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1、消毒灭菌效果及环境卫生学的 监测,院感科,监测内容,1、灭菌效果的监测 2、紫外线消毒的效果监测 3、手卫生效果的监测方法 4、物体表面的消毒效果监测 5、空气的消毒效果监测 6、消毒液的监测 7、血液透析水和透析液染菌量监测 8、内镜消毒效果监测 9、清洁用品的消毒效果监测 10、致病菌的检测,1、灭菌效果的监测,1、压力蒸汽灭菌效果的监测 压力蒸汽灭菌效果的监测： 包括物理监测法、化学监测法、生物监测法和B-D测试,标准生物测试包的制作方法： a)标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢，菌片含菌及抗力符合国家有关标准； b)标准测试包的制作：由l6条41cm66cm的全棉手术巾制成。制作方法：将每
2、条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23 cm23 cm15cm的测试包；,培养方法： 经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56士l培养7d(自含式生物指示物按产品说明书执行)，观察培养结果；,结果判定： 阳性对照组培养阳性阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格，阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致，自含式生物指示物不需要做阴性对照；,小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌包制作生
3、物测试包或生物PCD，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放；,采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将一支生物指示物，置于空载的灭菌器内，经一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观察结果： 可使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测；,注意事项： 1)监测所用菌片或自含式菌管应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在有效期内使用； 2)如果ld内进行多次生物监测，且生物指示剂为同一批号，则只设一次阳性对照即可。,B-D测试方法 a)B-D测试包的制作方法B-D测试包由l00脱脂纯棉布或100全棉手术巾折叠成长30cm士 2cm
4、、宽25cm2cm、高25cm28cm大小的布包；将专用BD测试纸，放入上述布包的中间；制成的B-D测试包的重量要求为4kg02 k9。或采用一次性使用或反复使用的B-D测试包。,B-D测试方法 测试前先预热灭菌器，将B-D测试包水平放于灭菌柜内灭菌车的前底层，靠近柜门与排气口底前方；柜内除测试包外无任何物品：在134温度下，时间不超过3.5min，取出测试包。观察B-D测试纸颜色变化。 结果判定B-D测试纸均匀一致变色说明B-D试验通过，灭菌器可以使用；变色不均说明B-D试验失败。可再重复一次B-D测试，合格，灭菌器可以使用；不合格,需检查B-D测试失败原因，直至B-D测试通过后该灭菌器方能
5、使用。,2、紫外线消毒的效果监测,紫外线辐照计测定法开启紫外线灯5min后，将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离lm的中央处，特殊紫外线灯在推荐使用的距离处测定，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯的辐照度值。,紫外线强度照射指示卡监测法 开启紫外线灯5min后，将指示卡置于紫外灯下垂直距离lm处，有图案一面朝上，照射lmin，紫外线照射后，观察指示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。,结果判定 普通30 W直管型紫外线灯，新灯管的辐照强度应符合GBl9258要求；使用中紫外线灯辐照强度70W/cm2为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度l80W
6、cm2为合格。 注意事项 测定时电压220 V5 V，温度200C25，相对湿度60，紫外线辐照计应在计量部门检定的有效期内使用；指示卡应获得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在有效期内使用。,3、手卫生效果的监测方法,采样时间 ： 在接触患者、进行诊疗活动前采样。采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。,检测方法 将采样管在混匀器上振荡20秒或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0 ml待检样品接
7、种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内加入已溶化的4548的营养琼脂15ml18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置361温箱培养48h，计数菌落数。细菌菌落总数计算方法：细菌菌落总数（cfu/cm2）平板上菌落数X 稀释倍数/采样面积（cm2）,手消毒效果应达到如下相应要求:a)卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应10cfu/cm2。b)外科手消毒，监测的细菌菌落总数应5cfu/cm2。,4、物体表面的消毒效果监测,采样时间 在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。 采样方法 用5cm 5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03 molL磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐水采样液
8、的棉拭子l支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子,连续采样4个规格板面积.,被采表面30m2设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁lm处。将普通营养琼脂平皿(90 mm)放置各采样点，采样高度为距地面0.8m1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。,将送检平皿置36士l恒温箱培养48h，计数菌落数。若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。,结果判定非洁净手术部(室)、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数4CFU(15min.直径9cm平皿)。儿科病房、母婴同
9、室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心(室)、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数4 CFU(5min.直径9cm平皿) 注意事项 采样前，关闭门、窗，在无人走动的情况下，静止10min采样。,6、消毒液的监测,常用消毒液有效成分含量测定 库存消毒剂的有效成分含量依照产品企业标准进行检测；使用中消毒液的有效浓度测定可用上述方法，也可使用经国家卫生行政部门批准的消毒剂浓度试纸(卡)进行监测。,使用中消毒液染菌量测定监测方法用无菌吸管按无菌操作方法吸取l.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀。,中和剂的选择,84
10、液：硫代硫酸钠肉汤 碘伏：硫代硫酸钠肉汤 酒精：卵磷脂肉汤 无菌物品：营养肉汤 内镜：磷酸盐PBS 万金消毒液：中和剂肉汤,监测方法： 用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液l.0mL接种平皿，将冷至4045的熔化营养琼脂培养基每皿倾注10 mL20 mL，36l恒温箱培养72h，计数菌落数；怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。消毒液染菌量计算见式(A.4)： 消毒液染菌量(CFUmL)=平均每皿菌落数10稀释倍数 (A4),结果判断 使用中灭菌用消毒液：无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量；l0FumL，其他使用中消毒液染菌量l00umL 注意事项 采样后4h内检测。,7、血液
11、透析水和透析液染菌量监测,采样方法：用两支无菌试管分别采取透析用水（在水进入血液透析机的位置收集标本）和透析液（在透析液进入透析器的位置收集标本）,监测方法： 采样后立即送往实验室，用无菌吸管吸取1ml待检样品，接种于灭菌平皿内，每一样品接种2个平皿 平皿内加入45 普通营养琼脂1518ml，边倾注边摇匀待琼脂凝固后，置36 1 恒温箱培养48h。 结果计数菌落数标准： 透析用水和透析液的细菌菌落总数必须 200cfu/ ml并不得检出致病微生物,8、内镜消毒效果监测,采样方法：用无菌注射器抽取10ml缓冲液，采内镜的内腔面，由内镜活检口入口注入缓冲液，由活检口出口收集缓冲液 监测方法： 活菌
12、计数：取0.5ml收集的缓冲液，加入直径9cm无菌平皿，倒入溶化的4548 的营养琼脂1518ml，待凝固，37 培养48h后计算细菌总数 结果：（消毒内镜标准：细菌总数20cfu/件）无菌内镜：无菌生长）,9、清洁用品的消毒效果监测,采样时间 消毒后、使用前进行采样。采样方法 布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取1cm3cm，直接投入5mL含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。检测方法 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病茵。 结果判定 未检出致病菌为消毒合格,10、致病菌的检测,当怀疑被某致病菌污染时，或怀疑医院感染与某致病菌有关时，致病菌的检测依据污染情况进行相
13、应指标菌的检测。检测方法参考相关标准。,2015年8-12月份的消毒灭菌效果及环境卫生学的监测内容由各科室感控员完成。时间定在每月20号以后的第一周。各科室采样的内容已发到以下邮箱：QQ：2028360093 平一医感控科 密码：gk6223036 评审准备期间将作为院感科等级评审资料发放平台，请大家不要修改密码。,考核办法：由手术室欧阳锋与供应室的王丹随机对大家进行考核。 考核方法：各位按监测内容先到检验科领取培养基，由监考人员随机抽取10个科室进行考核。评审期内可能需要大家共同完成的内容比较多，希望大家能够积极主动配合好。,2015年监测计划及监测流程发各科室保存，要求所有感控员掌握。目标性监测内容已分别与科室负责人联系沟通好，请各相关科室感控员积极参与此项工作。,防护用品,每个科室至少准备一套 个人防护用品 口罩 手套 隔离衣，防护服，防水围裙护目镜，面罩 帽子胶鞋，鞋套,隔离衣/防护服/防水围裙,隔离衣,隔离衣,防护服,手术衣,隔离衣,防水围裙,眼罩与面罩,眼罩,面罩,44,手套,橡胶手套 （清洁/无菌、有粉/无粉）,其他手套 （薄膜、隔热、家政）,愿我们共同努力 推进医院感染管理工作,2015.8,
