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1、研究背景在花色育种中的应用1在形态育种中的应用2在抗性育种中的应用3在花卉保鲜育种中的应用4在花色育种中的应用花色是花卉最重要的观赏性状之一花色主要由三大类色素决定类黄酮、类胡萝卜素和甜菜色素利用反义RNA 抑制基因的活性，使 花的颜色变浅引入外源基因来补充某些品种缺乏合成某 些颜色的能力，使颜色变深包括花器官结构、花枝着生状态、花 序类型、植株形态等的改良转rolC 基因菊花品种表现为丛生、矮 化，叶多分裂将DOH1 基因以反义形式导入石斛， 获得分枝性强且矮化的转基因石斛123在形态育种中的应用蛋白酶抑制剂基因包括抗虫和抗病性应用最广泛的是Bt 基因几丁质酶基因1234在抗性育种中的应用在
2、花卉保鲜育种中的应用乙烯合成对于延长保鲜期、 提高切花品质至关重要1ACC 合成酶和ACC 氧化酶2ACC 合成酶基因早于ACC 氧 化酶基因3导入反义ACC 合成酶基因及 反义ACC 氧化酶基因4分子育种应注意的问题分子育种与传统育种方法需紧密结合1加强部门、行业、学科间的交流与合作2把目的基因的开发利用与花卉基因 文库的保存紧密地结合起来3加强国际合作，借鉴已有的研究成 果，少走弯路4无法以种子繁 殖或种子繁殖 后代明显变异 分离的、传统 的嫁接方式也 不能从根本上 改变花卉品种 重点研究的是 将抗病、抗虫 、抗冻、抗热 基因引进到花 卉植株中来， 通常统称为抗 逆基因的导人 。如何将抗逆
3、基 因导入到花卉 植株中，从而 获得抗逆基因 新品种，直接 关系到花卉生 产的利益。应应用范围围研究重点研究意义义分子育种的目的及意义花卉分子育种的主要内容改良类型改良类型BBE EC CDDAA花色花形花期保鲜花香研究思路与设想123将目的基因分离出来,构建重组分子导入 植物,筛选获得目的基因表达的后代将带有目的性状基因的供体总DNA 片段导入 植物,筛选带目的性状的后代,培育新品种利用化学合成或PCR，体外克隆出目的基因 包括已知基因和未知基因试验路线花卉转基 因 花卉遗传育种 突变体筛 选 试验路线目的基因目的基因宿主植物宿主植物表型筛选表型筛选克隆转化鉴定研究思路与设想克隆出目的基因的
4、ORF构建重组质粒载体组织栽培与筛选载培育种转化组织构建基因组文库化学合成法 PCR扩增构建cDNA文库已知基因 的获得未知基因 的获得试验路线试验路线受体材料的 准备植株幼胚根细胞培养愈伤组织试验路线遗传转化直接转化法其他间接转化法试验路线直接转化法基因枪PEG介导 电击花粉管通道试验路线带有转化基因的农杆菌 活化受体植物叶盘侵染共培养筛选培养诱导成苗预培养叶 盘，或愈 伤组织转化组织试验路线炼苗试验路线培养过过程中利用标记标记 基因筛选筛选标记基因选择标记基因(Slective gene)报告基因(Report gene)抗生素类选择基因 抗除草剂类选择基因 生物安全性标记类选择 基因 -D-葡萄糖酸苷酶基因 (Gus)荧光素酶基因(Luc) 氯霉素乙酰转移酶基因 (Cat)绿色荧光蛋白基因 (GFP) 筛选与鉴定试验路线原理：葡萄糖酸苷酶基因（Gus）， 催化葡萄糖苷酯类 物质水解。其中很多 水解产物具有发色团或形成荧光物质。 例：组织 化学法测定Gus活性作用底物为X-gluc,产物是一种不可溶的 5,5-二溴，4,4-二氯靛蓝；Gus检测试验路线检测外源基因整合外源基因拷贝.外源基因表达PCR- Southern杂 交IPCRRT-PCR转基因植物的PCR检测试验路线Southern 杂交Northern 杂交Northern 杂交原位杂交杂交鉴定Thank you !
