生化提取组实验操作考核细则全国高职高专生物技术技能大赛 一、比赛操作项目（1）项目名称缓冲溶液的配制2）操作内容配制pH值为7.5的磷酸缓冲溶液100mL配制浓度为1/15mol/L磷酸氢二钠（，分子量为358）溶液和1/15mol/L磷酸二氢钾(,分子量为136)溶液，取85mL上述磷酸氢二钠溶液和15mL 磷酸二氢钾溶液，混合均匀，记录、贴标、贮藏备用3）操作要求试剂称取和缓冲溶液配制快速、准确；选择正确量程的天平、容器；称量过程正确，读数准确；溶解操作规范；溶液转移正确；定容准确；溶液量取混匀操作正确；贴标签书写简洁明确；按顺序将实验器具放回原处，垃圾丢进垃圾桶等 二、竞赛操作材料单序号名称规格数量备注01十二水合磷酸氢二钠AR500g02磷酸二氢钾AR500g03蒸馏水若干04分析天平0.0001g105电炉106石棉网107烧杯50ml208250ml211量筒100ml112小口试剂瓶500ml313玻 棒粗114细115容量瓶100 ml216pH试纸广泛1包17胶头滴管218洗瓶250 ml119药勺1 三、评分标准 （总分100分） 被评学生抽签编号： 项目名称缓冲溶液配置考核环节考核项目配分评分项目每项分值实际扣分操作得分操作准备操作流程书写101．称取磷酸氢二钠 克，磷酸二氢钾 克22．溶解 3．转移4．定容5．混合、鉴定、贴标签器材准备41．器皿洗涤22．器皿检漏材料准备试剂称取101．天平水平调节22. 调零3.用药匙加样时，样品不能撒落4．接近取样终点时，加样不能瞬间过多5. 称量，并记录配置过程溶解操作91．磷酸二氢钾加热溶解32. 电炉使用正确3. 溶解搅拌方法正确，玻棒不碰壁碰底，一个方向搅拌转移操作101．转移时做到“二靠”2.52. 转移过程中没有液体流出容量瓶外3. 用蒸馏水洗涤烧杯至少三次，洗涤液不过量4. 磷酸二氢钾冷却后转移，定容定容操作91．定容时，加蒸馏水不超过容量瓶的2/3体积时先摇匀，再继续加水32．等瓶颈处液体流下后再定容至刻度线，凹液面与刻度线平齐3．混匀，上下颠倒不少于5次混合操作41. 液体溶液量取正确22. 混匀结果检查41． 用玻璃棒沾取少量溶液到试纸上，显色后与比色卡对照22． 鉴定结果pH值为7.5标示与记录61. 溶液名称1.52. 规格3. 配制者4. 日期清场工作用具洗涤41．器皿洗涤22．器具清理环境卫生21．工作台卫生干净12．余液分类收集实验记录数据记录31. 称量准确，并记录少1扣1.52. 检查结果记录其他操作操作时间10共60分钟，每延长1分钟扣2分，超过5分钟后必须结束操作2操作文明101．听从裁判的指示22. 实验过程中不能相互交流3. 保持实验室安静，不吵闹4.无样品、试剂等的浪费5.无器皿损坏操作安全5出现不正常操作2.5合计注：单个评分要素扣分不得超过该项最大配分值。
采用扣分法进行打分若操作符合标准则在该项相应的“扣分项”栏打“ √”，若不符合则打“×”，每项最低为0分，部分错误可以在该项中酌情扣分，总成绩最后汇总裁判员签字： 全国高职高专生物技术技能大赛一、比赛操作项目（1）项目名称提取样品的离心分离2）操作内容调节牛奶的pH值到4.7，通过离心法得到酪蛋白粗品取30mL牛奶加热至40℃在搅拌下慢慢加入预热至40℃，pH4.7的醋酸缓冲液约30mL用精密pH试纸调pH至4.7将上述悬浮液冷却至室温，离心15分钟（3000 r /min），弃去清液，用乙醇洗涤后得酪蛋白粗制品，计算得率，记录、收集贴标签3）操作要求牛奶与缓冲溶液量取快速、准确；牛奶与缓冲溶液加热到要求温度；混合溶液的pH值调节准确；搅拌充分，沉淀完全；冷却后，离心平衡正确；选择正确的转速和离心时间；清洗实验器具，并放回原处，垃圾丢进垃圾桶等 二、竞赛操作材料单序号名称规格数量备注01牛奶市售100ml02醋酸——醋酸钠缓冲液0．2mol/LpH值4.7300mL03乙醇95%300mL04蒸馏水若干05恒温水浴锅40℃106托盘天平107离心机08离心管20mL、50mL609电子天平0.01110长柄药勺111烧杯250ml1100ml212量筒100ml213玻 棒粗1细114水银温度计100℃215铁架台1铁圈216胶头滴管317pH试纸广泛1包精密1包18标签纸1张19棉线若干20广口瓶100 ml1 三、评分标准 （总分100分） 被评学生抽签编号： 项目名称提取样品的离心分离考核环节考核项目配分评分项目每项分值实际扣分操作得分操作准备操作流程书写101．量取牛奶和缓冲溶液各30ml2.52．40℃条件下，混合均匀,调节pH值到4.73．冷却后于3000r/min,离心15min,弃去上清夜4．沉淀洗涤、备用器材选择41．器皿的洗涤22．离心管水洗后用95%酒精洗涤，并晾干材料准备试液量取41．量筒正确使用（沿壁）22．量取准确，并记录试液预热41．温度计放置合理22．加热充分沉淀过程试液混合91．缓冲溶液加入到牛奶中32．边加边搅拌,搅拌时,玻棒不碰烧杯壁和底部3．保持40℃的条件混匀pH值控制2pH值保持在4.72离心过程离心前91．混合液冷却至室温，带盖称量离心管32．装管损失不明显3．平衡好离心121．离心管放置正确32．转速调节正确3．离心时间调节正确4．运行过程稳定离心后61．弃去上层清夜 22．乙醇洗涤后倾去3．称量产品收集沉淀取出21.用药勺取出沉淀22.放入指定容器。
标签与记录41. 产品名称12. 规格3. 操作者4. 日期清场工作用具洗涤2器皿洗涤2环境卫生21．工作台卫生干净；12．剩余药品试剂收集并正确处理实验记录数据记录31. 称量记录少1扣1.52. 鉴定结果记录其他操作操作时间10共60分钟，每延长1分钟扣2分，超过5分钟后必须结束操作2操作文明81．听从裁判的指示22. 实验过程中不能相互交流3.无样品、试剂等的浪费4.无器皿损坏操作安全71. 安全用水浴锅3.52. 安全用电合计注：单个评分要素扣分不得超过该项最大配分值采用扣分法进行打分若操作符合标准则在该项相应的“扣分项”栏打“ √”，若不符合则打“×”，每项最低为0分，部分错误可以在该项中酌情扣分，总成绩最后汇总裁判员签字： 全国高职高专生物技术技能大赛一、比赛操作项目（1）项目名称大孔树脂的装柱与平衡2）操作内容量取适量大孔吸附树脂，用湿法装柱并平衡好取预先处理好的大孔吸附树脂AB-8若干，通过三角漏斗或分液漏斗灌注到吸附柱中，在装柱过程中，尽量避免出现气泡和吸附柱断层，装好后用蒸馏水平衡好，注意记录、贴标3）操作要求树脂称取快速、准确；湿法装柱方法正确；装柱操作规范；平衡时操作完整、规范，平衡时蠕动泵的转速，平衡时间要适当；按顺序拆除实验器具，并放回原处，垃圾丢进垃圾桶等。
二、实验材料单序号名称规格数量备注01AB-8 市售100g02蒸馏水若干03蠕动泵BT-100104铁架台2夹105烧杯500ml306量筒500ml107三角漏斗100ml108试管20 ml109橡皮管细若干10玻 棒粗111层析柱Φ26×45112直尺1 三、评分标准 （总分100分） 被评学生抽签编号： 项目名称大孔树脂的装柱与平衡考核环节考核项目配分评分项目每项扣分实际扣分操作得分操作准备操作流程书写101．量取大孔吸附树脂2.52．搭好吸附柱3．湿法装柱4．柱平衡器材准备91．玻璃器皿的首次清洗32．器皿的处理（检漏）3．床体积测算器材搭建色谱柱91．装置连接正确32．安装顺序合理3．整体搭建美观操作准备装柱体积测量51． 床层测量准确，并记录2． 装柱树脂量取，并记录2.5装柱原料加入121．树脂湿度适当32．加入时速度均匀3．装柱时若有气泡产生，需反冲操作消除4．没有明显树脂散落在柱外平衡平衡过程91．色谱柱密封不漏气、水32．蠕动泵的转速为1-2rpm3.流出液与洗脱液颜色相同标签与记录41. 色谱柱名称：树脂柱AB-812. 规格：26×实际量取高度3. 操作者（抽签编号）4. 日期裁判评定结果鉴定61.无气泡。