精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业生物化学实验生物化学实验教案侯沁文侯沁文目目 录录精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验一 糖的颜色反应实验目的及要求实验目的及要求 1. 掌握莫式（Molisch）试验鉴定糖的原理和方法2. 掌握塞式（Seliwanoff）试验鉴定酮糖的原理和方法3. 掌握杜式(Tollen)试验鉴定酮糖的原理和方法实验原理实验原理1莫式试验：糖经无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与 -萘酚生成紫红色缩合物2塞式试验：酮糖在浓酸的作用下，脱水生成 5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应；有时亦同时产生棕红色沉淀，此沉淀溶于乙醇，成鲜红色溶液3杜式试验：戊糖在浓酸溶液中脱水生成糠醛，后者与间苯三酚结合成樱桃红色物质实验仪器及用品实验仪器及用品仪器：水浴锅器皿：吸管、试管实验药品：蔗糖、葡萄糖、淀粉、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、-萘酚、浓硫酸、95%乙醇、间苯二酚、盐酸、间苯三酚实验试剂实验试剂 莫式试剂：-萘酚 5g,溶于 95%乙醇并稀释至 100ml现用现配，并贮于棕色试剂瓶中。
塞式试剂：间苯二酚 50mg，溶于 100ml 盐酸（VH2O：VHCl=2:1），现用现配 杜式试剂：2%间苯三酚乙醇溶液（2g 间苯三酚溶于 100ml95%乙醇中）3ml,缓缓加入浓盐酸15ml 及蒸馏水 9ml临用时配制实验内容及步骤实验内容及步骤一、莫式实验于 4 支试管中，分别加入 1 ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在 1 ml 水中），然后各加莫式试剂 2 滴，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸 1.5 ml（切勿振摇！），硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现二、塞式试验于 4 支试管中，分别加入 0.5 ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%果糖溶液，然后各加塞式试剂 2.5ml，摇匀，同时置沸水浴内，比较各管颜色及红色出现的先后顺序 三、杜式试验精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业于 3 支试管中加入杜式试剂 1ml，再分别加入 1 滴 1%葡萄糖溶液、1%半乳糖溶液和 1%阿拉伯糖溶液，混匀将试管同时放入沸水浴中，观察颜色的变化，并记录颜色变化的时间四、实验现象记录仔细观察实验中的颜色变化，对于塞式试验和杜式试验还需记录下颜色变化的时间。
精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验二 糖的还原作用实验目的及要求实验目的及要求 掌握糖的还原反应来鉴定糖的原理和方法实验原理实验原理费林(Fehling)试剂和本尼迪(Benedict)试剂均为含 Cu2+的碱性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，其本身则被还原成红色或黄色的 Cu2O，此法常用作还原糖的定性或定量测定实验仪器及用品实验仪器及用品实验仪器：水浴锅实验器皿：吸管、试管实验试剂：硫酸酮、氢氧化钠、酒石酸钾钠、柠檬酸钠、无水碳酸钠、淀粉、蔗糖、葡萄糖实验试剂实验试剂1. 费林试剂试剂 A：CuSO45H2O 34.5 g,溶于蒸馏水并稀释至 500 ml试剂 B：氢氧化钠 125 g，酒石酸钾钠 137 g，溶于蒸馏水并稀释至 500 ml临用时将试剂 A 与试剂 B 等体积混合2. 本尼迪试剂：柠檬酸钠（Na3C6H3O711H2O）及 50 g 无水碳酸钠，溶于 400 ml 蒸馏水中另溶解 8.5 g 硫酸铜于 50 ml 热水中将硫酸铜溶液缓缓加入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌，如有沉淀可过滤此混合液可长期使用实验内容及步骤于 3 支试管中加入费林试剂 A 和 B 各 1 ml，混匀，分别加入 1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液和 1%淀粉溶液 1 ml，置沸水浴中加热数分钟，取出，冷却，观察各管的变化。
另取 3 支试管，分别加入 1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液和 1%淀粉溶液 1 ml，然后每支试管加本尼迪试剂 2 ml，置沸水浴中加热数分钟，取出，冷却，和上面结果比较精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验三 多糖的实验实验目的及要求实验目的及要求 1熟悉淀粉多糖的碘试验反应原理和方法2进一步了解淀粉的水解过程实验原理实验原理淀粉广泛分布于植物界，谷、果实、种子、块茎中含量丰富，工业用的淀粉主要来源于玉米、山芋、马铃薯本实验以马铃薯为原料，利用淀粉不溶或难溶于水的性质来制备淀粉淀粉遇碘呈蓝色，是由于碘被吸附在淀粉上，形成复合物，此复合物不稳定，极易被醇、氢氧化钠和加热等使颜色褪去，其他多糖与碘呈特异的颜色，此类呈色物质极不稳定淀粉在酸催化下加热，逐步水解成分子较小的糖，最后水解成葡萄糖实验仪器及用品实验仪器及用品器材：研钵、布氏漏斗、抽滤瓶、表面皿、白瓷板、胶头滴管、电炉、石棉网、纱布、试管、烧杯、吸管、量筒、试管夹试剂：碘化钾、碘、淀粉、氢氧化钠、本尼迪试剂，浓硫酸、碳酸钠实验内容及步骤实验内容及步骤一、马铃薯淀粉的制备将马铃薯去皮，在研钵中充分研碎，加水混合，用纱布过滤，除去粗颗粒，滤液中的淀粉很快沉到底部，多次用水洗淀粉，抽滤，滤饼放在表面皿上，在空气干燥中即得。
二、淀粉与碘的反应1置少量自制淀粉于白瓷板上，加 1-3 滴稀碘液（配制 2%碘化钾溶液，加入适量碘，使溶液呈淡黄棕色即可），观察颜色变化2取试管 1 支，加 0.1%淀粉 5 ml，再加 2 滴稀碘液，摇匀后，观察其颜色变化将管内液体分成 3 份，其中 1 份加热，观察颜色是否褪去冷却后，颜色是否全部恢复另 2 份加入乙醇或10%NaOH 溶液，观察颜色变化并解释之三、淀粉的水解反应在一小烧杯中加入 1%淀粉溶液 25 ml 及 20%硫酸 1 ml，放在石棉网上小火加热，微沸后每隔两分钟取出反应液 2 滴置于白瓷板上做碘试验与此同时另取反应液三滴，用 10%碳酸钠中和后，做本尼迪试验，记录试验结果并解释之精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验四 糖的旋光性和变旋现象实验目的及要求实验目的及要求1了解糖的变旋现象，掌握用糖的旋光性测定糖浓度的方法2学会使用旋光仪实验原理实验原理光是一种电磁波，光波振动的方向与光的前进方向垂直普通光的光波在各个不同的方向上振动但如果让它通过一个尼科尔(Nicol)棱镜（用冰洲石制成的棱镜），则透过棱镜的光就只在一个方向（偏振面）上振动，这种光就叫做平面偏振光。
偏振光能完全通过晶轴与其偏振面平行的尼科尔棱镜，而不能通过晶轴与其偏振面垂直的尼科尔棱镜当平面偏振光通过某种介质时，有的介质对偏振光没有作用，即透过介质的偏振光的偏振面保持不变而有的介质却能使偏振光的偏振面发生旋转这种能旋转偏振光的偏振面的性质叫做旋光性具有旋光性的物质叫做旋光性物质或光活性物质具有不对称结构的手性化合物都有旋光性精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业能使偏振光的偏振面向右旋的物质，叫做右旋物质；反之，叫做左旋物质通常用d（拉丁文 dextro 的缩写，右的意思）或+表示右旋；用l（拉丁文 laevo 的缩写，左的意思）或-表示左旋偏振光的偏振面被旋光物质所旋转的角度，叫做旋光度，用表示旋光度的大小不仅取决于物质的本性，还与溶液的浓度、液层的厚度、光的波长、测定温度以及溶剂的性质等等有关偏振光通过厚度为 1dm，浓度含有 1g/ml 的待测物质的溶液所测得的旋光度称为比旋光度，它是物质的一个特性常数，如下式所示：t=/cl式中 t：测定时的温度； ：测定时所用光源的波长； ：实测的旋光度； c：溶液的浓度（g/ml）； l：玻管的长度（dm）一个有旋光性的溶液放置后其比旋光度改变的现象称为变旋。
变旋的原因是糖从 -型变为 -型或由 -型变为 -型一切单糖都有变旋现象无 -，-型的糖类即无变旋性实验仪器及用品实验仪器及用品仪器：旋光仪、电子天平器皿：容量瓶、烧杯、玻棒试剂：未知浓度的蔗糖溶液、10%葡萄糖溶液实验内容及步骤实验内容及步骤一、利用糖的旋光性测定糖的浓度1转开样品管螺母，洗净玻管，然后向管中注满蒸馏水，盖上玻片，注意管中不能有气泡，玻片上的水渍必须擦干2把样品放入旋光仪内，打开电源，待钠光源稳定 1-2min 后，转动刻度盘，使目镜中两半圆的亮度相等，记下刻度盘的读书，以此为零点3用蔗糖代替蒸馏水测其旋光度，并按公式计算出蔗糖的浓度二、糖的变旋现象用新配制的 10%葡萄糖溶液按上法测其旋光度并计算比旋光度，以后每隔 2h 测定其旋光度，计算比旋光度直至比旋光度不再改变，说明 -，-型互变已达平衡精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验五 血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法）实验目的及要求实验目的及要求掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的原理和方法实验原理实验原理D-葡糖糖 D-葡萄糖酸+ H2O2 实验仪器及试剂实验仪器及试剂试管、移液管、UNICO-2000 型分光光度计、恒温水浴锅。
酶试剂：葡萄糖氧化酶（GOD）、过氧化物酶（POD）、4-氨基安替吡啉（4-AAP）酚试剂：苯酚 标准葡萄糖溶液：100 mg/dL (5.55 mmol/L)实验步骤实验步骤按下表加入各反应物：加入物（ml）空白管标准管测定管葡萄糖标准液0.020_血清样品0.020酶试剂1.501.501.50酚试剂1.501.501.50混匀，37保温 15min，以空白管调零，505nm 波长处测定各管吸光度值计算 血糖含量=A样/A标标准溶液浓度实验注意事项实验注意事项1. 分离血清要求使用未溶血样品，否则测定结果偏大2. 要求在 30 min 内分离血清，糖酵解在全血中以 7%/h 进行3. 样本在 4-8可稳定 24h,样本放置时间过长会使结果偏低GODPODH2O2+4-AAP+苯酚红色醌化物+H2O精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验六 人血清中总胆固醇的测定实验目的及要求实验目的及要求学会利用氧化酶法测定血清中总胆固醇含量的原理和方法实验原理实验原理胆固醇脂+H2O 胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+O2 4-胆甾烯酮+H2O22H2O2+4-AA+4-氯仿 醌亚胺（红色）+4H2OCEH：胆固醇脂酶 POD：过氧化物酶 CHOD：胆固醇氧化酶 4-AA：4-氨基安替吡啉醌亚胺在 500nm 有特征吸收，且生成量与样本中的胆固醇含量成正比，可通过测定标准品反应生成的醌亚胺的吸光度值，计算出样本中胆固醇的浓度。
实验仪器及试剂实验仪器及试剂试管、移液管、UNICO-2000 型分光光度计、恒温水浴锅标准血清、样本血清、蒸馏水、酶试剂盒实验步骤实验步骤按下表加入各反应物：l空白管标准管样本管酶试剂200020002000蒸馏水20_标准血清_20_样本血清_20A500nm各管混匀，37反应 6 min，以空白管校零 CEHCHODPODA样本A标准标准血清浓度胆固醇含量=精选优质文档-倾情为你奉上专心-专注-专业实验七 牛奶中粗脂肪含量的测定实验目的及要求实验目的及要求学习和掌握粗脂肪的定量测定法索氏提取法实验原理实验原理本实验用重量法，利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶剂后称量整个提取过程均在索氏提取器中进行通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为 30C -60 C 的石油醚用此法提取的脂溶性物质除脂肪外，还含有游离脂肪酸、磷脂、固醇、芳香油及某些色素等，故称为“粗脂肪”索氏提取器 (如图所示)利用溶剂回流及虹吸原理，使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取，既节约溶利萃取效率又高萃取前先将固体物质研碎，以增加固液接触的面积然后将固体物质放在滤纸套内，置于提取器中，提取器的下端与盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上面接回流冷凝管。
加热圆底烧瓶，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管上升，被冷凝后滴入提取器中，溶剂和固体接触进行萃取，当溶剂面超过虹吸管的最高处时，含有萃取物的溶剂虹吸回烧。