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1、实验六 主要内容 操作：肥达试验 示教：肠道杆菌、霍乱弧菌 录像：肠道杆菌, 肥达试验,原理：用已知的伤寒沙门菌菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清做试管凝集实验 目的：测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验,器材： 试管6支/人，试管架1个/2人吸管1支/人，标签1张/人 4人/组 伤寒杆菌H抗原伤寒杆菌O抗原甲型副伤寒杆菌H抗原乙型副伤寒杆菌H抗原 待检： 病人血清（1:10稀释）,1. 每管加入0.5ml生理盐水,操作步骤：,4. 震荡混匀后，置43，2hr后观察结果,2. 倍比稀释血清: 在第一管中加0.5ml待
2、检血清,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml,0.5ml弃去,抗体稀释度： 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 阴性对照,抗体稀释度： 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 阴性对照,以出现凝集的血清最高稀释倍数为该血清抗体效价 O达到1:80，H达到1:160H甲或H乙达到1:80或以上有诊断意义, 结果判断,记录结果,* 吸管放桶，试管放锅,注意事项：,1、请同学们小心拔下橡胶乳头，如橡胶管和乳头分离，请装好再归还回来。 2、请最后观察完结果，同学们把标签撕掉再归还试管！ 3、H、O、副甲、副乙菌液里面的滴管不能混淆乱放！ 4、所有的玻璃物品使
3、用时请轻拿轻放，切勿打坏！,1、糖发酵试验 由于细菌各自具有不同的酶系统，故对糖（醇）类的分解能力不尽相同。产酸产气：指示剂变色，小倒管内有气泡；以 表示产酸： 指示剂变色；以表示不能分解 ：指示剂不变色；以表示指示剂为溴甲酚紫,一、细菌生化反应,1.Negative 2. Positive 3. Positive and gas produced,2、硫化氢试验硫化氢遇铅盐或铁盐形成黑色硫化铅或硫化亚铁沉淀物。,positive,negative,3、吲哚（靛基质）试验有些细菌分解色氨酸生成吲哚（靛基质），与加入的二甲基氨基苯甲醛反应生成玫瑰吲哚呈玫瑰红色为阳性；黄色为阴性。,4、尿素酶试验
4、有些细菌具有尿素酶，能分解尿素形成大量的氨，使培养基pH上升，而变成碱性，使含有酚红指示剂的培养基呈红色为阳性；不变色为阴性。,二、肠道杆菌： 1、肠道杆菌形态（G）； 2、肠道杆菌常用分离鉴别培养：SS琼脂平板； 3、肠道杆菌的生化反应：小生化管：大肠、变形、伤寒、痢疾双糖铁培养基：大肠、变形、伤寒、痢疾,SS琼脂平板,胆盐 枸橼酸盐 煌绿 乳糖 蛋白胨 中性红,抑制杂菌生长,被非致病菌分解产酸,被致病菌分解产碱,酸：红 碱：黄,双糖铁培养基,上层（固体）下层（半固体）,乳糖 硫酸亚铁 酚红 葡萄糖,生化反应表,三、霍乱弧菌 Vibrio cholerae,实验报告,示教片：肠道杆菌（1张）、霍乱弧菌（1张）、 肥达试验：原理、步骤、结果与分析,
