细菌的生理、分布、消毒灭菌

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1、第二节 细菌的生理,一、细菌生长繁殖条件 1. 营养物质 水、碳源、氮源、生长因子等 2. pH 多数在7.27.6 3. 温度 最适温度37 4. 气体:CO2,O2 根据细菌对氧的要求不同将细菌分为四类: (1)专性需氧菌:结核杆菌 (2)微 需 氧 菌:幽门螺杆菌 (3)兼性厌氧菌:大多数病原菌 (4)专性厌氧菌:破伤风杆菌,二、细菌生长繁殖的方式、速度及规律 1. 细菌个体的生长繁殖 二分裂方式繁殖 2. 细菌群体的生长繁殖 生长曲线: 培养时间为横坐标,细菌数目的对数为纵坐标 (1) 迟缓期:适应阶段,几乎不繁殖,代谢活跃,体积增大,积极合成各种酶类及代谢产物,为繁殖做准备。 (2)

2、 对数期:研究细菌的生物学性状在此期 生物血特性典型,对外界因素的作用敏感 (3) 稳定期:细菌代谢产物多在此期产生 繁殖数与死亡数基本平衡 (4) 衰亡期:,三、细菌的人工培养,培养基 由人工方法配制,专供微生物生长繁殖使用的营养物制品 类型: 按照用途:基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基 按照物理形态:液体培养基、固体培养基、半固体培养基,细菌在培养基中的生长现象 1.液体培养基:,菌膜生长 枯草芽胞菌,混浊生长 大多数细菌,沉淀生长 链球菌,菌膜生长,混浊生长,沉淀生长,2. 固体培养基:,菌 落,菌 苔,菌 落,菌 苔,3.半固体培养基:,无鞭毛,有鞭毛,培养基

3、的用途,液体培养基:增菌 固体培养基:纯化,增菌 半固体培养基:动力检测,保种,细菌人工培养的意义 1.在医学中的应用:诊断和治疗;细菌鉴定和研究;生物制品。 2.在工农业生产中的应用 :发酵等 3.在基因工程中的应用 :外源DNA的重组,细菌代谢产物,(一)与致病性有关的代谢产物 (二)与治疗有关的代谢产物 (三)与鉴别细菌有关的代谢产物,三、细菌的代谢产物及意义 (一)与致病性有关的代谢产物 1热原质(pyrogen) 菌体中细胞壁的脂多糖,大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应,故名热原质 特点:耐高温;去除方法:250干烤、蒸馏等 2毒素 内毒素 外毒素 3侵袭性酶,

4、侵袭性酶 病原菌在代谢过程中合成的具有侵袭性的酶类,这些物质一般不损伤机体组织细胞,但能协助病原菌在机体内的定植、繁殖及扩散。常见的侵袭性酶主要有透明质酸酶、硫酸软骨素酶、链激酶、胶原酶等。它们的共性是使机体组织结构疏松,通透性增强,从而有助于病原菌及其毒素迅速扩散。,(二)与治疗有关的代谢产物 1.抗生素 能抑制或杀死某些微生物或肿瘤细胞的物质。 2.维生素 (三)与鉴别细菌有关的代谢产物 1.色素 水溶性和脂溶性 2.细菌素 具有抑菌作用的蛋白质, 只对与细菌素的产生菌有近缘关系的细菌 才有杀菌作用,抑菌范围窄,种和型特异性, 用于细菌分型。 3.糖分解产物 糖发酵实验 4.蛋白质分解产物

5、 VP实验 H2S实验,第三节 细菌的分布与消毒灭菌,一、细菌的分布 (一)在自然界的分布 水、空气、土壤 (二)正常人体的分布 正常菌群:指存在于机体一定部位,具有一定的种类和数量,在正常条件下对机体有利无害的微生物群或细菌群。 作用:生物拮抗作用 生物屏障,阻止外来细菌入侵 营养作用;参与营养物质代谢,促进营养的消化与吸收, 免疫促进作用;刺激机体免疫系统发育成熟,增强防御能力 抗衰老作用; 抑瘤作用。致癌物质转换为非致癌物质,条件致病菌:指正常菌群在某些非正常条件下(如机体免疫机能下降、使用抗菌药物、改变寄居部位等)也能导致机体致病。 菌群失调:指一定范围的正常菌群的种类和数量的比例发生

6、失调。 菌群失调症:指因菌群失调所导致的临床症状,又称二重感染。,二、消毒灭菌 1.消毒: 杀死物体上病原微生物,针对繁殖体,不一定杀死芽胞 2.灭菌: 杀灭物体上所有微生物(病原微生物,非病原微生物,细菌芽孢) 3.防腐: 抑制或防止微生物繁殖 4.无菌:没有活的微生物存在。 5.无菌操作: 防止微生物进入机体或物体的方法 6.清洁: 减少微生物达到安全状态,消毒灭菌的方法 1、物理灭菌法,物理灭菌法,温 度,日光、紫外线,滤过除菌,电辐射,超声波,低温,高温(热力),(1)热力灭菌 高温加热,干热灭菌法 热空气为导热介质,焚烧 烧灼 干烤(160170/2h) 红外线,巴氏消毒法 低温、营

7、养成分不被破坏 煮沸法 流动蒸气消毒法 间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法,湿热灭菌法 高温的水或水 蒸气为导热介质,同一温度下,湿热比干热效果好 穿透力、受热均匀、水分多蛋白易变性,潜热,高压蒸汽灭菌法 在高压蒸汽灭菌器里进行,在蒸汽不外溢的情况下,随着灭菌器压力的增高,温度液逐渐上升。适用于耐高温、不怕潮湿的物品灭菌,如基础培养基手术器械。121.3, 15-30分钟 最常用、最有效 间接灭菌法 100加热30分钟(杀死繁殖体,为杀死芽孢)后37温箱过夜(芽孢繁殖),再于100加热30分钟,重复3次,可达灭菌效果。适用于不耐高温的物品,如含有糖,鸡蛋,血清的培养基。,(2)辐射杀菌法 紫外线

8、杀菌作用与波长有关,200-300nm有杀菌作用 265266nm杀菌最强 原理:细菌DNA吸收紫外线后,DNA构型发生改变,从而干扰DNA复制 ,导致细菌死亡 局限性:穿透力弱,室内空气的消毒或物品表面的消毒 如手术室,微生物室 电离辐射 X、射线 原理:水分被解离为H+和OH-,为强烈的氧化剂和还原剂,可破坏细菌核酸,酶,蛋白质,是细菌死亡,(3)滤过除菌法 采取机械性阻流的方法,利用滤菌器除去液体或空气中细菌。滤菌器含有微细小孔,小于孔径物质可以通过,故可除菌。但衣原体、立克次体、病毒可以通过滤菌器。适用于不耐热、不能用化学方法消毒的液体。如血清等 (4)超声波杀菌法 裂解细菌 (5)干燥与低温抑菌法 使细菌脱水,蛋白变性,盐类浓缩,从而妨碍其代谢生长,繁殖。低温抑制细菌生长繁殖。 冷冻真空干燥保存菌种,2、化学消毒灭菌法(外用) 常用消毒剂的杀菌机制: 使菌体蛋白变性或凝固; 干扰微生物酶系统和影响其代谢; 损伤细胞膜或改变其通透性。,影响消毒灭菌效果的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物,噬菌体,噬菌体是感染细菌,真菌等微生物的病毒。因部分噬菌体能引起宿主细胞裂解,故称噬菌体。其个体微小,结构简单,只含一种核酸,严格胞内寄生,复制方式繁殖。 感染过程:吸附、穿入、生物合成、装配、成熟、释放,噬菌体在宿主菌体内的增殖过程,谢 谢!,

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