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1、本文格式为Word版，下载可任意编辑基因工程题库以及答案 一、填空题 1 基因工程是_年头进展起来的遗传学的一个分支学科。 2 基因工程的两个根本特点是： (1)_，(2)_。 3 基因克隆中三个根本要点是：_；_和_。 4 通过对比用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小 的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_。 5 限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原那么命名的，第一个大写字母取自_，其次、三两个字母取自_，第四个字母那么用_表示。 6片面酶切可采取的措施有：(1)_(2)_ (3)_等。 7第一个分开的限制性内切核酸酶是_；而第一个用于构
2、建重组体的限制性内切核酸酶是_。 8限制性内切核酸酶BsuRI和Hae的来源不同，但识别的序列都是_，它们属于_。 9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性： (1)_； (2)_的活性。 10为了防止DNA的自身环化，可用_去双链DNA_。 11EGTA是_离子螯合剂。 12测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_酶的活性，而没有_酶的活性。 13切口移位(nick translation)法标记DNA的根本原理在于利用_的_和_的作用。 14欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_或
3、_。 15反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有_的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的_水解掉。 16基因工程中有3种主要类型的载体： _、_、_。 17就克隆一个基因(DN*段)来说，最简朴的质粒载体也必需包括三个片面：_、_、_。另外，一个梦想的质粒载体务必具有低分子量。 18 一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一片面细胞中已测 不出质粒，这种现象叫 。 19 pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于 ，它的四环素抗性基 因来自于 ，它的氨苄青霉素抗性基因来自于 。 20YAC的最大容载才能是 ，BAC载体的最大容载才能是 。 21pSCl01是一种 复制的
4、质粒。 22pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和 两种质粒改造而来。它的复制子来自 ，Amp 抗性基因那么是来自 。 23噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的理由：一是 ； 二是 。 24 野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要理由是 和 。 25 黏粒(cosmid)是质粒噬菌体杂合载体，它的复制子来自 、COS位点序列来自 ，最大的克隆片段达成 kb。 26 野生型的l噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，理由是：(1) (2) (3) 。 27噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要布局是 ，而来自噬菌体的主要布局是 。 28l噬
5、菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DN*段后，总的长度应在噬菌体基 因组的 的范围内。 29 在分开DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。 30 用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc， 其目的是 。 31 引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。 32Clark察觉用Taq DNA聚合酶得到的PCR回响产物不是平末端，而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一察觉设计了克隆PCR产物的 。 33在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。 34乙醇沉淀DNA的原理是 。 3
6、5 假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，务必考虑其表达的三个根本条件： (1)_ (2)_ (3)_。 36 受体细胞的感受态是_。 37 DNA重组连接的方法大致分为四种：(1)_(2)_ (3)_(4)_。 38 将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个_，各种此类质 粒的集合体称之为构建了一个_。 39将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个_，源于同一批RNA制备 物的克隆群那么构建了一个_。 40只要知道基因组中某一特定区域的片面核苷酸组成，用_可以将这段DNA 举行百万倍的扩增。 41人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为_时吸附DNA, _时摄人DNA。 42目前，在重组体的
7、筛选中，已经进展了大量构思高明、具有极高切实性的筛选方法。 大致可以分为： (1)_(2)_(3)_ (4)_等。 43PCR扩增筛选重组体是对比简便的筛选方法，它适合于_。 44 核酸杂交探针可分为两大类： DNA探针和RNA探针。其中DNA探针又分为_ 探针和_探针。 45假设用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5突出的黏性末端，那么可以用_举行3末端标记。假设用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3突出的黏性末端，可以用_举行3末端标记。 46单链DNA探针的标记可以采用以下方法：(1)_ (2)_(3)_。 47根据Northern杂交的结果可以说明：_。 48差示杂交(differen
8、tial hybridization)技术需要_。 49RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开，然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜) 上，同一放射DNA探针杂交的技术称_。 50在_技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分开后，被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。 51可用T4 DNA聚合酶举行平末端的DNA标记，由于这种酶具有_和_的活性。 52根据外源片段供给的遗传表型筛选重组体，必需考虑三种因素： (1)_ (2)_(3)_。 53Northern印迹和Southern印迹有两点根本的识别： (1)_ (2)_。 54放射免疫筛选的原理基于以下三点： (1)_
9、(2)_ (3)_。 答案 170 2(1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达 3克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 4限制性酶切图谱 5属名的第一个字母；种名的前两个字母；株名 6(1)裁减酶量；(2)缩短回响时间；(3)增大回响体积 7EcoK；EcoRl 8GGCC；异源同工酶 9 枯草杆菌蛋白酶；(1)5-3合成酶的活性；(2)3-5外切核酸酶 10碱性磷酸酶；5端的磷酸基团 11 Ca2+ 12 5-3合成； 3-5外切 13 DNA聚合酶I：5一3外切核酸酶；5一3合成酶 14S1核酸酶切割；DNA聚合酶补平 15核酸水解酶H；RNA 16 质粒DNA；病毒DNA；质粒和
10、病毒DNA杂合体 17 复制区： 含有复制起点；选择标记： 主要是抗性基因；克隆位点： 便于外源DNA的插入 18 质粒消释(或治愈) 19， pMBl； pSCl01；pSF2124(R质粒) 20 1000kb；300kb 21. 严紧 22 pBR322和M13；pMBl；转座子 23 它在细菌中能够大量繁殖，这样有利于外源DNA的扩增；对某些噬菌体(如l噬菌)的遗传布局和功能研究得对比领会，其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得对比详尽 24 没有适合的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记 25质粒；l噬菌体； 45 26 (1)分子量大，(2)酶的多切点，(3)无选择标记 27复制区； IG区 2875105 29 螯合Mg2+离子，抑制核酸酶的活性 30 中和DNA分子的负电荷，增加DNA分子间的凝结力 31(1)合成探针；(2)合成cDNA；(3)用于PCR回响；(4)举行序列分析 32T载体 33其次链合成时形成的发夹环? 34乙醇使DNA分子脱水 35(1)保持正确的可读框 (2)能够使其转录的启动子 (3)具有翻译的起始和终止信号 36采纳外源DNA的生理状态 37(1)黏性末端连接； (2)平末端连接； (3)同聚物接尾连接； (4)接头连接法 38
