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1、,（二）不染色标本检查法和染色标本检查法,不染色 标本,染色 标本,单染色,复染色,特殊染色,鞭毛、芽孢、荚膜,革兰染色、抗酸、albert,动力观察,（1）压滴法,1.不染色标本检查法,（2）悬滴法,镜检,2.染色标本检查法,细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类。,革兰氏染色（Gram stain),原理： 步骤： 意义： 鉴别细菌 选择抗菌药物 研究细菌致病性,结晶紫1min,卢戈碘 1min,95%乙 醇30s,稀释复红 30s,革兰染色,革兰染色结果,油镜下模式图 1000,结果：革兰阳性（G）菌呈蓝紫色 革兰阴性（G）菌呈红色原理
2、：（1）细胞壁结构：成分、肽聚糖层数等 （2）等电点： G等电点低，带负电荷多，与带正电荷的结晶紫结合牢固,革兰染色的临床意义：（1）鉴别细菌（2）指导临床选择药物 （3）与细菌的致病性有关,（3）抗酸染色法,鉴别：抗酸性杆菌和非抗酸性杆菌 步骤：固定标本 苯酚复红加温染色 盐酸乙醇脱色 亚甲蓝复染 结果：抗酸性杆菌染成红色非抗酸性杆菌染成蓝色,（4）特殊染色法,鉴别：细菌的荚膜、芽胞、鞭毛及细胞壁、异染颗粒等的染色,电子显微镜,适用于专性厌氧菌培养。厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等。,常用的生化试验,1、吲哚试验（Indol test）：含有色氨酸酶的细菌（如大肠杆菌、
3、变形杆菌等）可分解色氨酸生成吲哚，若加入二甲基氨基苯甲醛，与吲哚结合，形成玫瑰吲哚，呈红色，称吲哚试验阳性。,2、甲基红试验：产气杆菌使丙酮酸脱羧后形成中性产物，培养液pH5.4，甲基红指示剂呈桔黄色，为甲基红试验阴性，大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液呈酸性pH5.4，指示剂甲基红呈红色，称甲基红试验（Methyl red test,MR）阳性。,3、V-P试验：大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖，为区分两菌可采用VP试验及甲基红试验。产气杆菌能使丙酮酸脱羧、氧化（在碱性溶液中）生成二乙酰，后者可与含胍基的化合物反应，生成红色化合物，称VP阳性。大肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，VP阴性。,4、枸橼酸盐利用试验（Citrate ultiliazation test）:能利用枸橼酸盐作为唯一碳源的细菌如产气杆菌，分解枸橼酸盐生成碳酸盐，同时分解培养基的铵盐生成氨，由此使培养基变为碱性，使指示剂溴麝香草酚蓝（BTB）由淡绿转为深蓝，此为枸橼酸盐利用试验阳性。,吲哚（I）、甲基红（M）、VP（Vi）、枸橼酸盐利用（C）四种试验，合称之为IMViC试验，用以将大肠杆菌与其形状十分相近的肠杆菌属的细菌鉴别开来。,IMViC试验：,
