基金项目：国家自然科学基金青年科学基金项目(30901956)；江苏高校优势学科建设工程项目 ；2011 年度江苏省高等学校优秀科技创新团队作者简介：贺玉伟，男( 1986-)，医学硕士，研究方向：从事中药复方作用机理研究通讯作者：余伯阳，教授，博士生导师，研究方向：主要从事中西医结合药学研究， Tel: 025-83271321，E-mail：boyangyu59@ 甲状腺素诱导小鼠模型表观指征变化与阴虚火旺证的相关性研究贺玉伟，柴程芝，寇俊萍，戚进，余伯阳*（中国药科大学中药复方研究室 南京 211198）摘要：目的 考察甲状腺素诱导小鼠模型表观指征的变化与阴虚火旺证的相关性，为阴虚火旺证动物模型的构建提供参考方法 将 48 只标重小鼠随机分为空白组和 3 个模型组，每组 12 只，雌雄各半，模型组每天 i.g.不同剂量（40 mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg）的甲状腺片混悬液，空白组 i.g.双蒸水，并测定小鼠体重、摄食量、饮水量、体温、自发活动和心率的动态变化结果 与空白组相比较，各模型组小鼠均表现为体重增加缓慢，摄食量与饮水量增加，体温升高，心率加快，自主活动频繁等特征，能够模拟形体消瘦，消谷善饥，口干欲饮，五心烦热，心悸，烦躁等阴虚火旺证的主要临床指征，其中高剂量模型组雌性小鼠表观指征的变化更显著，与空白对照组比较有显著性差异（P < 0.01） 。
结论 甲状腺素造模诱导小鼠表观指征的变化能够模拟阴虚火旺证的主要临床特征，雌性小鼠 i.g. 160 mg/kg/d 连续 14 天诱导模型小鼠表观指征的变化与阴虚火旺证的相关性更为显著关键词：甲状腺素；阴虚火旺证；动物模型Correlative Study between the Exterior Signs of Mice Model Induced by Thyroxine and Hyperactivity of Fire due to Yin Deficiency Syndrome HE Yu-wei, CHAI Cheng-zhi, KOU Jun-ping, QI Jin, YU Bo-yangState Key Laboratory of Natural Medicines, Department of Complex Prescription of TCM, China Pharmaceutical University, Nanjing, 211198, China;Abstract: Objective To observe the correlation between the exterior signs of mice model induced by thyroxine and hyperactivity of fire due to yin deficiency syndrome to provide reference for constructing hyperactivity of fire due to yin deficiency syndrome animal model. Methods 48 standard weight mice were randomly divided into control group and three model groups, 12 each group, male and female in half. Model groups were managed with thyroid tablet suspension of different doses (40 mg/kg, 80 mg/kg and 160 mg/kg) respectively, whereas the control group with ..double-distilled water. The body weight, food intake, water intake, body temperature, spontaneous activity and heart rate were measured dynamically. Results As compared with the control group, mice in the model groups manifested slowly increased body weight, enhanced food intake and water intake, elevated body temperature, quicken heart rate and frequent spontaneous activity, which could simulate the major clinical characteristics of hyperactivity of fire due to yin deficiency syndrome, such as emaciation, voracious appetite, thirsty for water, intermal heat, palpitation, impatience, et al. Among which, the exterior signs of female mice in high-dose model group were extremely notable compared with the control group (P<0.01). Conclusion The exterior signs induced by thyroxine can simulate the major clinical characteristics of hyperactivity of fire due to yin deficiency syndrome, the correlation between the exterior signs of female mice model induced by thyroxine i.g. 160 mg/kg/d for consecutive 14 days and hyperactivity of fire due to yin deficiency syndrome is more significantly.Key words: Thyroid Tablet; Hyperactivity of Fire due to Yin Deficiency Syndrome; Animal Model阴虚火旺证是中医临床常见证型，主要表现为食欲亢进，形体消瘦，口干喜饮，烦躁易怒，五心烦热，心悸等特征，常见于甲亢、糖尿病、肺结核等疾病 [1]。
有文献报道，采用甲状腺素造模能够诱导动物表现为：躁动不安、活动频繁，皮毛光泽度差；体重减轻，进食量、饮水量改变；体温升高，痛反应敏感以及对疲劳、低温和缺氧的耐受能力降低等，通常以该模型作为阴虚或甲亢模型用于考察不同药物的作用研究 [2-5]但是，通过系统考察表观指征的变化以探讨该模型与阴虚火旺证的相关性研究尚未见报道本研究拟通过考察不同剂量甲状腺素对不同性别小鼠各项表观指征随时程变化的影响，比较造模剂量、造模时间、性别等不同条件对模型各项表观指征的影响并探讨其与阴虚火旺证候特征的关联性，为构建能够模拟阴虚火旺证主要临床指征的动物模型提供参考依据1 材料与方法..1.1 动物 清洁级 ICR 小鼠，雌雄各半，体重 18-22 g，由扬州大学比较医学动物中心提供（动物合格证号 SCXK（苏）2007-0001 ） 1.2 主要试剂与仪器 水合氯醛：国药集团化学试剂有限公司生产（批号 20100111） ；羧甲基纤维素钠（EDTA-2Na）：国药集团化学试剂有限公司生产（批号 F20090302） 生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司，型号：BL-420） ；鼠博士行为学分析系统（上海移数信息有限公司，型号：RD1112-IOF-M-2） ；数字式电子体温计（东阿阿胶阿华医疗器械有限公司，型号：TDB-1） 。
1.3 药物及其制备甲状腺片：浙江尖峰药业有限公司（批号 110603） 取甲状腺片于研钵中研磨至粉末，移至 100 mL 血清瓶中，再加入 100 mL 0.5%CMC-Na（称量 3 g 羧甲基纤维素钠加入煮沸的双蒸水中适当搅拌至溶解，封口自然冷却，加双蒸水补至 600 mL 即得） ，摇匀，超声 30 min，分别配制成浓度为 2 mg/mL、4 mg/mL、8 mg/mL 的甲状腺片混悬液备用，以 0.2 mL/10g 灌胃给药，给药剂量即为 40 mg/kg、80 mg/kg、160 mg/kg1.4 造模方法 48 只小鼠随机分为空白对照组、模型组（低、中、高剂量组） ，每组 12 只，雌雄各半，每 6 只饲养于同一笼内，每笼小鼠每天给定量食物 100 g，自由饮水空白组每天正常喂养，早晨灌服 0.5%CMC-Na 0.2 mL/10g；模型组每天分别灌服不同浓度的甲状腺片混悬液 0.2 mL/10g，连续给药 2 周1.5 观测指标1.5.1 体重 于每天上午 9 时供给食物前，分别称体重并作记录1.5.2 摄食量 于每天上午灌胃完毕后称量每笼剩余食物量并作记录，总耗食量/每笼小鼠数量=小鼠的平均耗食量。
1.5.3 饮水量 于每天上午灌胃完毕后用量筒测量每笼剩余水量并作记录，小鼠的平均饮水量计算方法同摄食量1.5.4 体温 分别于实验第 0、3、6、9、12、15 天下午 14-16 时测量肛温并作记录1.5.5 自发活动 分别于实验第 0 天和第 15 天上午 9 时，采用行为学分析系统考察各组小鼠..5 min 内的自发活动，包括：平均速度和直立次数1.5.6 心率 于实验第 0 天和第 15 天晚上 18 时，用 4%水合氯醛 0.1 mL/10g i.p.麻醉后连接BL-420S 生物机能实验系统采集心电图，记录心率1.6 数据统计所有数据用( ± SEM) 表示，其中各检测指标曲线下面积采用梯形法计算 [6]，用( ± X XS) 表示，采用组间 t 检验分析各组间体重、摄食量、饮水量、体温、自发活动以及心率之间的差异，P < 0.05 为有显著性差异， P < 0.01 为有极显著性差异2 结果2.1 各组间体重比较如图 1 显示，与空白对照组相比较，各模型组的体重增长缓慢，其中高剂量（160 mg/kg）模型组小鼠体重均呈现先下降后又缓慢上升的趋势，在该剂量下不同性别小鼠AUC 与空白组比较均有显著性差异（P<0.05 ） ；低（40 mg/kg） 、中（80 mg/kg）剂量模型组雌性小鼠体重 AUC 明显降低，雄性小鼠变化不明显。
图 1：甲状腺素对小鼠体重影响的经时变化（1-1、1-3 为雄性， 1-2、1-4 为雌性）（*P <0.05，**P <0.01 vs. 空白对照组）Fig.1: The body weight changes of mice induced by thyroid hormone (1-1 and 1-3 male; 1-2 and ..1-4 female) （*P<0.05 ，**P<0.01 vs. control group）2.2 各组间摄食量比较如图 2 所示，与空白组小鼠相比较，高（160 mg/kg） 、中（80 mg/kg）剂量模型组小鼠从第 4 天起摄食量明显增加，且摄食量 AUC 明显增加，与对照组比较具有极显著差异（P<0.01 ） 图 2：甲状腺素对小鼠摄食量影响的经时变化（2-1、2-3 为雄性，2-2、2-4 为雌性）（*P <0.05，**P <0.01 vs. 空。