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1、实验一显微镜的使用保养 与中药临时制片技术,一、显微镜的使用和保养,显微镜的结构 镜座 镜臂 镜筒 载物台 光路系统：目镜、物镜、集光器、光源,物镜 低倍镜：4、10 用于观察整体结构、寻找特定特征。 高倍镜：40 、100 （油镜） 用于观察特定细微结构与组织特征， 油镜较为少用。,使用注意与技巧 先低倍后高倍，即先整体后局部 之字形扫描式寻找需要观察的特征 由低倍镜转成高倍镜后，只能使用微调 高倍镜观察时，应通过控制光源强度、集光器高低、虹彩光阑的张合，并结合微调，使被观察物清晰。,使用过程及使用后的保养 显微制片必须将多余的装置液清理干净，以免沾染镜头。 如目镜与物镜被沾染，则以镜头纸从
2、中央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要时还要使用去污剂擦拭。,使用完毕后，移去玻片，按上述方法擦拭，将最低倍物镜转入光路，载物台复位。 关闭电源，拔下插座，盖上防尘罩。 在相应使用登记本上签名。,二、粉末临时制片,粉末临时制片操作要领 粉末用量：米粒大小，尽可能少。 每次滴加装置液23滴。 每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 控制搅拌范围约为盖玻片大小。 如加热透化，则重复进行34次，沸即离火，勿烧干、焦。,加盖玻片时应先一侧接触装置液，缓缓放下，最后抽出镊子，以排除气泡。 以吸水纸吸去溢出的装置液。 稍放置后，镜检。,水装片或斯氏液装片 适用于观察淀粉粒。 装置液：蒸馏水或斯氏液（甘油醋酸）。 不可
3、加热，否则淀粉粒糊化。,天花粉粉末淀粉粒,水合氯醛加热透化装片 适用于除淀粉粒、菊糖以外的组织、细胞、细胞后含物的观察。 装置液：水合氯醛（水合三氯乙醛）、稀甘油。 需要加热。,天花粉粉末石细胞,天花粉粉末石细胞,天花粉粉末具缘纹孔导管,水合氯醛或乙醇装片 适用于观察菊糖。 装置液：水合氯醛或乙醇。 不可加热，否则菊糖溶解。,党参菊糖（水合氯醛装置）,水合氯醛装置液的作用 使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其内含物特征。 去除细胞表面或内部杂质。 增强透明度。,稀甘油装置液的作用 增加透明度。 防止气泡生成。 防止水合氯醛结晶析出。,三、整体透化装片,整体透化装片的目的与操作 目的：避免出现有些组
4、织在粉末中破碎或不完整而影响观察。 材料：多为叶或花。,操作：切或剪取叶或花约4mm2 ，外表朝上，透化后观察。 装置液：水合氯醛、稀甘油。 需要加热。,金银花两种非腺毛,金银花腺毛,金银花花粉粒,四、叶表皮撕片,叶表皮撕片适用对象及操作 适用对象：观察表皮细胞、气孔、毛茸。 材料：通常为叶下表皮。,操作：以镊子自下表面夹住少许叶片，往一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上置于滴有12滴水的载玻片上，使其自然展开，盖片观察。,何首乌叶下表皮组织,五、徒手制片,徒手制片的目的及材料 目的：观察组织构造、细胞特征； 材料：新鲜、干燥或经固定的材料,常用固定液FAA固定液： 70乙醇 90ml 福尔马
5、林（3740甲醛） 5ml 冰醋酸 5ml,取材材料分割成适当大小，直径必须小于盖玻片。 材料软化或冲洗坚硬的干燥材料于稀甘油10醋酸液中 煮至表面无气泡。固定材料需在流水中冲洗12小时以上。,操作：取新鲜或已软化的中药材，用拇指及食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另外一只手持刀片，自左向右移动手腕，牵曳切片。 操作时材料的断面与刀口须经常用水湿润。 以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿中浸泡。,装片将切片以镊子夹出，置于滴加了甘油的载玻片上，加上盖玻片；或滴加水合氯醛加热透化，滴加稀甘油后加上盖玻片。,徒手切片桑枝横切面,思考 1、在完成实验、准备离开实验室前还应做哪些工作？ 2、在显微物镜低倍镜头中，哪一种最常用？水装片与水合氯醛装片粉末用量有何区别？,3、进行粉末水合氯醛加热透化过程中，应注意哪些关键问题？显微制片最后一个环节-加盖玻片，该如何操作？ 4、显微制片中水合氯醛及稀甘油作用是什么？,
