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1、医学论文-紫外分光光度法检测保健食品中大豆异黄酮的含量【关键词】 光度【摘要】 目的： 以大豆苷元为标准品，用紫外分光光度法检测三种市售保健品中大豆异黄酮总浓度. 方法： 保健品用甲醇+水（80+20, V/V）在 70超声提取 40 min，以大豆中的活性成分大豆苷元为标准品，检测波长 254 nm，计算样品含量. 结果： 回归方程为 Y=0.138X-0.0056， R2=0.9994,线性范围：0.86.4 mg/L,平均回收率为 99.32%, RSD=0.044%. 结论： 本方法适用于检测保健食品中大豆异黄酮含量. 【关键词】 保健食品；大豆异黄酮；大豆苷元；紫外分光光度0 引言大
2、豆异黄酮含量测定的方法很多1，主要有高效液相色谱法（HPLC），高效液相色谱质谱法（HPLCMS）、气相色谱法（GC）和毛细管电泳法. 我们采用的紫外分光光度法与其它方法相比，简便快捷，且对仪器设备要求不高，目前用此方法测定保健食品中大豆异黄酮含量少见报道.1 材料和方法1.1 材料TU9100 型紫外分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）；TU1800 紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；RE52AA 旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），KQ100 型超声机（昆山市超声仪器有限公司）. 大豆苷元标准品（中国药品生物制品检定所 1502200101）. 市售保健品 3 种：安睡美（华
3、博众生物科技有限公司）；天雌（四川旭化华制药有限公司）；欣靓（华北制药康欣有限公司）.甲醇（分析纯）.氯仿（分析纯）.1.2 方法1.2.1 保健品中大豆异黄酮提取与分离取保健品 4 粒，精密称质量，置 100 mL 圆底烧瓶中，加 800 mL/L 甲醇 70 mL 超声提取 40 min，趁热抽滤,甲醇提取液在 35减压蒸去甲醇，然后在 45减压蒸去水，再加入 20 mL 甲醇溶解作为供试品溶液备用.1.2.2 大豆异黄酮苷元的检验1.2.2.1 薄层色谱用硅胶 GF254 薄层板，以氯仿无水甲醇（100.5）为展开剂，用标准品和样品点样（无水甲醇溶解），在 254 nm 紫外灯下检测，见
4、图1. 1.2.2.2 紫外分光光度检测用 TU1800 紫外可见分光光度计在波段 200400 nm 条件下分别检测无水甲醇、标准品、样品(图 26).2 结果2.1 标准品溶液的配制及标准曲线的制备2精确称取大豆苷元标准品2.0 mg，置于 25 mL 容量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻线，摇匀. 分别精密吸取标准品溶液 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.6, 0.8 mL，置于 10 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻线，摇匀. 以甲醇为空白，在 254 nm 的波长处测定 A 值. 以浓度为横坐标，A 值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=0.138X -0.0056， R2=0.
5、9994，线性范围 0.86.4 mg/L.2.2 含量测定精确量取供试品溶液 0.01 mL，用无水甲醇稀释 1000 倍到 10 mL 定容，用 TU9100 型紫外分光光度计在波长 254 nm 处测定 A 值 3 次，取平均值. 测定结果，根据标准曲线计算样品含量（表 1）.表 1 三种样品的含量（略）2.3 精密度实验 同一供试品溶液（天雌）0.01 mL，用无水甲醇稀释 1000倍到 10 mL 定容，用 TU9100 型紫外分光光度计在波长 254 nm 处连续测定 6 次A 值，分别为 0.102, 0.099, 0.100, 0.100, 0.099, 0.096，结果RSD
6、=0.133%，说明仪器精密度较好.2.4 加样回收率实验3向已知含量的样品（天雌）中加入不同量的大豆苷元标准品，按 2.2 的方法进行含量测定，计算回收率，结果见表 2. 回收率的平均值为 99.32%， RSD=0.044%，表明方法的回收率较好.表 2 回收率测定结果（略）3 讨论由于配置的供测品使用甲醇为溶剂，大豆异黄酮放置过程中可能有分解，所以进行了稳定性实验. 将同一供试品溶液（天雌）每隔 30 min 测定 1 次 A 值，6 次测定结果分别为 0.102, 0.099, 0.097, 0.095, 0.096, 0.092, RSD=0.25%，表明供试品溶液在 3 h 内稳定.4 结论紫外分光光度法测定保健食品中大豆异黄酮含量与其它方法比较简便快捷，对仪器设备要求不高,重现性好, 适用于保健食品中大豆异黄酮含量的测定.【参考文献】1 常凤启,秦振顺,韩会新,等. 保健食品中大豆异黄酮的测定方法J. 中国卫生检验杂志,2004,14(4)：430-431.2 张玉梅,孙学斌,高旭年，等. 紫外分光光度法测定大豆异总黄酮的含量J. 中国食品卫生杂志,2000,12(4):7-9.3 许勇,黄晓瑾,陆波. 紫外分光光度法测定复方银杏叶胶囊总黄酮总量J. 中国医药研究,2004,2 (8):63-64.
