精选优质文档-----倾情为你奉上果蔬有机酸含量的测定植物材料中含有丰富的有机酸，如苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、草酸等利用酸碱滴定法测定果蔬中的可滴定酸含量，可以从风味及营养的角度衡量其品质重点：①碱式滴定管的调零、体积读数，容量瓶、移液管的正确使用；②邻苯二甲酸氢钾及有机酸样品的正确称取（差减法）；③有效数字的取舍及确定难点：滴定终点的判断及掌握一、实验目的1.学习强碱滴定弱酸的基本原理及指示剂的选择2.掌握NaOH的配制和标定方法以及基准物质的选择二、实验原理1.大多数有机酸是弱酸，如果某有机酸易溶于水，解离常数Ka>>10-7，用标准碱溶液可直接测其含量，反应产物为强碱弱酸盐滴定突跃范围在弱碱性内，可选用酚酞指示剂，滴定溶液由无色变为微红色即为终点2. NaOH标准溶液是采用间接配制法配制的，因此必须用基准物质标定其准确浓度邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），它易制得纯品，在空气中不吸水，容易保存，摩尔质量较大，是一种较好的基准物质，标定反应如下： 反应产物为二元弱碱，在水溶液中显微碱性，可选用酚酞作指示剂邻苯二甲酸氢钾通常在105-110℃下干燥2h后备用，干燥温度过高，则脱水成为邻苯二甲酸酐。
3. 在一定温度下，用蒸馏水或乙醇将植物材料中的有机酸浸提出来，用碱溶液滴定浸出液，即可计算出样品的可滴定酸含量果实中的有机酸含量如柑橘类可换算成柠檬酸、葡萄可换算成酒石酸，苹果类可换算成苹果酸表示二、仪器设备1. 天平 2. 250 mL三角瓶 3. 匀浆机（或研钵） 4. 恒温水浴锅 5. 低速离心机（或漏斗） 6. 50mL离心管（或定性滤纸） 7. 碱式滴定管 8. 100 mL容量瓶 9. 25mL移液管三、试剂1. 0.05 mol·L–1NaOH标准溶液：在天平上取约0.5g固体NaOH（可用干燥小烧杯称取），另用大量筒量取250mL去离子水（无CO2），倒少量水入装有NaOH固体的小烧杯中，搅拌使NaOH溶解后将其倒入试剂瓶中；再将大量筒中剩余的水倒入试剂瓶中，混匀以邻苯二甲酸氢钾（分析纯）标定其浓度：用万分之一的天平称取干燥过的邻苯二甲酸氢钾0.1250 g ~0.1500 g 3份，分别置250 mL 三角瓶中，用80 mL 无CO2水溶解，加酚酞指示剂2~3滴，用所配NaOH标准溶液滴定至微红色（大约15mL左右）依下式计算NaOH的准确浓度，求3份样品的平均值，结果保留至小数点后4位。
M = 式中 M —— NaOH标准溶液的浓度（mol·L–1）； W —— 邻苯二甲酸氢钾的重量（g）； V —— 滴定时所消耗NaOH溶液的体积（mL）； 0.2043 —— 每毫摩尔邻苯二甲酸氢钾的重量（g）2. 1%酚酞指示剂：称取1 g 酚酞，溶解于100 m L 70%~90%乙醇中四、实验内容1. 将新鲜组织用匀浆机匀浆，称取匀浆5g于50mL离心管中，将35mL左右蒸馏水加入50mL离心管，于80℃恒温水浴中浸提30 min ，其间不断摇匀或称取新鲜组织5g，至于研钵中迅速研成糊状，用50mL蒸馏水洗入250mL三角瓶中，加适量蒸馏水，于80℃恒温水浴中浸提30 min ，其间不断搅拌2.冷却后6000 r·min–1离心10~15 min，上清液用蒸馏水定容到100 mL（如材料为匀浆处理，且溶液色泽不影响滴定终点判断，亦可不离心冷却后直接定容到100 mL）或过滤，残渣用10~15 mL蒸馏水冲洗2~3次，合并滤液，定容至100mL3.取试液3份，每份25 mL ，分别置250 mL三角瓶中，各滴入酚酞指示剂2~3滴。
用NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色，即为终点记录NaOH的用量4.结果计算 总酸度 = *100%式中 V1 —— 样品提取液总体积（mL）； V2 —— 滴定时所取滤液体积（mL）；V —— 滴定时所消耗NaOH标准溶液的体积（mL）； N —— NaOH标准溶液的浓度（mol·L–1）； K —— 将总酸换算为特定有机酸的系数：苹果酸0.067、柠檬酸0.064、酒石酸0.075、乳酸0.090、草酸0.045 a —— 样品滴定前的稀释倍数； W —— 样品鲜重（g）五、数据记录表格实验内容消耗NaOH标准溶液体积（mL）结果计算一二三一二三平均值NaOH标准溶液标定样品总酸度测定六、注意事项1. 如样品中有机酸含量过高，应在滴定前适当稀释，计算时将稀释倍数带入公式2. 如果试液颜色较深，影响滴定终点的观察，应采用电位滴定法3. 一般果蔬中含酸量较少，利用0.1mol/L NaOH溶液进行滴定时，NaOH所消耗的体积较少，容易引起误差实操中，可以将NaOH适当稀释后使用例如用0.05mol/L甚至0.01mol/L的NaOH溶液进行滴定。
七、作业与思考1.园艺产品中的主要有机酸有哪些？计算时如何选择折算系数？2.对于颜色较深的样品，测定有机酸时终点不易观察，应如何处理？3.如果邻苯二甲酸氢钾未烘干，将使标准溶液浓度的标定结果偏高还是偏低？溶解邻苯二甲酸氢钾时加入80mL水，是用量筒量取，还是用移液管移取？为什么？专心---专注---专业。