qft-中文说明书20110331

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1、QuantiFERON TB Gold InTube结核分支杆菌感染诊断试剂盒 供体外诊断使用 使用前请务必详阅原厂之使用说明书并遵照指示使用 1. 预期用途预期用途 QuantiFERON TB Gold InTube (IT)是一种体外诊断试验，它利用模拟ESAT6、CFP10 和 TB7.7(p4)这三种蛋白的混合多肽刺激肝素化全血中的细胞，再用酶联免疫吸附法(ELISA)测定 与多肽抗原体外反应所产生的干扰素，从而判断受试者是否受到结核分枝杆菌的感染。 QuantiFERON TB Gold IT是一种间接检测结核分枝杆菌感染（包括结核病）的测试，在临床 上，可结合风险评估、放射摄影及

2、其它医疗与诊断手段联合应用。 2. 产品概述及试验的解释产品概述及试验的解释 结核病是由结核分枝杆菌符合群（包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌）感染所 致的传染性疾病。 一般是从呼吸道结核病患者籍由空气飞沫传染给新宿主。 刚被感染的个体， 从感染到发病的时间，短则几周、长可至几个月，但大部分被感染者都还能维持良好身体状 况。潜伏性结核菌感染（LTBI）是一种无传染性、无症状的状况，在某些受感染者身上持续 存在，可能在数月、甚至数年之后才发病。诊断 LTBI 的主要目的是考虑进行治疗并预防结 核病的发生。 之前结核菌素试验 （TST） 是唯一可以诊断 LTBI 的方法。 在结核杆菌感染后

3、 210 周内 TST 试验转为阳性。然而，有些受感染者对结核菌素是没有反应的，这些人群中既包括 那些各种原因导致免疫抑制者，也包括一些没有免疫抑制的人。相反地，有些人在接种卡介 苗（BCG）后，或者感染了非结核杆菌的分枝杆菌，或者存在其它不确定因素的情况下，即 使不可能感染结核分枝杆菌，却显示出对结核菌素敏感并出现阳性结果。 LTBI 必须与结核病区别开来，因为结核病常常累及肺和下呼吸道（虽然是其他器官系统也有 可能被感染） ，是需要向卫生部门报告的传染病。结核病需通过病史、体格检查、放射学、 组织学及分枝杆菌细菌学的发现来诊断。 QuantiFERON TB Gold IT检测模拟分支杆菌

4、蛋白质的多肽抗原所引发的细胞介导免疫 （CMI） 反应。这些蛋白质是ESAT6、CFP10 和TB7.7(p4)，所有的BCG菌株及绝大部分的非结核分枝 杆菌（M.kansasii、M.szulgai及M.marrinums1除外）都不含有这三种蛋白质。受结核分枝杆菌 结合群感染的患者， 其血液中通常含有能够识别这三种蛋白质和其它分支杆菌抗原的淋巴细 胞。这一识别过程伴随着产生和分泌干扰素。检测并定量分析IFN的浓度是试验的基础。 QuantiFERON TB Gold IT中的抗原是模拟ESAT6、CFP10 及TB7.7（p4）的多肽混合物。许多 测原理测原理 N TB Gold IT系统

5、使用特殊的采血管来采集全血。血液在试管中孵育 16 至 24 研究证实这些多肽抗原能刺激感染结核菌者的T细胞产生IFN的反应，但在未感染者、或接 种卡介苗但无结核病或LTBI风险者，则不会产生反应132。然而，由于治疗或其它原因导致免 疫功能受损时，有可能会降低干扰素的反应。非结合分支杆菌M.kansasii、M.szulgai和 M.marrinums1 ，23有表达ESAT6、CFP10 及TB7.7（p4）的基因，因此当患者感染这些分枝杆 菌时，则可能对这些抗原有反应。QuantiFERON TB Gold IT既可以检测LTBI，又有助于诊断 病人感染结核分枝杆菌复合群。阳性结果支持结

6、核病的诊断；但是其它分枝杆菌（如： M.kansasii）的感染也可能导致阳性结果。为了确认或排除结核病，其它医学或诊断上的评 估也是必要的。 检检 QuantiFERO 小时后，取出血浆并测定受多肽抗原刺激所产生的IFN浓度。 QuantiFERON TB Gold IT测试分二阶段进行。首先，将全血采集至每个QuantiFERON TB 的阳性对照。当无法肯定受试者的免疫状况时，使用 Mitogen 管更 试管离心，取 则视为实验结果阳性。 如使用 Mitogen 管， 测所需时间测所需时间 TB Gold IT测试（含批量多个样本检测）所需时间预估如下： （2844 个测试）大约 3 小

7、时 分钟 剂及储存剂及储存 采血管 00 支 支 血管（型号：0590 0201） LISA 组分（型号：组分（型号：0594 0201） 抗体的酶标板条 2x96 孔板 1 小瓶 3. 0ml 1 瓶 x0.3ml 5. 它所需材料及设备（未提供）它所需材料及设备（未提供） Gold 采血管，这些采血管包括空白对照（Nil）管、结核（TB）抗原管和备选的促有丝分裂 因子（Mitogen）管。 Mitogen 管可作为本测试 能确定其检测结果。Mitogen 对照管亦可作为是否正确采血及培养的对照。 采血管必须在采血后 16 小时内，尽快在 37C 下孵育。孵育 1624 小时后，将 出血浆，

8、并用 ELISA 测定 干扰素(IU/mL)含量。 TB 抗原管的 干扰素浓度若显著高于 Nil 对照管， 其所刺激的血浆样本则作为每位测试者的阳性对照。对 Mitogen 反应较低（0.150，则必须检查酶标板清洗步骤。 结果判读结果判读 QuantiFERO 注意：当利用本测试来诊断或排除罹患结核病及评估是否有 LT 学、病史、医学、与诊断上的发现等资讯一同列入考虑。 当只用 Nil+TB 管时： Nil TB 抗原减去 （IU/mL） 结果 8.02 不确定3对 TB 抗原的反应结果不确定 任何 1.当不像有感菌，但除此结果呈阳性反应者， 请见 10.技术资讯。 试者对 Nil 对照的

9、IFN 反应会8.0IU/mL。 进展至活动性 染结核该原始血浆样本必须再重复进行本试验 （同时测两组） 。若重复试验中有任一组或两组的结果仍为阳性，则该测试者应被判读为阳 性反应。 2.可能原因 3.在临床试验中，少于 0.25%的测 所测得的 IFN 浓度，其幅度不会与感染阶段或程度、免疫反应程度、或可能 疾病有相互关系。 图 3：判读流程图只用 Nil+TB 管 用 Nil+TB+Mitogen 管时： Nil(IU/mL)Nil (IU/mL) Mitogen 减去 本测试 判读 TB 抗原减 Nil0.35IU/mL TB 抗原减 Nil25%Nil 值 Nil 值8.0IU/mL

10、是 否 是 否 否 阳性 不确定 阴性 再确认再确认 判读判读 当 TB 抗原 Nil (IU/mL)1 结果 8.04 不确定 对 TB 抗原的反应结果不 任何 任何 确定 1.对 Mitogen（有时是 T）的反应结果，可能会落在酶标仪的范围之外， 呈阳性反应者，该原始血浆样本必须再重复进行本试验 见 10.技术资讯之疑难排除。 对照抗原的 IFN 反应会8.0IU/mL. 展至活动性 阳性对照抗原B 抗原 这不会对检测结果判读造成影响。 2.当不像有感染结核菌，但初次结果 （同时测两组） 。若重复试验中有任一组或两组的结果仍为阳性，则该测试者被判读为有阳 性反应。 3.可能原因 4.在临

11、床试验中，少于 0.25%的测试者对零 所测得的 IFN 浓度，其幅度不会与感染阶段或程度、免疫反应程度、或可能进 疾病有相互关系。 图 4：判读流程图用 Nil+TB+Mitogen 管 .局限局限 结果，必须结合各测试者的流行病史、目前病史及其他诊断评估。 TB 抗原的反 出现异嗜性抗体。 效能特性效能特性 明确的标准去评估 LTBI,因此本测试的灵敏度及特异性几乎难以评估。本测试的 究中，有 866 位自愿者接受 TST 测试时，同时抽血进行本测试，并以标准方式调查 TB 抗原减 Nil 0.35IU/mL TB 抗原减 Nil Nil 值8.0IU/mL 否 25%Nil 值 否 不确

12、定 阴性 再确认再确认 Mitogen 减去 Nil8.0IU/mL 否 是 否 是 判读判读 阳性 是否 8 本测试的 测试者的 Nil 值若高于 8IU/mL 时，将被视为“不确定” 。因为在此情况下，对 应可能25%Nil 值，而使其落在本次测试可测量范围之外。 不可靠或不确定的结果，可能起因于以下几点： 未依说明描述的步骤来操作。 血液循环中的 IFN 浓度过高或 从抽血到开始于 37C 中培养的时间超过 16 小时。 9. 临床试验临床试验 由于尚未有 特异性是用评估低结核菌感染风险（无已知风险因子）群之假阳性比例来估计。灵敏度则是 用评估经痰液培养确认是活动性结核病之患者群来估计。

13、 特异性特异性 在美国研 基本资料及结核病风险因子。其中 432 人无已知结核病感染风险因子，但完成本测试的 TST 者只有 391 人，且没有人接受过卡介苗接种。另一个特异性研究则在日本，同样利用本测试 评估低风险者，其中约有 90%的人曾经接受卡介苗接种。两个特异性的研究结果请见表 2。 表 2：特异性低结核菌感染风险者 结本测试结果本测试之特 I) TST 结果TST*之特异研究 卡介苗测试者本测试 接种率总数 果为不确 定 为阳性/有效 测试者数 异性 (95%C 为阳性/ 测试者 数 性(95%CI) 美国 ) 0% 391 1 3/390 99.2% .8) 6/398.5% 9.

14、4) (未发表(97.699 91 (96.59 日本 90% 168 6 2/162 ) 98.8% (95100 总计15 559 7/559 5/552 ) (1.3%) 99.1% (98100 *以 10mm 为 TST 诊断标准。若m，则 TST 之特异性 活动性结核病的灵敏度 测美国、澳洲及日本之疑似的结核病患者（后续经痰液培养确认 3：灵敏度活动性结核病患者 试结果为阳性/有效测试本测试之特异性（95%CI） 用 15m为 99.1%。 对 本测试之灵敏度，是籍由检 有结核病）来评估。由于尚未有明确的标准去评估 LTBI，只好根据感染到该病的定义，即微 生物学培养发现结核分枝杆

15、菌，来作为合适的替代指标。而患者在抽血进行本测试前，所接 受的治疗必须少于 8 天。 表 3 摘要出两地于阳性患者之研究。 本测试对活动性结核病的整体 灵敏度为 89%（157/177） 。 表 研究 本测 者数 日本TB病患15 93%（8697%） 86/92 澳洲 24/27 93%（8697%） 美国 47/58 81%（6990%） 总计 157/177 89%（8390%） LIBI 的诊断 研究证明本测试能于不同族群诊断出 LTBI。一些主要的研究结果请见表 4。 4：QuantiFERON TB Gold IT于不同族群的LTBI研究 现 许多已发表的 表 研究 测试者总数 结

16、果与发 印度 医务工作者 极高。 本测试阳性为 40%， TST (Pai et al 2005)26 726 结核菌感染率 阳性（10mm）为 41%，两者相当一致，且 皆未有卡介苗接种的影响。 两测试皆发现风 险因子与年纪及从事医务工作的时间有关。 丹麦 HIV 患者 6) 5 590 (Brock et al 200 本测试测得HIV阳性患者之整体LTBI盛行率 为 4.6%（27/590） 。阳性结果与结核病风险 有关。 有 2 位检测为阳性的患者在 1 年内发 展为活动性结核病。结果不确定者（n=20， 3.4%）显著与 CD4 计数100L 有关。 住院儿童 l 2006)10 105 同 (Dogra et a 于疑似感染者曾与结核病患接触的儿童 时检测本测试及 TST。本测试阳性为 10.5%， TST 阳性（10mm）为 9.5%。两者结果于全 体有