伊红美蓝培养基一、原理伊红美蓝培养基（eosin-methylene blue medium,简称EMB medium），一般用于检测大肠杆菌 伊红为酸性染料，美篮为碱性染料当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落 蛋白胨提供碳源和氮源；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是缓冲剂；琼脂是培养基凝固剂；伊红和美篮是抑菌剂和pH指示剂，可抑制G+，在酸性条件下产生沉淀，形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落二、鉴定方法①制作伊红美蓝培养基，趁热注入培养皿中，凝成平板，待用 ②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水，按1：10稀释 ③取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上用平板划线分离法进行分离 ④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时培养基中会出现大肠杆菌菌落，菌落中心呈暗紫黑色，发金属光泽 ⑤将菌落接种于斜面培养基上（由营养琼脂培养基制成）三、配方蛋白胨 10g 乳糖 10g 磷酸氢二钾 2g 琼脂 15g 蒸馏水 1000ml 2%伊红水溶液 20ml 0.5 %美蓝水溶液 13ml四、储备培养基的制备先将琼脂加至900ml蒸馏水，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨，混匀使之溶解，再以蒸馏水补足至1000ml，调整PH为7.2~7.4。
趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入乳糖，混匀后定量分装于烧瓶内，置高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min，贮存于冷暗处备用 五、制法 将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。