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1、目录摘要 1关键词 1引言 11材料与方法 11.1实验材料和仪器 2材料和试剂 2主要仪器与设备 21.2野生大豆成分的测定方法 2粗蛋白的测定 2粗脂肪的测定 2粗纤维的测定 2总黄酮的测定 2总糖的测定 2钙的测定 2铜，镁的测定 2锌的测定 2总游离氨基酸的测定 2氨基酸组成的测定 2脂肪酸组成的测定 22结果与分析 32.1蛋白质、粗脂肪、粗纤维、总糖、钙的测定结果 3总黄酮的测定结果 32.3游离氨基酸总量的测定结果 42.4锌、铜、镁含量的测定结果 42.5脂肪酸组成的测定结果 62.6氨基酸组成的测定结果 63讨论 73.1蛋白质，粗脂肪，粗纤维的含量与其他大豆品种的差异 73
2、.2钙，镁，锌，铜离子的含量与其他大豆品种的差异 73.3总异黄酮的含量与其他大豆品种的差异 73.4总糖的含量与其他大豆品种的差异 73.5脂肪酸的组成与其他大豆品种的差异 83.6氨基酸的组成与其他大豆品种的差异 83.7测定大豆成分的主要影响因素 94结论 9致谢 10参考文献 10五河野生大豆的主要成分分析摘要：本研究测定了五河野生大豆的主要成分，通过国标法和其他等方法测定了野生大豆中的粗脂肪、粗蛋白、总异黄酮、总游离氨基酸、总糖、粗纤维、钙、锌、铜、镁的含量，同时分析了其脂肪酸和氨基酸组成。实验结果明确：该野生大豆的蛋白质含量为38.92%,脂肪含量为16.94%,粗纤维含量为4.1
3、%,总糖含量为10.14%,钙的含量为357mg/100g，总异黄酮的含量为0.13%，总游离氨基酸含量为 960.2mg/100g,微量元素锌、铜、镁的含量分别为3.73mg/100g、4.14mg/100g 和 59.02mg/100g。关键词：五河野生大豆；主要成分；脂肪酸组成；氨基酸组成；总异黄酮引言野生大豆（）是栽培大豆的祖先种，具有高蛋白、多抗、广适应性和繁殖系数高等特 性，野生大豆蛋白质含量高，引起国内外学者的普通关注1。1980年以来，我国科研工作 者在全国野生大豆考察、搜集的根底上，对野生大豆蛋白质含量、氨基酸组成、蛋白组 份等方面进展多学科、多层次、大样本、较为全面的综合研
4、究，取得重要进展，某些方面处于世界领先水平。早先在我国十几个省区都生长有野生大豆，因过度开荒、放牧、修水利等原因，面积不断减少，致使现存有保护价值的区域仅某某、某某与我省五河县三 处。我国政府为保证野生豆种有足够的群体，防止基因漂移，确保遗传资源的延续，指令 抢救性保护好国内现存三处野生大豆（Gly cinesoja） 就地保护区，其中五河县就是指令 建立的保护点之一2 O根据中国野生大豆资源目录的测定数据统计，在我国现已鉴定入库的6172份野生大豆资源中，蛋白质含量最高的为55.70%,最低的有29.04%,平均含量是44.90%,明显 高于全国栽培大豆蛋白质含量的平均值。我国野生大豆蛋白质
5、含量超过50%勺种质有387份，占入库总份数的6.32%;其中东北地区有322份（某某省为222份）占全国野生大豆蛋白 质含量50沖上份数的83.2%.以平均值统计，我国野生大豆蛋白质含量最高的省区是某 某省和某某省，分别为47.9%和47.8%;蛋白质含量最低的省区是某某回族自治区，为 38.6%。我国野生大豆中百粒重小于215g的典型野生大豆的蛋白质平均含量为 45.59%,脂 肪平均含量为9.2%。百粒重在2.515.0g的半野生大豆I型的蛋白质平均含量为 44.58%, 脂肪平均含量为13.01%;百粒重大于5.1g的半野生大豆U型的蛋白质平均含量为 43.96%, 脂肪平均含量为15
6、.23%,野生大豆的脂肪含量与经度呈显著的负相关，从西到东,脂肪含 量逐渐下降3。一般来讲，在一定X围内，野生大豆的脂肪含量随着气温的降低而增加，随 着昼夜温差的增大而上升，随着日照时数的增加而提高。野生大豆的脂肪含量与百粒重 呈显著的正相关O利用实验室可行的条件，用国标法，原子吸收法，分光光度法等方法测定了野生大豆 的主要成分，野生大豆中的粗蛋白质，粗脂肪,总游离氨基酸的含量都较高，这些有利性 状不仅能应用于栽培大豆的育种程序中，增加大豆的遗传多样性，拓宽大豆的遗传根底， 而且随着分子生物学研究的飞速开展和基因工程技术研究的突飞猛进，作为拥有多花多荚、繁殖系数高、产量性状突出、高蛋白 、抗病
7、抗逆性强等众多优良性状的野生大 豆还可以作为优良的基因源被越来越广泛地应用于各种作物的育种中9。通过测定五河野生大豆的成分为研究大豆种质资源提供了前提。1材料和实验方法材料和试剂原料：五河野生大豆每粒重量小于 2克试剂：氢氧化钾、浓硝酸化学纯硫酸铜、硫酸钾、亚硫酸钠、浓硫酸、盐酸、 硼酸、甲基红、溴甲酚、氢氧化钠、无水乙醇、无水乙醚、硝酸铝、硝酸钠、卢丁、亚 甲基蓝、酒石酸钾钠、亚铁氰化钾、乙酸锌、冰乙酸、葡萄糖、钙红、硫化钠、柠檬酸 钠、碳酸钙、乙二胺四乙酸二钠、锌粒、铜片、镁条、氯化铁、茚三酮、正丙醇、正丁 醇、乙二醇、乙酸钠、亮氨酸、异丙醇、抗坏血酸、二硫腙、四氯化碳、盐酸羟胺、氨 水、
8、酚红、硫代硫酸钠分析纯 主要仪器与设备FA-2004电子天平某某精科天平厂、标准检验筛某某上虞市金鼎标准筛制厂- 数显恒温水浴锅HH-6国华电器某某、F80型高速粉碎机金坛市金城国胜实验仪器 厂、KDN-08A定氮仪某某新嘉电子某某、KDN-8智能化加热炉某某新嘉电子某某、 SZF-06I粗脂肪测定仪某某新嘉电子某某、SHB-川循环水式多用真空泵（某某长城科 技工贸某某）、722N分光光度计（某某精科）、SX2系列箱式电阻炉某某阳光实验仪器 某某1200L气相色谱串联质谱联用仪瓦里安公司Waters600高效液相色谱仪Waters公司粗蛋白的测定：凯氏定氮法粗脂肪的测定：索氏抽提法 粗纤维的测
9、定： 总黄酮的测定：分光光度法10黄酮类化合物与铝离子可生成有色络合物，该络合物在510nm波长下有强的光吸收, 吸收强度与络合物浓度成正比。总糖的测定：直接测定法11样品经处理除去蛋白质等杂质后，参加稀盐酸在加热条件下使蔗糖水解转化为复原 糖,再以直接滴定法测定水解后样品中复原糖的总量。钙的测定：铜，镁的测定：锌的测定：总游离氨基酸的测定：茚三酮溶液显色法11氨基酸与茚三酮共热时，能定量的生成二酮茚胺，该产物显蓝紫色，其吸收峰在 570nm处，而且在一定X围内吸光度与氨基酸浓度成正比。氨基酸组成的测定：高效液相色谱法氨基酸自动分析仪11。高效液相色谱别离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和
10、固定相间的分配系 数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其中的两相间进展反复屡次的分 配吸附一脱附一放出由于固定相对各种组分的吸附能力不同即保存作用不同， 因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此别离，顺序离开色 谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。 脂肪酸组成的测定：GC/GS-M法11。脂肪酸的测定用气相色谱-质谱联用法，气相色谱gas chromatography, GC丨是- 种应用非常广泛的别离手段，它是以惰性气体作为流动相的柱色谱法，其别离原理是基 于样品中的组分在两相间分配上的差异，别离出各组分，然后用用在线的
11、质谱仪联用技 术，质谱仪能将离子源产生的离子按质荷比m/z的不同，在空间位置、时间的先后或 轨道的稳定与否进展别离，以得到按质荷比大小顺序排列的质谱图测定出不同组分。2结果与分析2.1粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、总糖、钙的测定结果大豆蛋白是一种优质营养源蛋白。 蛋白质是人类生长，发育和繁衍的根底物质之一 大豆蛋白中氨基酸含量丰富，含8种人体必需氨基酸，且含有较多的赖氨酸。摄入大豆蛋 白可以使体内的蛋白质维持正常水平，同时限制了脂肪的摄入水平，有利于调节肥胖症 患者的膳食结构和营养平衡，有利于预防肥胖症12。大豆粗蛋白含量是重要的检测指标。称取三份样品，在消化炉上参加浓硫酸消化至蓝绿色澄清透明后，
12、用凯氏定氮仪处 理,然后用经标定的盐酸滴定,测得粗蛋白质含量为38.92%。2.12粗脂肪的测定结果脂肪是动植物食品中的重要的营养成分，也是人体的重要营养物质之一，还是工业 的重要原料。所以测定食品中脂肪含量，对评定食品的品质和营养价值具有重要意义。称取三份2g左右的样品，用滤纸包好后在粗脂肪测定仪抽提出脂肪，然后枯燥称 重，计算得粗脂肪含量为16.94%2.13粗纤维的测定结果粗纤维中营养含量较少，而且不易消化，很长时间以来，人们都认为它对健康没什么 作用，但后来人们发现粗纤维能够对肥胖、高血脂、糖尿病等这些病起到一定的预防和 治疗作用，可降低血糖和胆固醇，所以研究人员在测定食品成分的时候都
13、会测定它的含 量。现用酸碱法测定粗纤维含量，称取三份样品，用酸碱处理后，烘干，计算得粗纤维含 量为4.1%。2.14总糖含量的测定结果用稀盐酸在加热条件下使蔗糖水解转化为复原糖，再以直接滴定法测定总糖含量， 测得总糖含量为10.14%。称取三份重量接近的样品,经过灰化用酸溶解然后定容到 50ml,用钙标定EDTA后, 再用DETA滴定样品，经计算得钙的含量为357mg/100近年来,大豆异黄酮的保健功能在国内外越来越受到人们的重视。大豆异黄酮具有 弱的雌激素样作用，有多种保健作用。在国外，西方医学界普遍认为，亚洲妇女患乳腺癌 和心血管疾病的几率明显小于欧美洲妇女，这与她们饮食中经常摄入富含大豆
14、异黄酮的 豆制品有很大关系。它能防治乳腺癌，预防骨质疏松症，缓解更年期综合症，预防心血管 等其它疾病等作用。所以人们对食品中的异黄酮含量越来越重视12。黄酮类化合物与铝离子可生成有色络合物，该络合物在510 nm波长下有强吸收光，称取210mg卢丁用30%L醇定容到100ml,分别取此水稀释液0, 0.5, 1, 1.5, 2，2.5， 3ml于10ml容量瓶中，制作标准曲线，如图1,称取样品定容容到100ml,取10ml于25ml 容量瓶中，测得吸光值为0.516,样品中异黄酮的含量为0.13%。+吸光值线性（吸光值）图1异黄酮的标准曲线Figure 1 isoflavones standa
15、rd curvey.吸光值；x.浓度用亮氨酸作为标准品,配制5ug/ml氨基氮标准液，分别吸取0, 0.2 , 0.4,0.6,0.8 , 1ml的标准液于25ml的容量瓶中，测定吸光度制作标准曲线，如图2。称取样品100g。图2亮氨酸的标准曲线Figure 2 Free amino acidsstandard curvey.吸光值；x.浓度*吸光值线性（吸光值）、铜、镁含量的测定结果用锌粉配制成浓度分别为 0, 0.01，0.02，0.03，0.04，0.05PPM的锌标准溶液各 10ml，用原子吸收法制作标准曲线，如图3。100g。图3锌的标准曲线Figure 3 Zinc stan dard curvey.吸光值；x.浓度*吸光值线性（吸光值）配制浓度分别为0, 0.5,1,1.5,2,2.5PPM的铜标准溶液各25ml,用原子吸收法制作标准曲线，如图4。100g。4 3 20 0 0值光吸y = 0.1711X + 0.0002 R = 0.9
