《实验诊断学》实验报告实验一 红细胞、白细胞计数 实验原理一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞,混匀后充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的白细胞数根据稀释倍数和计数的容积,换算求得每升血液中的红细胞数量以及白细胞数量实验内容与步骤实验材料:显微镜、微量吸管、毛细吸管、改良Neubauer计数板、盖玻片、小试管、RBC稀释液、WBC稀释液、正常人的全血、纱布实验步骤:1、红细胞计数准备:加稀释液,用微量吸管吸取RBC稀释液蒸馏水2.0 ml加到小试管内取血,毛细吸管取血10 μl用纱布擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2-3次,立即混匀2、白细胞计数准备:WBC稀释液: 冰醋酸3.0 mL(破坏红细胞) 蒸馏水97.0 mL 亚甲蓝(染色)小试管加WBC稀释液0.38 mL采血,微量吸管取血20 μL擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2-3次,立即混匀充池、观察:将计数板及盖玻片檫净,将盖玻片覆盖在计数板上用滴管吸取混均的红细胞悬液充入上方计数室,静置3-5 min,高倍镜下计数;白细胞悬液充入下方计数室,静置2-3 min,低倍镜下计数。
观察计数,红细胞,高倍镜下计数中央大方格内四角的4个中方格和正中的1个中方格的红细胞,压线细胞的计数按照数上不数下,数左不数右的原则计数时按照弓形的计数方式,以免漏数或多数用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数实验结果1、红细胞计数实验结果:5个中方格内RBC的计数/个=24+27+32+22+25根据计算公式:RBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106 =5个中方格内RBC数/100×1012 推算得出 RBC:1.3×1012/L 正常人群的红细胞计数参考区间:人群 红细胞计数(×1012/L)成年男性 4.3~5.8成年女性 3.8~5.1新生儿 6.0~7.0结论:实验结果和参考区间比较得出,实验结果所得的红细胞计数偏低2,、白细胞计数实验结果:4个大方格内WBC数/个=11+7+9+7根据计算公式:WBC/L=4个大方格内WBC数/4×10×20×106 =4个大方格内WBC数/20×109推算得出WBC:1.7× 109/L正常人群的白细胞计数参考区间:人群 白细胞计数(×109/L)成年人 3.9~9.5新生儿 15.0~20.06个月至2岁 11.0~12.0结论:比较得出白细胞计数偏低讨论注意事项:吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血。
取血量须准确,动作要迅速,防止血液凝固血液加入稀释液后,应立即混匀充液前,红、白细胞复液要充分摇匀,细胞悬液注入计数池内要求分布均匀,不可有多余液体外溢,亦不可有气泡压线细胞应数上不数下,数左不数右讨论:取量不准:取血量少于实验标准血量、所取稀释液量超过实验添加的量,导致悬液浓度降低计数偏差过大:计数时漏数细胞破坏较多:混均时用力不当,导致细胞损伤较多。