《石蜡切片制作流程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《石蜡切片制作流程（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、石蜡切片制作流程表一. 取材1, 样品要求：长，宽各1cm左右，厚不超过5mm2, 固定液：10%福尔马林固定液或4%多聚甲醛：组织块=20:1为宜3，固定时间：依大小而定，一般3-5h即可，如24h或更长，应密封瓶口，封前换液4,修块二. 脱水1，水洗：将固定组织块放入广口瓶，瓶口用纱布包好，置流水下水洗，水洗时间依固定时 间而定，一般12h以上，固定时间越长水洗时间越长。2，脱水1) 75%酒精1h2) 80%酒精1h3)95%酒精I1h4) 95%酒精I1h5) 100%酒精I1h6) 100%酒精I1h组织块在进入下一阶段梯度酒精前要用吸水纸吸干水，尤其在95%酒精（II）中进入100
2、% 酒精（I）中，切记防止带入水分，所有过程要在瓶口加盖，防止水分进入。三.透明1）酒精（100%）：二甲苯=1：110min2）二甲苯I透明10min3二甲苯II10min四.浸蜡1）二甲苯：石蜡=1：130min温箱5658C2）石蜡 I1h温箱5658C3)石蜡II1h温箱5658C4）石蜡 m1h温箱5658C温度保持在56-58C，温度太高会烧坏组织块，太低石蜡会凝固。五. 包埋首先在金属框架上涂抹凡士林，以保证石蜡到入后不会外溢。将包埋用石蜡及浸蜡组织块放 在有石棉网的电炉上保温。在框架中先倒入少许包埋用石蜡，再用镊子将组织块迅速移入框 架，再倒入石蜡，待完全凝固后取出待用。六.
3、切片和烘片（烘片温度38C）七. 附贴（45C）；烤片（一）附贴（45C）附贴液的配制：新鲜蛋白20ml，麝香草酚少许，用玻璃棒混匀，再加入甘油20ml,继续 混匀。若有多聚懒氨酸处理的切片则直接用之。（二）烤片：温箱内的温度应保持在40-45 C之间，烤片时间至少1小时。八.H. E染色（一）脱蜡1二甲苯 I（脱蜡）10min2二甲苯 II（脱蜡）10min3100%酒精I（脱二甲苯）10min4100%酒精II（脱二甲苯）10min595%酒精I（脱二甲苯）5 min695%酒精II（脱二甲苯）5 min780%酒精（脱二甲苯）5 min8自来水或蒸馏水洗（去酒精）5 min（二）染色1苏木素染液6 min2冲洗清水（兰化）15 min3酸水分化视情况而定10-20S4冲洗淡蓝色即可20 min5伊红染液视情况而定6 min（三）脱水，透明1380%酒精颜色淡化1495%酒精 I5min1595%酒精 I5 min16100%酒精I5min17100%酒精II10min18二甲苯 I（透明）5min19二甲苯 I（透明）10min封片：用中性树胶将切片标本封固。九.
