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1、 本科毕业论文题 目:贵州两种苦丁茶黄酮含量及抗氧化活性比较 院 系： 食品与制药工程学院 专 业: 制 药 工 程 姓 名： 朱万江 学 号： 指导教师： 刘 莹 教师职称: 讲 师 填写日期:22X年 5月 8 日郑 重 声 明本人所呈交的学位论文，是在指导老师的悉心指导下，独立进行实验研究工作所取得的成果，所有的实验数据、图片资料真实可靠。尽我所知,除了文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含他人享有著作权的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体,均已在文中以明确的方式标明。本学位论文的知识产权归属于培养单位。本人签名: 日期: 摘 要黄酮是一类化合物的总称,
2、它具有抑菌、抗炎、抗肿瘤、抗IV、抗氧化、抗肿瘤等功效。在木姜子植物中，生物碱、黄酮类、甾体、木质素、内脂、挥发油等在医学研究上比较常用。黄酮易溶于乙醇等有机溶剂，根据相似相容原理,本实验采用乙醇热回流提法提贵州遵义余庆大叶苦丁茶和遵义余庆小叶苦丁茶(eaf f chinese holly ）中的总黄酮，以芦丁为对照品,以黄酮提取率和抗氧化活性进行试验,在试验的基础上通过测出贵州遵义余庆大叶苦丁茶和小叶苦丁茶黄酮含量的关键词：苦丁茶；回流提取，黄酮含量，抗氧化活性ATRAlavonods are a clss ofcompunds， whihhaeantibateril, nti-inlamm
3、or, antumor,ani HI， antioxidtn, ati-uor effec. Ithe pat， t laloi, flavooids,teroids, lignn， inernfat, vlatile oil nd so on emmnly used in medical esrchlvonoids olul in rgnic sentuch asetanl, accrdingto thsimaritrinciple of mptility，th expeimet f extractng tseaGuzhouby ethanol extrcti(Litseacuea （ou.
4、) Prs) totl favonods, rutin, he extracti rteof flavonoi as idex,ethanol conenrtin， sidliquid rtio, extractintmpeature ingle ato test extractio im s faco, th orthoonl testto investitethe effectof ethanolcncntraton, extaction time,extacton tempeature an solid-lqud ratioon th xraion rat f flavooids on
5、te basis of snle fctor est, naly through th ortogoal test te optimum extato conditions of total flanoids in Guizhosriea. UV iible sptopotetry wa sd to detemin h onnt of tot favnids he xtract ofginger adginger. he freradicl scaenging at offlavonoidswas etermed by DPHeadial saeging rate. Th eslts were
6、asflows: te opti permntcnditon wa 70% ehanolas extractan， heratio f aterial to liudwa :20, ad 2H as etrate t atemperature of 7 DE C, the extracon te wa p o .252%， dtheatoidnt activity as ut7.Key wods: itsea； flvnoids;reluextrctio; anioidat activiy;目 录1 文献综述4概述45研究现状55662 绪论8研究目的及意义888设计内容及思路8研究内容8设计
7、思路9原料预处理9含量测定93 实验部分10实验材料1实验仪器及主要试剂仪器设备10主要实验试剂10主要试剂的配制10试验方法1标准曲线的绘制11对照品溶液的配制11标准曲线的制备1提取方法研究11提取溶剂11料液比12提取温度1212提取溶剂1料液比12提取温度提取参数优化13134结果与讨论1提取方法研究结果1提取影响因素研究结果15不同乙醇浓度对提取过程的影响1不同料液比对提取过程的影响1不同提取温度对提取过程的影响提取参数优化结果18的含量分析结果25结论21论文取得的成果1不足之处21展望21参考文献22致谢21 文献综述11 苦丁茶苦丁茶(Rubs creaus Mq. cowea
8、nus)（Rosc）悬钩子属（Rubus Linn)多年生灌木,是药食两用植物。苦丁茶味甘、酸、性温，富含多种营养成分,具有较高的营养价值1。插苦丁茶果实、根、叶均可入药,具有补肾固精、平肝明目、活血止血、祛风除湿、明目、除湿解毒等功效，主治阳痿、不孕、目生翳障、风湿痹痛、跌打损伤、骨折、月经不调等疾病。插苦丁茶中含有插苦丁茶甙2、覆盆子甙3、黄酮4等多种生物活性物质。黄酮类化合物具有清除血栓、降血压、降血脂、促进脑部、心脏的血液循环等功效5，可用于治疗冠状动脉硬化、预防血液疾病等，可抑制肿瘤、消除体内自由基延缓衰老，可作为天然色素、甜味剂等食品添加剂。黄酮类化合物的提取方法主要有:有机抗氧化
9、活性提取法、微波提取法、超声波提取法、碱性稀醇或碱性水提取法和酶法等7-1。微波提取法设备较贵，超声波提取法提取率相对较低,碱性稀醇或碱性水提取法影响因素较多,酶法试剂相对较贵。与其它方法相比,有机抗氧化活性回流提取法,提取率高，设备简单，试剂较便宜，影响回流提取的因素少,可操控性强,更容易实现从试验室到工厂化生产。Lscome等7在研究尿路上皮细胞肿瘤发现正常尿路上皮组织中不表达苦丁茶黄酮类活性成分，但是随着肿瘤病理分级的增高，E-adherin表达会减少而苦丁茶黄酮类活性成分表达会增加,证实了钙黏蛋白转换在肿瘤进展过程中起关键作用，可以作为肿瘤进展及预后的一种标志物。Jgi18等对44例抗
10、氧化活性标本进行检测,结果显示苦丁茶黄酮类活性成分阳性率为%,且肿瘤Gleason gre级别越高,苦丁茶黄酮类活性成分阳性率越高。N - cdherin 的反常表达使得它可以成为检测侵袭性抗氧化活性的生物标记物。1.2 苦丁茶的功效苦丁茶是具有多种保健功效的药用资源。目前人们对苦丁茶的认识还远远不够,其应用主要还停留在冲泡直饮方面,药用价值方面的利用还不够。苦丁茶中黄酮类化合物具有抗菌 、消炎、清热解毒、镇静 、利尿等作用外7，它是大多数氧自由基的清除剂,对冠心病、心绞痛等疾病的治疗效果显著 。苦丁茶及其提取物具有降低血压、调节血脂、改善心脑血管的血液循环、杀菌消炎等诸多功效8，是一种具有良
11、好开发利用前景的饮用植物。苦丁茶实际上是一类代茶用植物的统称，目前市场上销售的苦丁茶制成品有大叶苦丁茶和小叶苦丁茶之分,两者的原植物品种有较大差异。特别是抗自由基和抗癌 、防癌的作用 ,使黄酮类化合物的研究进入了一个新的阶段9黄酮类化合物安全、无毒, 在医药 、食品加工等方面已被广泛应用。在苦丁茶植物资源、化学组成、药理作用等方面的研究已经取得了一些进展，但是在不同品种的苦丁茶化学成分对比、化学成分与药理作用的关联研究等方面的研究报导甚少10。黄酮类化合是广泛分布于各种植物的一类次生代谢产物，是药用植物的主要活性成分之一11。苦丁茶是我国南部及西南部民间的传统饮品,具有有利祛湿、消炎退热、清心
12、明目、提神醒脑的功效8。苦丁茶的植物来源可以分为冬青科冬青属（Iex）和木犀科女贞属（)，其中冬青属的植物有冬青Nex kuingca. J Tseng、大叶冬青I. ltolia Tun、枸骨I. orn Lindl. et par.等12。而木犀科来源的苦丁茶多见于我国南部及西南部地区，原植物有紫茎L.puprascns Y 、丽叶女贞、女贞、粗壮女贞.等1。经学者考证,贵州产苦丁茶的原植物以女贞属植物粗壮女贞为主14。苦丁茶中含有萜类、黄酮类、多酚类、苯丙素类、挥发油等多种化学成分15。黄酮类物质是一类广泛存在于植物中的多酚类化合物，具有多种生物活性功能，如抗氧化、抗菌抗炎、抗病毒、抗过
13、敏、以及血管舒张作用,还具有抑制脂质过氧化等作用16。由于黄酮类化合物种类繁多且结构复杂，并具有抗菌消炎、抗氧化、消除人体自由基、抗癌、调节心血管系统、内分泌系统、免疫系统等多种明确的药理作用，一直以来都是国内外研究的热点。苦丁茶中包括黄酮苷和苷元的总黄酮已成为判定苦丁茶产品质量的标志性物质。由于苦丁茶日常主要用水泡服， 苦丁茶水泡液中的黄酮应以亲水性黄酮苷为主， 但目前常用于提取苦丁茶总黄酮的方法为9%乙醇回流提取2次1 ,得到总黄酮后，计算出两种苦丁茶总黄酮含量,比较它们黄酮含量差异,用PH法测定两种苦丁茶中总黄酮的抗氧化活性得到结论。研究同时发现,采用现行的黄酮含量分析方法，贵州大叶苦丁茶叶中的黄酮含量比贵州小叶苦丁茶含量多，差距不是太大8。产生这种差别的原因尚有待深入研究，但作者推测,产生的主要原因是品种的差异,本实验中，采用紫外分光
