(新课标)高考生物大二轮专题复习 专题十五 生物技术实践(含解析)

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1、专题限时集训(十五) 专题十五 生物技术实践(时间:40分钟)1某校生物兴趣小组的同学对洞庭湖水体中的微生物种类进行了调查,并且分离出了一种能分解芦苇纤维素茎秆的细菌,对细菌培养后进行了计数,请据所学知识回答下列问题:(1)培养基中一般含有微生物生长所需的水、无机盐、_等;培养基灭菌时采用的方法是_,接种时要对接种环进行_。(2)从众多细菌中筛选出能分解芦苇纤维素的细菌,应选择以_的培养基,对芦苇纤维素分解菌计数时,常采用的方法是 _。(3)当芦苇纤维素分解菌数量较少时,可采用_增加其数量;在稀释度数为106倍下涂布了三个平板(每次取0.1 mL),统计菌落数分别为240、250、260,则稀

2、释前1 mL菌液中所含细菌数为_个。(4)获取芦苇纤维素分解菌后如要临时保存,可将其接种在_上,等长出菌落后放在_的冰箱中保存。2从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是采集菌样富集培养纯种分离性能测定。富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。(1)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养过程中,一定要注意在_条件下进行。(2)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。如培养纤维素分解菌的菌样应从_的环境中采集。(3)从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制_培养基,

3、该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的_。(4)经过梯度稀释后,要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是_,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_来筛选纤维素分解菌。某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是_。3图7151表示葡萄酒酿制的简单过程,请据图分析回答:(1)从图7151可知,甲图是为了使酵母菌进行_,以增加酵母菌的数量,乙图是为了使酵母菌_获得葡萄酒。最后,可以用_试剂检验是否有酒精生成。整个酿制过程一般将温度控制在1825 ,原因是_。 图7151(2)甲图中葡萄汁和白糖的混合液为酵母菌提供的营养成分有_。为

4、防止发酵液被污染,对使用的器具要_并晾干,并用_消毒。(3)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌时, 最常用的接种方法有_和_两种。接种后,培养基上会出现一些分别由一个酵母菌繁殖而成的菌落,在生态学上,这些菌落被称为_。(4)工业生产上为提高葡萄出汁率并使果汁变得澄清,生产中常需用到_。为了能反复利用酵母菌,需要将纯化后并经过繁殖培育得到的酵母菌与海藻酸钠溶液混合制成“凝胶珠”,这是使用_法来固定酵母细胞。4辣椒素是辣椒果实中普遍存在的一种生物碱,广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图7152所示。请回答下列问题: 图7152 (1)图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的_和_过程。(2

5、)图中所用的MS培养基主要成分应包括:大量元素、微量元素、有机物(如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、以及_等),还需要添加多种植物激素,如生长素和细胞分裂素。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。所用的培养基必须彻底灭菌,一般应采取的灭菌方法是_。(3)培养外植体的培养基一般是固体培养基,需要加入凝固剂_。并且,在培养获得辣椒脱毒苗的过程中,除无菌操作外,还需要注意pH、_、_等条件的控制。(4)图中第二条获得辣椒素途径:用酶解法将愈伤组织分离成单细胞,再选择高产细胞系进行培养。分散的细胞能快速增殖,提取的有效成分比从辣椒果实中提取更充分。酶解法用到的酶有

6、_酶和_酶。(5)辣椒素是一种斥水亲脂、易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂的化合物。可以采用_法提取辣椒素,该方法需要对原材料进行_,再用酒精、丙酮等浸泡,并利用_加热方法加热,加热瓶口安装回流冷凝装置,目的是_。通过过滤获得滤液,若要获得辣椒素结晶,还需再对滤液加热蒸发出有机溶剂,这时可以直接使用_装置进行。5孔雀石绿(C23H25N2Cl)常用作纺织业的染料,也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害,因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图7153所示。 图7153请分析并回答:(1)从到

7、的培养过程中,培养液应加入_作为唯一碳源,此过程的目的是_和_。(2)使用_法可以在上获得单个菌落。实验中使用的培养基可以用_灭菌法进行灭菌。(3)从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A,从生物进化的角度分析,这是_的结果。菌株A在生态系统成分中属于_。(4)研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响,实验结果如图7154所示。由上述结果可以看出,与不加金属离子的对照组相比,多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有_作用,唯有Pb2的作用相反。若要排除Pb2本身对孔雀石绿有降解作用,则应设置_的培养基样本作为对照。 图71546玫瑰被誉为“花中皇后”,玫瑰精油也是世界

8、上最贵的“液体黄金”。如图7155为玫瑰精油的实验流程,请分析回答: 图7155(1)玫瑰精油适合用_蒸馏法提取。在操作时可向蒸馏烧瓶中加入几片碎瓷片,目的是_。(2)为确保玫瑰精油的提取,应选择鲜玫瑰花与清水的比值是_。当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中影响精油提取量的主要因素有_和_。(3)油水混合物需加入_,以加速油水分层。分离的油层中还含有一定的水分,需加入_处理。(4)玫瑰精油的提取需大量原料,通常采用_技术实现玫瑰的快速繁殖。 7.有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用,长期以来因使用其量大、范围广,容易造成水体污染等诸多环境问题。(1)为了筛选甲胺磷的降解细菌,将农药

9、厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在_的固体培养基上进行培养,可以对降解菌进行定向的_。(2)在分离得到的菌株A中检测到的ophc2蛋白,可以催化甲胺磷的降解,这种蛋白质是在细胞的_上合成的。若要定量分析ophc2蛋白的催化能力,应测定单位时间内_。 (3)为了测定菌株A的降解效率,应配置0 mg/L、10 mg/L、30 mg/L、50 mg/L、70 mg/L的甲胺磷溶液,测定不同浓度甲胺磷溶液的吸光值,画出标准曲线,得到吸光值与甲胺磷浓度的关系:y0.02x0.01,如图7156所示。 图7156将含有100 mg/L甲胺磷的菌株A培养液分别在不同温度下培养5天后,测定吸光值,结果如下表所示,已

10、知降解率(初始甲胺磷浓度降解后甲胺磷浓度)/初始甲胺磷浓度,则取得的最大降解率为_(忽略细菌对吸光值的影响和培养液体积变化),若甲胺磷自身化学分解,则计算的降解率数值会_(填“偏大”“不变”或“偏小”)。 温度/152025303540吸光值(菌株A)1.711.531.150.491.321.89(4)继续分析细菌的16S rDNA可以鉴定种类,提取得到菌株A的DNA后,通过_扩增得到大量的16S rDNA,进而对细菌分类。 (5)导入ophc2基因的烟草可获得降解有机磷的能力,烟草花粉的遗传物质存在于细胞核和线粒体中,为了避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染,可将ophc2基因导入

11、烟草细胞的_中。专题限时集训(十五)1(1)碳源、氮源 高压蒸汽灭菌法 灼烧灭菌(2)芦苇纤维素作为唯一碳源 稀释涂布平板法(3)选择培养(扩大培养) 2.5109 (4)斜面固体培养基 4 解析 微生物的培养基成分有水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。灭菌方法有高压蒸汽灭菌法、灼烧灭菌法等,培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法、金属用具灭菌用灼烧灭菌法。(2)筛选分解芦苇纤维素的细菌,培养基中不能有除纤维素外的其他碳源。细菌计数可以先用稀释涂布平板法接种后再统计菌落数,然后计算细菌数。(3)增加细菌数量可采用选择培养基进一步扩大培养。三个平板平均每个有250个菌落,相当于稀释后每0.1 mL有细菌25

12、0个,则稀释前1 mL中有25010106个,即2.5109个。(4)菌种保存可以用斜面固体培养基,温度为4 冰箱中。2(1)高压蒸汽灭菌 无菌 (2)富含纤维素 (3)选择 碳源(4)刚果红 透明圈 菌液浓度过高(土壤溶液稀释不够)解析 本题以筛选菌株为情境考查培养基的配制、接种方法、无菌技术等知识点。解题关键:熟悉微生物操作的基本原理、基本技术和操作流程,明确无菌技术的要素。(1)按照微生物的需求配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌,取菌种的接种环要进行灼烧灭菌、操作要在酒精灯的火焰附近进行,培养要在无菌的恒温箱内。因此,全部的实验过程要在无菌条件下完成。(2)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖

13、的环境中寻找,故培养纤维素分解菌应从富含纤维素的环境中收集。(3)目的菌能够降解纤维素,故应向培养基中添加纤维素来制作选择性培养基筛选目的菌。纤维素是植物体内的多糖,被纤维素分解菌作用后可产生葡萄糖。(4)纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是菌液浓度过高(增大稀释倍数);或培养过程被杂菌污染(严格无菌操作);或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌(每划一个新区域前都要对接种环进行灭菌处理)等。3(1)有氧呼吸 发酵 重铬酸钾 这一温度最适合酵母菌生长和繁殖(2)碳源、氮源、水、无机盐和生长因子 清洗干净 体积分数为70%酒精(3)平板划线法 稀释涂布平板法 种群(4)果胶酶 包埋 解析 (1)甲图搅拌过程中,酵母菌有氧呼吸,能够释放较多的能量从而进行繁殖,因此酵母菌的

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