精选优质文档-----倾情为你奉上引物稀释方法PCR引物稀释方法（-S为上游引物,-A为下游引物）：1. 按照管壁上的nmol数加入10倍的灭过菌的纯化水稀释成100nmol/mL2. 各取上游引物（***-S）10uL，下游引物10uL加入到80uL灭过菌的纯化水中稀释成10nmol/mL3. 取稀释好的引物混合液2uL做PCR（25uL体系）定量PCR操作步骤参考（以FastStart Universal SYBR Green Master(Rox) Roche为例）1）取0.2ml PCR管，配制如下反应体系 2 qPCR Mix 12.5μl7.5μM基因引物 2.0μl反转录产物 2.5μlddH2O 8.0μl2）PCR扩增预变性 95℃，10min循环（40次） 95℃，15s→60℃，60s末段延伸 60℃，5min溶解曲线 75℃→95℃，每20s升温1℃专心---专注---专业。