实验五-骨髓细胞检查课件

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1、,骨 髓 细 胞 形态学检 查,骨髓检查是血液系统等疾病的诊断、鉴别诊断及治疗中有相当重要的地位,它包括骨髓细胞形态学检查、骨髓组织活检、血细胞免疫标记以及血细胞染色体和分子生物学检测。,骨髓细胞形态学是骨髓检查中最常用,最基本的方法。,骨髓检查适应症,不明原因的外周血细胞数量及成分异常 不明原因发热,肝、脾、淋巴结肿大 不明原因骨痛、骨质破坏、黄疸、紫癜、肾功异常 血液病疗效观察,骨髓检查禁忌症,由于凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病 晚期妊娠 穿刺部位有炎症或畸形应避开,骨髓穿刺术,穿刺部位 髂后上棘:第五腰椎向上3cm处。 髂前上棘:顶端后约1-2cm处。 胸骨:胸骨中线,相当第二肋间水平

2、的胸 骨体上端。 小于3岁的小儿选择胫骨内侧,操作步骤 选定体位 定位 消毒 局部麻醉 进针穿刺 抽取骨髓液 涂片 染色,骨髓穿刺方法,观看视屏,如何检查?,一、检查的步骤 首先用低倍镜(10)观察全片,然后再用油镜(100)分系统观察,才能获得全面、正确的实验数据。 1. 低倍镜检查: 取材、制片、染色 骨髓增生程度 巨核细胞计数、分类 注意体积巨大或成堆分布细胞,低倍镜(10)检查,(1)观察全片情况 观察涂片染色是否满意,取材是否是真正 的骨髓液等。 骨髓涂片: 取材:骨髓小粒、 脂肪小滴 制片:厚薄, 头、体、 尾分布 染色:细胞着色 情况,(2)判断有核细胞增生程度 选择细胞分布均匀

3、处,根据成熟红细胞与 有核细胞的比例来估计骨髓有核细胞的增 生程度。 骨髓增生度分级 增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生减低 增生明显减低,骨髓有核细胞增生度估计标准,增生程度数 成熟红细胞: 有核细胞均数/ 高倍镜视野 有核细胞,增生极度活跃 1:1 100 增生明显活跃 10:1 50100 增生活跃 20:1 2050 增生减低 50:1 5 10 增生极度减低 200:1 5,3、注意巨核细胞的数量,在一般的骨髓检查报告单上可凭经验分为易找到、不易找到、增多三级记述。但在巨核细胞特别增多或疑为特发性血小板减少性紫癜时,则应作全片巨核细胞计数,并分类。 低倍镜计数;油镜分类 ;

4、骨髓涂片上可有7133个,平均35个。,4、观察骨髓片边缘和尾部,注意寻找有无体积较大的或成堆的特殊病理细胞,如转移癌细胞、多核巨细胞等。,油镜检查,在低倍镜观察的基础上,选择较满意区域,换用油镜观察。主要观察各细胞系的增生情况、各阶段细胞的组成和形态结构,并作细胞分类。 1、骨髓细胞分类:先浏览涂片上细胞 的大概情况,看各类细胞的形态特 点、是否容易识别,然后再分类, 要求计数200500个有核细胞。 2、各细胞系形态观察。,1、骨髓细胞分类,(1) 有核细胞分类: 计数200-500个有核细胞,计算各系统各阶 段细胞百分率。 巨核细胞单独计数 (2) 计数粒红比例(GE) (3) 观察各系

5、细胞形态有无异常 (4) 观察有无其他特殊细胞及寄生虫,2、各细胞系形态观察,仔细观察各系各阶段细胞的形态是否正常 (1)粒细胞系:胞体大小,胞核形态及染色质情况,胞浆颜色以及是否有空泡、中毒颗粒、各种包涵体、吞噬物等。核 浆比例以及有无核浆发育不平衡。 (2)红细胞系:幼红细胞有无巨幼样改变,胞核有无不规则、固 缩、破裂、胞浆是否有嗜碱性点彩、Howell-Jolly小体等,有无核浆发育不平衡。并同时观察成熟红细胞的大小、形态、染色、结构等有无异常改变。有无人为造成的红细胞变形。 (3)巨核细胞系:有无小巨核细胞、高分叶核或多个散在小核巨核细胞等,同时应注意血小板的数量、大小、聚集性、形态特

6、 征及颗粒变化等。,(4)单核细胞、淋巴细胞、浆细胞等有无形态和数量改变。 有无幼稚细胞。 (5)非造血细胞,如组织细胞、组织嗜碱细胞、内皮细胞、 吞噬细胞等,是否有形态和数量的异常。 (6)是否出现特殊的病理细胞,如转移瘤细胞、恶性组织 细胞、骨髓瘤细胞等。 (7)注意有无血液寄生虫,如疟原虫、黑热病小体、弓形 体等。,结果计算和报告单的书写,(一)结果计算 计算出各系和各阶段细胞占有核细胞总数的百分数。 再算出各阶段粒细胞百分数的总和与各阶段幼红细 胞百分数之总和,将前者除以后者即得出粒:红比 值(G:E)。这代表粒系和红系的相对数量关系, 正常人约为24:1。 如有核细胞增生亢进,G:E

7、增大,则为粒系增多。 如有核细胞增生低下,G:E增大,则为红系减少。,(二)报告单 的填写内容 1、骨髓特征 (1)对取材、涂片、染色的评价。 (2)骨髓有核细胞的增生程度和粒红比值。 (3)分别叙述各系细胞的情况,一般粒、红两个主要系应说明其 增生情况(总数多少)、成熟情况(系内各阶段细胞的比例 是否大致正常,是否有成熟障碍)和细胞形态有无异常(必 要时作扼要描述,对成熟红细胞形态一定要描述)。其他系 则只简单提一下,但如有明显异常改变,则应如粒、红系那 样描述。 (4)巨核细胞和血小板的数量和形态是从全片来评估。 (5)是否见到特殊的病理细胞和寄生虫。 2、报告血涂片检查结果 3、报告组织

8、化学染色结果 4、填写诊断意见 综合骨髓象、血象、结合临床资料,客观地向临床提出细胞学诊 断意见或可供临床参考的意见。,填写骨髓报告,诊断意见 综合骨髓象、血象和细胞化学所见 意见: 肯定性诊断- 各种白血病、巨幼细胞性贫血、MM、 骨髓转移癌、戈谢病、尼曼-匹克病等 支持性诊断- 缺铁性贫血、再障、溶贫等可建议作相 应检查,续上页,可疑性诊断- 难治性贫血等 排除性诊断- ITP、类白血病 形态学描写- 骨髓象有改变,但提不出性质 诊断性意见,建议动态观察 对比意见- 几次骨穿结果对比,正常骨髓细胞组成,骨髓细胞主要包括: 粒系 红系 巨核细胞系 淋巴细胞系 单核细胞系 浆细胞系 每个系统又

9、分为原始、幼稚、成熟三个阶段,因粒系和红系细胞形态比较复杂,其幼稚阶段又分为早、中、晚三个阶段。,细胞形态演变的一般规律,血细胞由原始细胞逐渐发育为成熟细胞,是循序渐进的成熟过程,具有一定的规律性。 一、细胞体积 细胞体积由大逐渐变小。巨核细胞系除外。 (1) 大小:大小 巨核细胞小大; 早幼粒原粒; (2) 形态:圆椭圆; 圆不规则,细胞形态演变的一般规律,二、细胞质 量:由少多;除淋巴系外。 染色: 颜色由深蓝色粉红色;单核、淋巴例外 颗粒:由无有;红系细胞无颗粒 (非特异性颗粒-特异性颗粒),细胞形态演变的一般规律,三、细胞核 (1) 大小:大小 巨核细胞 小大; 红细胞 大小,核最后消

10、失 (2)核形:一般由圆形或卵圆形凹陷甚至分叶, (3)染色质:细致粗糙; 疏松致密浓缩成块; (4)核仁:清晰模糊消失 (5)核膜:不明显明显 四、胞核核/细胞质之比 大小 核染色质及核仁是衡量血细胞是否处于原始和幼稚阶段的重要客观指标之一。,正常骨髓细胞的形态特征,血象和骨髓象的细胞形态学检查是诊断 血液系统疾病、观察疗效的重要手段之一, 正常血细胞形态学是血象和骨髓象检验的基 础,下面逐一介绍瑞氏染色后光学显微镜下 正常的血细胞形态。,各阶段红细胞的形态特征,(一)原红细胞,胞体大小约为成熟红细胞的23倍,瘤状突出,染深蓝色,不透明,有油画感,核周有淡染区,染色质呈紫红色粗颗粒状,核仁呈

11、暗蓝色,大小不一,各阶段红细胞的形态特征,(二)早幼红细胞 胞体比原红细胞略小,胞浆增多,染色质较原红细胞粗糙,核仁模糊或消失。,各阶段红细胞的形态特征,(三)中幼红细胞 胞体进一步变小,胞浆量相对较多,由于血红蛋白形成逐渐增多,可呈不同程度的嗜多色性。染色质粗密成块,核仁已完全消失。,各阶段红细胞的形态特征,(四) 晚幼红细胞 胞体大小已比较接近成熟红细胞,胞浆量多染浅灰或浅红色。染色质致密坚实,结构不能分辨,呈紫黑色一团,可见胞核破碎状或脱出胞质外的现象。,红系细胞各阶段形态,二、粒系细胞发育顺序,原粒细胞 早幼粒细胞 中幼粒细胞 晚幼粒细胞 杆状核粒细胞 分叶核粒细胞,各阶段粒细胞的形态

12、特征,(一)原粒细胞,胞体大小约为成熟红细胞的1、52、5倍,胞浆染天蓝色,透明,无颗粒、无核周淡染区,染色质为细砂粒状,均匀,核仁25个,较小,染淡蓝色。,各阶段粒细胞的形态特征,(二)早幼粒细胞 胞体较原粒细胞略大,胞浆量较多,淡蓝或深蓝色,含有紫红色非特异性嗜天青颗粒,可覆盖在核上。染色质开始聚集,较粗糙,呈颗粒状,排列较紧密。一般核仁模糊或消失。,中幼粒细胞(嗜中性),各阶段粒细胞的形态特征,(三)中幼粒细胞,各阶段粒细胞的形态特征,(四)晚幼粒细胞 (中性),各阶段粒细胞的形态特征,(四)晚幼粒细胞,各阶段粒细胞的形态特征,(五)杆状核粒细胞(中性),各阶段粒细胞的形态特征,(五)杆

13、状核粒细胞,各阶段粒细胞的形态特征,(六) 分叶核粒细胞(中性),各阶段粒细胞的形态特征,(六) 分叶核粒细胞,三、巨核细胞系细胞发育顺序,原巨核细胞 幼巨核细胞 巨核细胞 (颗粒型) (产生血小板型) (裸核型),血小板,各阶段巨核细胞的形态特征,(三)巨核细胞,四、单核细胞系细胞发育顺序,原单核细胞 幼单核细胞 单核细胞 巨噬细胞,各阶段单核细胞的形态特征,(三)单核细胞,五、淋巴细胞系细胞发育顺序,原淋巴细胞 幼淋巴细胞 淋巴细胞 (大淋巴细胞) (小淋巴细胞),各阶段淋巴细胞的形态特征,淋巴细胞 (大淋巴细胞),淋巴细胞(小淋巴细胞),六、浆细胞系细胞发育顺序,原浆细胞 幼浆细胞 浆细

14、胞 (火焰细胞),各阶段浆细胞的形态特征,浆细胞 1、胞体:直径815um,椭圆形或不规则形 。 2、胞质:量丰富,呈深蓝或紫蓝色,不透明,有 泡沫感,核周有明显淡染区,浆中常 有小空泡,一般无颗粒,胞质边缘多 不规则,可有刺状突出,胞质常呈飘 (火焰细胞) 扬的旗帜样。 3、胞核:偏位,较小,呈圆或椭圆形,约占细胞 的1/3。 染色质粗密,凝成大块,常呈车辐状排列。 核仁消失,疾病分类:,1.红细胞疾病 2.白细胞疾病 3.血小板疾病,一.红细胞疾病:根据骨髓象分类,缺铁性贫血(IDA),概念:体内铁储存耗尽而缺乏引起的贫血 临床表现:贫血;上皮组织的变化,如口角炎、舌炎、皮肤干燥、毛发无光

15、泽,儿童可见精神行为异常 病因:铁摄入不足,铁丢失过多,血象:小细胞低色素性贫血,红细胞大小不等,以小细胞为主,中心浅染区扩大;白细胞、血小板一般正常。 骨髓象:增生活跃或明显活跃,以红系中、晚幼增生为主,粒红比值降低,幼红细胞体积小,胞浆蓝而少,边缘不整,呈锯齿状或如破布,“核老浆幼”,其他检查:血清铁蛋白减低 血清铁减少 骨髓铁染色阴性,巨幼细胞性贫血(MA),病因:叶酸缺乏、VB12缺乏导致DNA合成障碍,细胞分裂受阻,细胞巨幼样变 临床表现:贫血的一般表现;食欲不振、腹胀、腹泻或便秘,“牛肉舌”;周围神经病变,如四肢远端麻木,血象:大细胞正色素性贫血,红细胞大小不等,可见巨红细胞、点彩红细胞、HoweelJ

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