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1、DPPH法探究北沙参茎叶乙醇提取物体外抗氧化活性摘 要：本实验用DPPH法研究北沙参茎叶乙醇提 取物的体外抗氧化活性，测定不同浓度北沙参茎叶乙醇提取 物对DPPH自由基的清除能力。结果表明：北沙参茎叶乙醇 提取物具有一定的清除DPPH自由基能力，但抗氧化活性弱 于抗坏血酸，仍显示出较好的抗氧化活性，是一种安全性较 高的新型天然抗氧化物质。关键词：北沙参茎叶；DPPH法；抗氧化活性北沙参(Radix Glehnic)又称莱阳沙参、辽沙参等1, 为伞形科植物珊瑚菜 Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.的干燥根。北沙参茎叶为其上部组织，它含有较丰富多 糖类等物
2、质2；北沙参茎叶不同提取物具有增强小鼠免疫 功能的作用3-4；但目前对北沙参茎叶抗氧化活性的研究 尚未见报道。现代研究结果表明，自由基5作为致病因子 与肿瘤、衰老、心血管疾病和帕金森综合症等的发生有关6。因此，在天然植物中寻找高效低毒的抗氧化物质成为 当前研究的热点。山东莱阳为北沙参道地产地，但北沙参在 采收过程中其茎叶往往被遗弃。为有效利用自然资源，本文 选取莱阳产北沙参茎叶作为研究对象，采用DPPH法研究其 体外抗氧化活性，为北沙参茎叶在保健、功能食品及药品方 面的开发利用提供参考。1材料与方法1.1材料与仪器1. 1. 1材料 北沙参于2012年10月初采自山东省莱阳市 高格庄镇胡城村，
3、经山东中医药高等专科学校中药系张钦德 教授鉴定为北沙参正品。将刨出的北沙参收集其茎叶，自来 水洗净阴干后，置干燥箱中5CTC烘干，取出粉碎，过40目 筛备用。1. 1.2试剂 二苯代苦味酰基自由基 （DPPH，Sigma 化学有限公司）；抗坏血酸（Vc）、95%乙醇等均为分析纯。1. 1.3仪器KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器 有限公司），超声波功率为150W； TU-1901型紫外可见分光 光度计（北京普析通用仪器有限公司）；DHG-9140A型电热鼓 风干燥箱（上海鹏顺科学仪器有限公司）；RE-2000A型旋转 蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-III型循环水式真空泵 （上
4、海亚荣生化仪器厂）；XP205DR电子天平（瑞士梅特勒- 托利多公司）；TG20-WS台式高速离心机（长沙湘智离心机仪 器有限公司）。1.2实验方法1. 2. 1北沙参茎叶乙醇提取物制备称取北沙参茎叶粉末2. 000g,按1： 30的料液比加入体 积分数为70%的乙醇，浸泡12h后，7CTC的温度下超声提取 两次，每次40min；抽滤，合并滤液，滤液经旋转蒸发器浓 缩，用70%乙醇定容至lOOmL棕色量瓶中。所得醇提取液为 供试液，含原药材量相当20 mg/mLo1. 2. 2抗氧化活性测定实验评价天然植物提取物体外抗氧化活性的方法有许多种 7-8, DPPH法是其中的一种，该法具有快速、简便
5、的优点, 是目前应用最广泛的定量测定天然植物提取物体外抗氧化 活性评价方法9 o北沙参茎叶乙醇提取物清除DPPH自由基能力的测定 10精密称取一定量的DPPH，用95%乙醇配制成 lX10-4mol/L的DPPH溶液定容于棕色量瓶。分别准确移取 2mL 不同浓度(0.1, 0. 2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. 0, 2. Omg/mL) 的供试液于lOmL比色管中，加入lX10-4mol/L的DPPII溶 液2mL,混匀，室温避光放置30min, 10000r/min离心6min, 取上清液用分光光度计在517nm处测吸光度Ai；同时测定 加L北沙参茎叶醇提取液与加L95%乙醇混合后
6、的吸光度Aj, 以及2mLDPPH溶液与2mL95%乙醇混合后的吸光度Ac,平行 测定3次，取平均值。以Vc作阳性对照。用以下公式计算 其对DPPH自由基的清除率。2结果与分析2. 1北沙参茎叶乙醇提取物对DPPH自由基清除作用3结论北沙参茎叶乙醇提取物抗氧化活性的实验结果表明，其 对DPPH自由基具有明显的清除作用，且清除能力随北沙参 茎叶乙醇提取物浓度的增大而增强。北沙参茎叶乙醇提取物 清除DPPH自由基的能力较对照抗坏血酸弱，在样品浓度为 2mg/mL时，其抗氧化性是VC的90.5%,仍具有明显的抗氧 化活性，是一种安全性较高的新型天然抗氧化物质，具较好 的开发利用价值。参考文献1 蔡永
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