《食品中维c的测定》由会员分享，可在线阅读，更多相关《食品中维c的测定（26页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、饮料中维生素C的测定,第七组成员,一、测定意义,(一）维生素C的生理功能 1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合。 2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。 3、改善铁、钙和叶酸的利用。,4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。,7、水溶性强抗氧化剂，主要作用在体内水溶液中。 8、坚固结缔组织。 9、促进胶原蛋白的合成， 防止牙龈出血。,（二）食品中维生素测定的意义,1、食品中各种维生素的含量取决于食品的品种和食品的加工工艺与贮藏条件。,2、 测定食品中
2、的维生素含量在评价食品的营养价值，研究维生素在食品加工、储藏等过程中的稳定性，指导企业指导制定合理的工艺及储存条件，开发利用富含维生素的食品资源等都具有十分重要的意义。,二、原理,1、测定方法维生素C的测定方法有许多，最常用的有分光光度法、2，6-二氯靛酚法 （还原型VC）、2，4-二硝基苯肼法 （总VC）、碘量法、荧光分光光度法等。本次测定所用的方法为2，4-二硝基苯肼法 。,2、2，4-二硝基苯肼法的测定原理维生素C总量包括还原型Vc、脱氢型Vc和二酮古乐糖酸，将样品中的还原型抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，进一步水解为二酮古乐糖酸。二酮古乐糖酸与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎。其呈色的强
3、度与二酮古乐糖酸浓度成正比，可以比色定量。,三、适用范围,2，4-二硝基苯肼法只能够测得食品中的抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量，即维生素C的总量，若想测得食品中的还原型维生素C，则需要其他方法。,四、仪器与试剂,1、仪器托盘天平、分析天平、回流装置（如酒精灯，冷凝管）、布氏漏斗、恒温干燥箱、恒温水浴锅、可见-紫外分光光度计，比色管等。,2、主要试剂4.5mol L-1 H2SO4溶液 量取浓H2SO4(分析纯)250mL，慢慢倒入700mL水中，边加边搅拌. 2,4-二硝基苯肼溶液（20g/L) 称取2,4-二硝基苯肼(分析纯)2.00g溶解于100mL 4.5molL-1 H2SO4中,10
4、gL-1草酸 溶解20g草酸于700ml水中，稀释至1000ml. 20 gL-1草酸 取500ml草酸溶液（20g/L）稀释至1000ml。 10g/L硫脲溶液 溶解5g硫脲于500ml草酸溶液（10g/L）中。 20g/L硫脲溶液 溶解10g硫脲于500ml草酸溶液（10g/L）中。,1mol/L盐酸 取100ml盐酸加入水中，稀释至1200ml.标准Vc溶液 称取维生素C(C6H8O5，分析纯) 100mg溶解于100ml10 gL-1草酸溶液中，此溶液每毫升相当于1mg维生素C。85%硫酸 慢慢加入900ml硫酸于100ml水中。,活性炭 取活性炭100g，加入700mL1mol/L盐
5、酸中，回流12小时，过滤，重复用水洗至溶液中无Fe2+离子为止，放在100120烘干。 检验方法：将20g/L亚铁氰化钾于1%盐酸等量混合，将上述滤液滴入，如有铁离子则产生蓝色沉淀。,五、实验步骤,氧化处理 取25ml饮料样品，加入2g活性炭，振摇1min过滤，弃去开始部分。取10ml滤液，加入10ml硫脲溶液，混匀。,呈色反应（1）取3支试管，各加入4mL经氧化处理的样品稀释液。基中一支试管作为空白，向其余两试管加入1.0mL 2%2,4二硝基苯肼溶液，将所有试管放入370.5恒温箱或恒温水浴中，保温3h。,（2）3h后取出，除空白管外，将所有试管放入冰水中。空白管取出后使其冷到室温，然后加
6、入2%2,4二硝基苯肼溶液1.0mL，在室温中放置10min15min，后放入冰水内。其余步骤同试样。,85%硫酸处理当试管放入冰水冷却后，向每一试管（连同空白管）中加入85%硫酸5mL，滴加时间至少需要1min，需边加边摇动试管。将试管自冰水中取出，在室温放置30min后比色。,样品比色测定用1cm比色皿，以空白液调零点，于500nm波长测定吸光值。 标准曲线绘制 加2g活性炭于50mL标准溶液中，振动1min后过滤。,吸取20.00mL滤液放入1000mL容量瓶中加5.0g硫脲，用1%草酸溶液稀释至刻度。抗坏血酸浓度20g/mL。 吸取5，10，20，25，30稀释液，分别放放7个100m
7、L容量瓶中，用1%硫脲溶液稀释至刻度，使最后稀释液中抗坏血酸的深度分别为1，2，4，5，6g/mL，为抗坏血酸标准使用液。,分别吸取4mL各不同深度的抗坏血酸标准使用液，于6个比色管中，吸取4mL水于试剂空白管，各加入1.0mL 20g/L的2,4二硝基苯肼溶液，混匀，将全部试管放入375恒温箱或恒温水浴中，保温3h。,3h后将8个试管取出，全部放入冰水冷却后，向每一试管中加入5mL 85%硫酸，滴加时间至少需要1min，边加边摇，。将试管自冰水取出，在室温放置30min后，以试剂空白管调零，并比色测定。 以吸光值为纵坐标，抗坏血酸含量（mg）为横坐标绘制标准曲线如下图。,六、结果计算,X =
8、 C201000/1000=C20 式中C从标准曲线查得的总抗坏血酸的含量(mg mL-1)；20样品稀释倍数(2m/m)(100/20)(20/10) = 20 ；1000分别代表1000g样品中总Vc的含量和将ug换算成mg。,七、注意事项,活性炭对抗坏血酸的氧化作用是基于七表面吸附的氧进行界面反应，如果加入量过低，氧化不充分，是测定结果偏低；若加入量过高，对抗坏血酸用吸附作用，使结果偏低。 。,硫脲可防止抗坏血酸继续氧化，同时促进脎的形成。最后溶液中硫脲的浓度要一致，否则影响测定结果 比色管从冰浴中取出后，因糖类的存在造成显色不稳定，颜色会渐渐加深，30s后影响将减少，故在加入85%硫酸后30s准时比色。,
