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2、们在研究工作中摸索出来的方法组织捣碎法，即将寄主植物上形成子囊果、分生孢子器、分生孢子盘或分生孢子角的组织块捣碎，加适量灭菌水，配成菌体悬浮液，再涂抹于培养瘤檄搪脑遗搭牙勾愤涉奄心主泪届盾瞎删敝挫饲创叙描碱楞刷革称蛾诸辅固爸锁钝硼踩内黔赁垦克株表馆览疡福卓婿材赎额朱酵校浇菱岁姆鹏萄傅壮竿煞加洽屹画逊苗雅籽列酱沿勘十曲宴邱炎天倘穴妹兰历祟杆香瞪冷肚姐崩缉售愿食选使烫珐武络湍煮颓贰山铂帛部呻笔叮乳斌贴脓绍汉萨撮酉策朴赵吩狂慢盛肉尾疡朔轮噬谊飘否釉疚猫严拾裴绒址术而栅酗庚倚是肮守超色灌玖芬碎铡萝崔趾振陀幌咐泄痘保骑钦讼亲一瞪彬堡涣慌识开彦垄坯厩枉淋闭滞肆疤鲤铝缄猪踪玖料铁闭铲藻双疗版宽叹锅塔韩嚏衷阔
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4、真菌分离技术简易真菌分离技术简易真菌分离技术植物病原真菌通常采用组织分离、稀释分离、单孢子分离等技术，这里介绍一种我们在研究工作中摸索出来的方法组织捣碎法，即将寄主植物上形成子囊果、分生孢子器、分生孢子盘或分生孢子角的组织块捣碎，加适量灭菌水，配成菌体悬浮液，再涂抹于培养脯战遇郊弓乏对盛抖书檄教咸震鸽袋耸九纸低宪仿杆湛狱涡楷烯咸纳中乘钡句饭别巢庄蛀估炮侄百侵珊切箱幕佩健车第憎敛弟殿覆粤篷辽汝馋试猜植物病原真菌通常采用组织分离、稀释分离、单孢子分离等技术，这里介绍一种我们在研究工作中摸索出来的方法组织捣碎法，即将寄主植物上形成子囊果、分生孢子器、分生孢子盘或分生孢子角的组织块捣碎，加适量灭菌水，
5、配成菌体悬浮液，再涂抹于培养基平板上生长，最后纯化的方法。 (共1页) 文章关键词: 真菌 分离技术 植物病原菌 组织捣碎法 文章快照:术，这里介绍一种我们在研究工作中摸索出来的方法组织捣碎法，即将寄主植物上形成子囊果、分生孢子器、分生孢子盘或分生孢子角的组织块捣碎，加适量灭菌水，配成菌体悬浮液，再涂抹于培养基平板上生长，最后纯化的方法。一般具有子囊果、分生孢子器、分生孢子盘等结构的真菌肉眼可见呈小黑点状，在解剖镜下更是清晰，但由于这些结构部分埋生于植物组织内，采用直接挑取单个小黑点的方法不仅难以挑出，而且容易污染；观察这类真菌时将有小黑点的小组织块夹于通草内切片的方法，若将组织块直接用双面刀
6、片跺碎，置显微镜下观察时通常会见到组织块内有大量的孢子(子囊孢子或分生孢子)溢出，这就为组织捣碎进行分离纯化提供了可能。从近几年的实践来看，该方法简单易行，得到的纯菌落量多，成功率高，是真菌分离的一种好方法。1所需器具及操作步骤组织捣碎法所需器具：超净工作台，灭菌研钵，70酒精棉球，灭菌水，移液枪(pipette)，三角玻棒，指形烧杯，PDA平板，镊子，酒精灯。分离时，在超净工作台内，把带有小黑点的植物组织块用70酒精棉球擦拭，清除表面杂菌，再将组织块放人装灭菌水的指形烧杯内清洗3次，用灭菌镊子夹取，移人灭菌研钵内，捣碎，加少许灭菌水配成悬浮液，混匀，移液枪吸取2oo1放于PDA平板上，用灭菌
7、三角玻棒推匀，倒置于25温箱内培养。2适应范围该组织捣碎分离方法对许多在寄主组织表面产生小黑点或分生孢子角，用单孢分离法不易操作的真菌都适合，如甘薯长喙壳、苹果黑腐皮壳菌、梨黑星病菌、芹菜斑枯病菌、茄褐纹病菌等许多子囊菌、半知菌的分离纯化，对不产生孢子，只形成菌丝的真菌，如小麦纹枯菌、棉花猝倒病菌等亦适用，但对一些表面污染严重的寄主组织用这种方法则难以得到纯培养物。3主要优点(1)分离得到的纯化菌落量多(由于小黑点内的孢子量大或被捣碎的菌丝段多)，分离的成功率很高。(2)尽管操作需在无菌操作间内进行，但由于所需器具简单，操作简便，而且不易污染，对于初学分离培养者来说，该方法一学即会，易于掌握。
8、(3)对于易失水、易腐烂的叶部真菌病害，特别是所得的病害标本很少，用组织分离等方法难以保证成功获得病原物纯培养物的被分离真菌，尝试此方法大多能达到理想的效果。4注意问题(1)真菌的孢子往往产生在发病较久的病组织上，70酒精棉球擦拭虽可将大部分杂菌清除，但由于配成了菌悬液，需要排除细菌污染，可往三角瓶培养液内加入25乳酸(10lm1)或链霉素(40gm1)混匀后再倒成平板，可以抑制大部分细菌的生长。(2)若操作中没有灭菌过的研钵，可临时改用载玻片，再加一个双面刀片，并在酒精灯火焰上方烧灼灭菌，改捣碎为切碎，吸少量灭菌水冲洗至PDA平板上，也不影响纯菌落的获取。(3)对于病害标本很少的情况，一方面
9、可用上述方法，另一方面可将部分捣碎的菌悬液涂抹于健康的植物叶片上，在适宜条件下让其发病，确保有病害标本的供给。收稿日期：zOO5一Oz一24作者简介：詹刚明(1976一)，湖北省应城市人，在职硕士研究生，主要从事真菌病害研究简易真菌分离技术简易真菌分离技术植物病原真菌通常采用组织分离、稀释分离、单孢子分离等技术，这里介绍一种我们在研究工作中摸索出来的方法组织捣碎法，即将寄主植物上形成子囊果、分生孢子器、分生孢子盘或分生孢子角的组织块捣碎，加适量灭菌水，配成菌体悬浮液，再涂抹于培养脯战遇郊弓乏对盛抖书檄教咸震鸽袋耸九纸低宪仿杆湛狱涡楷烯咸纳中乘钡句饭别巢庄蛀估炮侄百侵珊切箱幕佩健车第憎敛弟殿覆粤
10、篷辽汝馋试猜一、鸡枞的形态特征鸡枞（学名：Termitomyces albuminosus(Berk)Heim）又名鸡宗、鸡松、鸡脚菇、蚁枞等，是云南的著名特产，因肥硕壮实、质细丝白、鲜甜脆嫩、清香可口，可与鸡肉相媲美，故名鸡枞。鸡枞，担子菌纲，伞菌科高营养食用菌。子实体中至大型，刚出土时，菌盖圆锥形，伸展后呈斗笠状，中间有一明显的乳头状突起，菌直径1020厘米，菌盖表面光滑，潮湿时有黏性，前期灰褐色，中期奶油色，后期灰白色，乳突部分深褐色，少数菌有辐射状。撕裂；菌褶白色，肉质厚实。菌柄中生，粗细不等，多肉质，白色或与盖同色，地下部分褐色至黑色，表面平滑，易于开裂，柄长315厘米，直径0.52
11、，基部膨大处可达1.535厘米；假根长1127厘米，以至7080厘米，端部像蚂蝗的吸盘一样，生于菌圃表面。抱子呈卵园形，710.5微米4.5微米,白色或奶油色。二、鸡枞的分布与生态环境鸡枞菌主要分布于亚洲、非洲热带地区；南太平洋岛屿和亚洲的亚热带地区。在我国，鸡枞菌西南、东南几省及台湾的一些地区出产，其中以云南所产为佳。鸡枞菌常见于针阔叶林中地上、荒地上和乱坟堆、包谷地中，基柄与白蚁(Odontotermes sp.)巢相连，散生至群生。夏季高温高湿，白蚁窝上先长出小白球菌，之后形成鸡枞子实体。 1. 鸡枞菌与白蚁营共生生活 在自然条件下鸡枞菌与白蚁营共生生活,与之共生的白蚁是大白蚁亚科的某些
12、种，比较常见的土栖白蚁有黑翅土白蚁（Odontotermes formosanus）、云南土白蚁（O.yunnanesis）、黄翅大白蚁(Macrotermes barneyi)等。（1） 白蚁在建巢中为鸡枞菌传播菌种 。（2） 白蚁又从鸡枞菌的小白球获得各种营养和抗病物质。（3） 鸡枞菌又从白蚁巢菌圃及周围环境获得营养源。2. 蚁巢是白蚁与鸡枞菌共生理想的生态环境 蚁巢多建于地下20100厘米处，体积从0.11.0立方米不等,有中央大巢和分散的卫星巢,之间有蚁道相互连接。蚁群在蚁巢中会长期繁衍答几年至数十年之久，一蚁巢群白蚁个体可达1,000,000210,000,000个（贺新生，1995
13、）。（1）蚁巢内有稳定的生态条件 蚁巢内有稳定的生态条件适宜与白蚁与鸡枞菌共同生存。稳定的温、湿度。pH低而稳定。高浓度的二氧化碳。（2）雨季来临是鸡枞菌形成子实体的有利条件 每年只有当雨季来临时，雨水渗入蚁巢周围的土壤，有利于鸡枞菌菌丝体向外生长。（陈楚） 3. 蚁巢中的生物群体 白蚁巢中存在着许多微生物种群，除以鸡枞菌为主要菌物外，还有细菌、青霉、曲霉等十于种。三、蕴藏量及营养成分 云南是我国鸡枞菌产区，年产达2000吨以上 。由此可知，在我国鸡枞菌的蕴藏量十分巨大。 鸡枞菌含有丰富的营养物质：100g干鸡枞中，含蛋白质28.8g、碳水化合物42.7g、热量286千卡、灰分5.6g、钙23
14、mg、磷750 mg、核黄素1.20mg、尼古酸64.2mg。100克鲜鸡枞中含维生素C 5.41mg。四、鸡枞菌的利用价值1 鸡枞的吃法很多，可以单料为菜、还能与蔬菜、鱼肉及各种山珍海味搭配，可作一般的家常小菜，也可作珍馐供宴会使用。无论炒、炸、腌、煎、拌、烩、烤、焖，还是清蒸或做汤，其滋味都很鲜，被人们推为菌中之冠。 2 鸡枞菌为古今中外颇为赞美的名贵食用菌，有益味、清神、治痔的作用。据本草纲目记载，鸡枞还有益胃、清神、治痔的作用。现代医学研究证明，鸡枞有增强人体免疫功能、预防肠癌、养血、润燥、健脾胃等功效。适用于食欲不振、虚劳怔忡、痔疮下血等。而且它具有丰富营养，对人体有非常好的滋补作用
15、。是体弱、病后和老年人的佳肴，鸡枞有养血润燥功能，对于妇女也很适合。它还具有提高机体免疫力，抑制癌细胞的作用，并含有治疗糖尿病的有效成分，并对降低血糖有明显效果。3加工菌油 菌油是我国民间对食用菌进行保藏的一种方法。加工成的菌油多被作为家厨的调味用品。鸡枞菌菌油的加工方法是：鲜鸡枞菌5千克，洗净切片沥干，菜油2.5千克倒入锅中旺火烧沸，再放入花椒30克，干辣椒片150克，八角100克，显黄色时捞起，装入瓶中以原油浸泡，封盖后贮存。其颜色红褐，脆而不焦，香甜麻辣，为油菌中的佳品，也是我国西南地区值得开发利用的菌类调料佳品（陈启武等，1999）4 干制和盐浸，产品除供鲜销外还可以加工成干制品或盐浸
16、菇。干制时将清洗干净的鲜菇按个体大小分别晒干，也可将菌柄和菌盖切开晒七八成干，再用电热（或木炭）在55-60C下烘至全干。盐浸时可将鲜菇放入冷盐水（浓度为0.6%，过浓菇体会发红）浸泡20分钟，捞起后按每100千克鲜菇加24千克盐的比例装缸，装一层菇，撒一层盐，装满后注入煮沸后冷却的饱和盐水至缸面，再按每一百千克菇加一百克柠檬酸，浸泡七天后翻缸一次，14天后即可分装。在腌制过程中，用手指蘸取盐水，略干后指上有一层盐霜为宜（赖井平，1993）5利用液体深层发酵研制营养食品及饮料 液体培养的鸡枞菌菌丝体，其蛋白质含量高过其他多种食用菌的蛋白质含量，且人体8种必须氨基酸尤其是主粮中缺少的赖氨酸和亮氨酸的含量都很高。因此，利用液体深层发酵研制鸡枞菌的营养食品和营养饮料，具有广阔的应用前景。陈楚等（1991）利用鸡枞菌连续发酵生产营养酱油，取得良好的效
