水质指标测定方法一．氨氮 (NH3-N)的测定 1.标准曲线的绘制：分别取0ml、0.5 ml、1.00 ml、3.00 ml、5.00 ml、7.00 ml 和 10.00ml 铵标准使用液于 50ml 的比色管中，加水定容到50ml；加 1ml 酒 石酸钾钠，混匀；再加1.5ml 纳氏试剂，混匀，放置10min；在波长 420nm 处，用 10mm 光程下比色，用蒸馏水作参比，测吸光度D 2.测水样：取 50.00ml 水样于比色管中，其他步骤同上 3.计算：由水样测得的吸光度从标准曲线上查得氨氮含量A(mg) 氨氮(NH3-N,mg/l)=A×1000/V 式中： A—由校准曲线查得样品管的氨氮含量(mg)； V—水样体积 (ml) 4.相关试剂： ①铵标准储备液： 称取 3.819g经 100℃干燥过的优级纯氯化铵 (NH4Cl)溶于 水中，移入 100ml 容量瓶中定容此溶液每毫升含1.00mg氨氮 ②铵标准使用液： 取 5.00ml 储备液于 500ml 容量瓶加水定容至标线， 得此 溶液每毫升含 0.01mg 氨氮 ③酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠溶液 (KNaC4H4O6· 4H2O)溶于水， 再用烧杯加热煮沸以除去氨，冷却后移入100ml 容量瓶中定容。
④纳氏试剂：称取16g 氢氧化钠，溶于50ml 水中，充分冷却至室温；另 称取 10g 碘化汞 (HgI2)、7g 碘化钾 (KI) 溶于水；然后将此溶液在搅拌下徐徐注入 氢氧化钠溶液中；用水稀释至100ml，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存 二．硝酸盐 (NO3-N)的测定 1.标准曲线的绘制：分别取0ml、0.5 ml、1.00 ml、2.00 ml、3.00 ml、5.00 ml、 7.00ml 和 8.00ml 硝酸钾标准使用液于25ml 的比色管中，加水定容到25ml； 加 1：1 的盐酸 1ml 和氨基磺酸溶液 0.1 ml，混匀；在波长 220nm、275 nm 光程下比色，用蒸馏水作参比，测吸光度D绘制以总氮含量 (mg)对校正吸 光度的标准曲线 2.测水样：取 25 ml 水样于比色管中，其他步骤同上 3.计算：由水样测得的吸光度从标准曲线上查得硝酸氮含量A(mg) 硝酸氮 (NO3-N，mg/l)=A × 1000/V 式中： A—由校准曲线查得样品管的硝酸氮含量(mg)； V—水样体积 (ml) 4.相关试剂： ①硝酸钾标准贮备液： 硝酸钾 (KN03)在 105℃-110℃烘箱中干燥 3h，在干燥 器中冷却后，称取 0.7218 g溶于二次蒸馏水中，移至1000 ml 容量瓶中定容，加 人 1-2 ml 三氯甲烷保存，可稳定6 个月。
②硝酸钾标准使用液：将贮备液用蒸馏水稀释10 倍而得 ③1：1 的盐酸溶液： 1 体积盐酸 +1 体积蒸馏水 ④氨基磺酸溶液： 0.8g氨基磺酸溶于 100ml 蒸馏水 三．溶解性总氮 (DTN) 的测定 1.标准曲线的绘制：分别取0ml、0.5 ml、1.00 ml、2.00 ml、3.00 ml、5.00 ml、 7.00ml 和 8.00ml 硝酸钾标准使用液于25ml 的比色管中， 加水至 10ml；加入 5ml 碱性过硫酸钾， 加塞后管口包一纱布并扎紧， 置于高压灭菌锅内于121℃消解 30min；冷却后加 1:9 的盐酸 1 ml，用蒸馏水定容至 25 ml；分别在波长 220nm、275nm，10mm 光程的石英比色皿中， 用蒸馏水做参比， 测吸光度 D 由 220nm 和 275nm测得的吸光度 D220 与 D275，减去零浓度空白管的吸光 度后，再由D=D220-2*D275 得到校正吸光度，绘制以总氮(TN)含量(mg)对 校正吸光度的标准曲线 2.测水样：取 10ml 水样于比色管中，其他步骤同上 3.计算：由水样测得的吸光度从标准曲线上查得总氮含量A(mg) 溶解性总氮 (DTN，mg/l)=A × 1000/V 式中： A—由校准曲线查得样品管的总氮含量(mg)； V—水样体积 (ml)。
4.相关试剂： ①硝酸钾标准贮备液：同上 ②硝酸钾标准使用液：同上 ③碱性过硫酸钾溶液：称取40g 过硫酸钾 (K2S2O8)，另称取 15g 氢氧化钠 (NaOH)，溶于蒸馏水中，稀释至1000 ml，溶液存放在聚乙烯瓶内，最长可贮存 一周 ④1：9 的盐酸溶液： 1 体积盐酸 +9 体积蒸馏水 四．正磷酸盐 (DP)的测定 1.标准曲线的绘制： 分别取 0ml、0.25 ml、 0.5ml、1.5 ml、 2.5 ml、5.0ml 和 7.5ml 磷酸标准使用液于25ml 的比色管中，加水定容到25ml；加 2.5 ml 钼酸盐， 摇匀；再加 0.2 ml 氯化亚锡溶液，混匀，显色15min；在波长 700nm 光程下 比色，以空白样为参比，测吸光度D绘制以总磷含量 (mg)对校正吸光度的 标准曲线 2.测水样：取 25ml 水样于比色管中，其他步骤同上 3.计算：由水样测得的吸光度从标准曲线上查得磷含量A(mg) 正磷酸盐 (DP,mg/l)=A × 1000/V 式中： A—由校准曲线查得样品管的磷含量(mg)； V—水样体积 (ml) 4.相关试剂： ①磷标准贮备溶液：称取0.2197g于 110℃干燥 2 h 在干燥器中放冷的磷酸 二氢钾 (KH2PO4)，用蒸馏水溶解后转移至1000 ml 容量瓶中，加入大约800ml 水、加 5ml 浓硫酸用蒸馏水稀释至标线并混匀，可贮存至少六个月。
1.00ml 此 标准溶液含 50μg 磷 ②磷标准使用溶液：将10.0 ml 的磷标准溶液转移至250 ml 容量瓶中，用 蒸馏水稀释至标线并混匀1.00 ml 此标准溶液含 2μg 磷 ③钼酸盐溶液：称取 8.25g钼酸铵 ((NH4)5Mo7O24﹒4H2O)溶于约 75ml 水中， 另取 100 ml 浓硫酸徐徐注人300 ml 水中，冷却后将钼酸铵在搅拌下注人硫酸溶 液中，加水至 500 ml，贮于聚乙烯瓶中 ④氯化亚锡溶液：称取0.5g 氯化亚锡 (Sncl2﹒H2O)，加人 2.5ml 浓盐酸使 之完全溶解，得透明溶液 (必要时放置过夜或稍稍加温)后加水，稀释至 25ml，加 一粒金属锡粒，置暗冷处，一周后需要重新配制 五．溶解性总磷 (DTP)测定 1.标准曲线的绘制： 分别取 0ml、0.25 ml、 0.5ml、1.5 ml、 2.5 ml、5.0ml 和 7.5ml 磷酸标准使用液于50ml 的比色管中，加水定容到 25ml； 加 5%过硫酸钾 4ml，再加塞后管口包一纱布并扎紧， 置于高压灭菌锅内于121℃消解 30min； 冷却 后加 2.5ml 钼酸盐，混匀；再加0.2ml 氯化亚锡溶液，混匀，显色15min； 在波长 700nm，10mm 光程下比色，以空白样为参比，测吸光度D。
绘制以 总磷含量 (mg)对校正吸光度的标准曲线 2.测水样：取水样 25ml 于比色管中，其他步骤同上 3.计算：由水样测得的吸光度从标准曲线上查得磷含量A(mg) 溶解性总磷 (DTP，mg/l)=A × 1000/V 式中： A—由校准曲线查得样品管的总磷含量(mg)； V—水样体积 (ml) 4.相关试剂： ①磷标准贮备溶液：同上 ②磷标准使用溶液：同上 ③5%过硫酸钾溶液： 将 5g 过硫酸钾 (K2S2O8)溶解于蒸馏水， 并稀释至 100 ml ④钼酸盐溶液：同上 ⑤氯化亚锡溶液：同上 六．溶解性二氧化硅 (DTSi)测定 1.标准曲线的绘制： 分别取 0ml、0.25 ml、0.5ml、1.5 ml、2.5 ml、3.5ml 和 5ml 二氧化硅标准使用液于25ml 的比色管中，加水定容到25ml；迅速顺次加入 1:1 的盐酸溶液 0.5 ml，钼酸铵溶液 1.0 ml，至少上下倒置 6 次，使之充分混 匀；然后放置 5-10min，加入 1.0 ml 草酸溶液，再充分混匀；从加入草酸溶 液后的时间算，在2-15min 内进行测定；波长采用410nm，10mm 光程下比 色，以蒸馏水为参比，测吸光度D。
绘制以二氧化硅含量 (mg)对校正吸光度 的标准曲线 2.测水样：取水样 25ml 于比色管中，其他步骤同上 3.计算：由水样测得的吸光度从标准曲线上查得二氧化硅含量A(mg) 二氧化硅含量 (DSiO2，mg/l)=A × 1000/V 式中： A—由校准曲线查得样品管的二氧化硅含量(mg)； V—水样体积 (ml) 4.相关试剂： ①二氧化硅标准贮备溶液：称取高纯石英砂（二氧化硅）0.2500g 置于铂 坩埚中，加入无水碳酸钠4g，混匀于高温炉中在1000℃熔融 1h取出冷却后 转移至 250 ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线并混匀，贮存于聚乙烯瓶中，密 封保存 1.00ml 此标准溶液含 1000μg 二氧化硅 ②二氧化硅标准使用溶液：将50.0 ml 的二氧化硅标准溶液转移至500 ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线并混匀1.00 ml 此标准溶液含 100μg 二氧化硅 ③1：1 的盐酸溶液： 1 体积盐酸 +1 体积蒸馏水 ④钼酸铵溶液：称取10g 钼酸铵 ((NH4)5Mo7O24﹒4H2O)溶于水中（搅拌并 微热） ，稀释至 100 ml，如有不溶物应过滤用氨水调节pH 值到 7-8。
⑤7.5%草酸溶液：将7.5g 草酸(H2C2O4﹒2H2O)溶解于蒸馏水，并稀释至 100 ml 七．叶绿素 a（Chl.a）的测定 1.取适量的水样（根据当日的藻细胞密度大小取100～300ml 不等）用乙酸纤 维滤膜 (0.45 μm)在真空泵下抽滤得到滤膜；将滤膜放入离心管中加入10ml 90%的丙酮溶液，放在阴暗处提取24 小时 2.放置 24 小时后摇匀，用离心机 (3000～4000r/min)离心 10-15min小心移取 上清液于光程是 10mm 的比色皿中，分别在波长750、663、645、630nm 下 用 722 型可见光分光光度计测定吸光度(以 90%的丙酮做参比 )用如下公式 计算水样中叶绿素a 的含量：36637506457506307501[11.64()2.16()0.1 ()](/)DDDDDDVChla mg mV 式中： V—水样体积 (L)； V1—提取液定容后的体积 (ml)； D—吸光度；δ— 比色皿光程 (cm) 八．光密度 (OD)的测定 1.取纯种培养的藻液，测定其在可见光波长范围内的吸光度，得到其吸光度最 大值对应的可见光波长为450nm，将其作为光密度测定波长。
2.取水样于光程 10mm 的石英比色皿中， 在波长 450nm下测定其吸光度， 重复 三次取平均值作为光密度值 九．注意事项 1.TP、TN 必须用没抽的水样测量，其余指标都可以用抽过的水样测量，没抽 的水样测量之前都要试碱，把pH 调节至约为 7 2.温度对显色和分光光度计都有较大影响，实验时要保证实验室的温度适宜 十．试剂汇总和配制经验 1.氨氮： 铵标准使用液：需 26.5ml，可配置 50ml 便于取用； 酒石酸钾钠溶液： 1.0ml/样 纳氏试剂： 1.5ml/样 2.硝酸盐： 硝酸钾标准使用液：需26.5ml，可配置 50ml 便于取用； 1：1 的盐酸溶液： 1.0ml/样 氨基磺酸溶液： 0.1ml/样 3.溶解性总氮： 硝酸钾标准使用液：需26.5ml，需消解故同时做两组标线，配置100ml； 碱性过硫酸钾溶液： 5.0ml/样 1：9 的盐酸溶液： 1.0ml/样 4.总氮： 硝酸钾标准使用液：需26.5ml，需消解故同时做两组标线，配置100ml； 碱性过硫酸钾溶液： 5.0ml/样 1：9 的盐酸溶液： 1.0ml/样 5.正磷酸盐： 磷标准使用溶液：需17.25ml，可配置 50m。