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1、第二节 动物细胞工程,细胞融合与单克隆抗体技术,植物体细胞杂交过程示意图,动物细胞融合过程,细胞膜的流动性,灭活病毒、PEG、电激等,融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞,诱导的手段？,融合后细胞的类型？,AB杂种细胞遗传物质 有什么特点？,三种AA、AB、BB（A、B）,含两种生物的遗传物质,原理？,动物细胞融合技术的意义和应用,抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。,二、单克隆抗体,B淋巴细胞,效应B淋巴细胞,记忆B淋巴细胞,分化,抗体的传统生产方法,抗原,反复注射动物,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，
2、且抗体的特异性差、灵敏度低。,如何解决这个问题呢？,单克隆抗体！,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念,人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,单克隆抗体的概念,单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体,提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？,提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？,问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。,单克隆抗体的制备,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖,
3、杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,设计方案：,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞。,为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ 会有几种融合方式？ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？,BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）,（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活,获得产生相应抗体的B细胞,（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。,单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确
4、顺序连接起来。,单克隆抗体的应用,1.诊断试剂最广泛应用 准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。,“生物导弹” 单克隆抗体药物 单抗导向，药物为弹头,2.治疗疾病和运载药物,主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。,A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体,B,例：用动物细胞工程技术获取单克隆抗体， 下列实验
5、步骤中错误的是（ ）,下图为单克隆抗体的制备过程，请据图回答问题。,(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_类物质。 （2）d过程是一个_过程，该过程的进行常用_或_的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用_培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是_。,效应B,抗原,细胞融合,聚乙二醇 灭活的病毒,选择性,3,既能无限增殖又能产生特异性抗体,杂交瘤细胞,(4)在培养时通过_分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（至少2项） （5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是,特异性强、 灵敏度高 。,有丝,无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境。,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,本节小结,重点,
