《MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程》由会员分享，可在线阅读，更多相关《MOS-450 圆二色光谱扫描操作规程（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、MOS-450圆二色光谱扫描操作规程1. 测量波长小于210nm，需要对仪器进行氮气吹扫处理。打开氮气，调整流量 计流速为16.6L/min,通氮气几分钟。确认ALX-250的电源线插在氙灯的位 置，并且氙灯已对准光路，具体操作见光源的选择操作说明。然后打开 ALX-250光源开关，将氮气流量计流速设为6.6L/min，预热15分钟后，查看 ALX-250面板显示，微调旋钮，将功率确定在150W，光源准备完毕。2. 测量波长大于210nm如果无需氮气吹扫，直接打开ALX-250电源，等待功 率稳定在150W后进行下一步操作。3. 在第一步骤中打开ALX-250的同时，打开MM-450和PMS-
2、450电源，预热15分钟。4.将装有待测样品空白溶液（如水或缓冲盐）的石英池放入样品仓，盖上盖子,（所用的石英池必须经过彻底的清洗，如有残留物将显著干扰测试结果）。5点击电脑桌面上的图标，进入BioKine软件操作主界面。6.点击图1主界面的Device/Scanning Spectrometer，进入光谱扫描界面，如图2。Lim I/ (acquit*图1图27. 在要测量波长的范围内取一个波长数值，输入到图2下方的Ex处，点击Enter 键。这时确认汨理按钮变为,然后点击曲，自动调整HV电压，然 后再点击汕心按钮，锁定此电压值。8. 点击主界面上方的皿联血気3按钮，选择光谱测量方法，如图3
3、。图3Acquisition mode:选择测量模式 CD。Begin(nm):扫描初始波长End(nm)：扫描结束波长Scan Repeat :扫描次数Acquisition duration:每个nm的测量持续时间，范围0.05s-20s。圆二色扫描推荐值20s，建议最小大于1 s。ShutterAutomatic mode:选择Always open，挡板处于始终打开的状态。PM gain*10：当在非常低的信号测量，可选择此项，进行信号的增益。CD parameters： CD的灵敏度，根据信号的振幅设置,有四个不同的选项，1000、300、100 和 30 mdeg。其他选项根据需要
4、可以选择。以上参数都设置好后，点击OK按钮，参数设置完成，回到主界面。9. 空白的测量点击图2主界面Blank spectum区域的Record按钮，记录第一步添加的空白 样品谱图，空白谱图显示在主界面中。测量后选择Subtract复选框，将在随 后的样品光谱的测量中扣除空白值。如点击save as可将空白谱保存下来。10. 样品的测量再点击九匕按钮，关闭挡板，取出样品池，将空白样品换成被测样品，然 后再放回到样品支架上，盖好样品仓盖。这时再点击 九匕，打开挡板。重 复之前的第七项步骤，如此时HV大于600V,或PMS-450红色小灯闪烁的 情况，需进行条件优化，如增大狭缝，减小光径，以及降低
5、样品浓度等操作。 如未出现PMS-450红色小灯闪烁的情况，则既可开始测试。点击图2主界 面Acquisition control区域的* I按钮，记录样品的圆二色谱图，此图谱已扣 除空白谱，显示在图2主界面中。11.谱图的数据处理第十步测量的谱图为样品圆二色原始测量图，需要经过数据处理，得到优化 的曲线图，操作如下：选择主界面Analysis菜单，这时界面变为分析界面，选择Tools菜单下的 Smoothing， Savitzky-Golay Smooth 命令，如图 4。图4点击Proceed按钮，这时经计算优化后的曲线出现在界面中。12保存数据选择主界面的File菜单下的Save As出
6、现图5界面。选择要保存文件到哪个文件夹，并给文件命名，选择Save As Text，然后点 击Save按钮，文件保存到指定的文件夹中。此文件可用txt格式打开。13.如果对圆二色数据需要进行蛋白质二级结构分析，进行如下操作：在BioKine软件中选择File菜单的Load data file命令，打开要进行分析的文件，然后选择File菜单的Exprot data to/Dicroprot file命令，如图6，导出数据文件为Dicroprot的文件。图6出现图7所示界面，选择导出数据要保存的文件夹并命名此导出数据，并根 据测量的具体情况填入相应的信息，点击Export按钮，数据导出结束，关闭图7界面。辖?齡懿禁户retired 2M9已江南大学DlcEQpful: pataineteiName ol pioteinLi中I path ImriilCnncefilialianNamefir G 24”Mumtei(n| 讪pj :器mL Mnfemlai jiaoaoExportDo&在http:/dicroprot-pbil.ibcp.fr网站上下载蛋白质二级结构分析软件，然后将 导出的数据在此软件中打开进行相应的二级结构分析。
