高热时神志清醒，痛苦较小，但体温下降时自觉症状 加重，这种高热与病况相矛盾的现象为布鲁氏菌病所特有。B. 1.2多汗 是布鲁氏菌病常见的临床表现，急性期病例出汗尤重，体温下降时加重， 可湿透衣裤、被褥，使患
15、者感到紧张和烦躁。B. 1.3肌肉和关节疼痛 是布鲁氏菌病常见的临床表现，为全身肌肉和多发性、游走性大关节疼 痛。一些病例还可有脊柱（腰椎为主）骨关节受累，表现为疼痛、畸形和功 能障碍等。B. 1.4乏力几乎全部病例都有乏力疲劳的表现。B15其他少数病例可有头痛、心、肾及神经系统受累的表现。B2主要体征B. 2.1肝、脾及淋巴结肿大多见于急性期病例，肝、脾肿大的患者恢复较慢。B22其他男性病例可伴有睾丸炎，女性病例可见卵巢炎。急性期患者可以出现各 种各样的皮疹，一些患者可以出现黄疸，慢性期患者表现为骨关节系统的损 害。B. 3临床分期B. 3.1急性期具有上述临床表现，病程在3个月以内，出现确诊的血清学阳性反应。B. 3.2亚急性期具有上述临床表现，病程在3个月6个月之间，出现确诊的血清学阳性 反应。B. 3.3慢性
