尿酸(UA) 酶比色法.doc

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1、项 目尿酸(UA)方 法酶比色法目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比,再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较,经过计算可求出血清中尿酸的含量。试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响,测定尿酸

2、所用的酶反应如下:尿酸酶尿酸 O2 2H2O - 尿囊素 CO2 2H2O2过氧化物酶H2O24-氨基安替比林 2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸-醌亚胺H2O2标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟,

3、一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。2.3 抗凝剂:血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。2.4 标本处理:血标本室温放置30min45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8保存。3试剂3.1 试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:组 成R1:R2=4:1(混合后溶液的浓度)R1:检测试剂1Good”S缓冲液0.1mmol/L3,5-DHBS1.2mmol/LR2:检测试剂2URO500KU/LPOD5.0KU/L4-AAP1.10mmol

4、/L尿酸标准液: 590umol/L 3.2 尿酸校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次:空白定标:每日需做试剂空白定标。全点定标:试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围,需要全点定标。3.3 试剂与校准血清的稳定性:原包装试剂储存在2-8至标签所示失效日期。试剂开瓶后,在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22稳定28天,试剂应避免污染。试剂R1, R2颜色为无色,当试剂变色,按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8储存至标签所示失效日期,复溶后-20保存,可稳定一个月,只可冻融一次,避免反复冻融。参见校准血清说明书。试剂盒配备的水标准液在2-8储

5、存至标签所示失效日期,开瓶后2-8储存避免污染,可稳定2个月。4仪器KONELAB 30型号仪器。性能:波长505nm,仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5操作样品为血清或肝素抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附,附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作,见仪器操作规程。6计算A测定C = C oA标准式中: c 测定尿酸浓度,mol/L; A = A2 - A1A测定 标本管吸光度; A标准 标准管吸光度;CO 校准血清尿酸浓度,mol/L;7操作性能7.1 精密度:批内CV8.3%,批间CV10.0%。7.2 准确度:检测结果的相对不准确度10%。7.3 灵敏度:尿

6、酸浓度为:330mol /L时,显色吸光度为0.1230.134。7.4 可报告范围:样本:R1:R2 =1:40:10时,测定上限为1180mol /L。7.5 特异性:测量值在给定值的95%-105范围内。7.6 干扰:内源性干扰物为Hb 1000mg/ml、TG 2000mg/ml、BIL 30mg/ml、VitC 300mg/ml对测试结果无明显影响。8参考值男:210430mol /L;女:150360mol /L。9临床意义尿酸是核酸中嘌呤分解代谢的最终产物,由肾脏排泄,随尿液排出体外。肾脏疾病如急慢性肾炎、肾结石、痛风、以及体内核酸分解代谢过盛的疾病,如慢性白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等可使尿酸量增高;而恶性贫血及应用ACTH、皮质素、阿斯匹林等药物时,血中尿酸量下降。附录A: 参数

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