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1、中国医学科学院血液病医院临床检测中心止血血栓室 孙海燕出凝血疾病的检测生理性止血血管损伤血管收缩血管内皮下组织血小板黏附、 聚集、释放vWF5-HT、TXA2等凝血系统激活胶原暴露、TF等血凝块形成与维持纤维蛋白网加固血小板血栓抗凝系统纤溶系统一期 止血 二期 止血XIIXIIaXIXIaIXIXaXXaIIIIaIIsIiXIIIXIIIaVIIVIIaVIIIVIIIaTF +Ca2+前激肽释放酶激肽释放酶丢失不引起出血VaVCa2+PLHMW-KPL凝血瀑布内 源 性 凝 血 途 径外 源 性 凝 血 途 径共同途径筛查APTT PT TT Fbg DDimer FDP因子活性凝血因子I
2、I活性测定 凝血因子V活性测定 凝血因子VII活性测定 凝血因子VIII活性测定 凝血因子IX活性测定 凝血因子X活性测定 凝血因子XI活性测定 凝血因子XII活性测定 凝血因子XIII筛查抗体纠正试验 特异性因子抗体 （VIII） 狼疮抗凝物检测凝血因子活性测定项目结果单位参考范围PT16.9S11-14INR1.470.87-1.2APTT109.4S23.7-36.0TT16.1S13.3-19.3FIB3.93g/L2-4FVIII56.8%50-150FIX39.2%50-120FXI41.3%50-120FXII27.0%50-120DRVVT筛选143.4S31-44DRVVT确
3、认56.4S30-38DRVVT比值2.50.8-1.2结论提示狼疮抗凝物存在。凝血因子活性测定原理：凝血因子活性是通过其纠正乏该因子血浆所致的凝固时间延长的能力 而测得的。梯度稀释已知凝血因子活性的血浆（标准品），与乏该因子的血 浆混合，然后做APTT或PT测定，建立参考曲线。受检者血浆与乏该因子的 基质血浆混合，测其APTT后PT值，通过标准曲线可计算其凝血因子的活 性。因子缺乏或者假性降低：3个浓度当存在狼疮抗凝物等非特异性抗体时，凝血因子活性测定呈现稀释效应凝血因子活性测定项目结果单位参考范围PT16.9S11-14INR1.470.87-1.2APTT109.4S23.7-36.0T
4、T16.1S13.3-19.3FIB3.93g/L2-4FVIII120.1（56.8；108.6）%50-150FIX119.4（39.2；75.6）%50-120FXI102.3（41.3；71.6）%50-120FXII59.4（27.0；47.5）%50-120DRVVT筛选143.4S31-44DRVVT确认56.4S30-38DRVVT比值2.50.8-1.2结论提示狼疮抗凝物存在。项目结果单位参考范围PT11.6S11-14INR0.950.87-1.2APTT129.9S23.7-36.0TT15.5S13.3-19.3FIB4.45g/L2-4DRVVT筛选39.8S31-4
5、4DRVVT确认32.6S30-38DRVVT比值1.20.8-1.2结论不提示狼疮抗凝物存在FVIII 1.20.2ml0.2ml0.2ml0.2ml未稀释1:11:21:41:80.2ml咪唑0.2ml咪唑0.2ml咪唑0.2ml咪唑取0.2ml+0.2mlNPP37孵育2小时0.2mlNPP+0.2ml咪唑检测因子活性计算滴度患者血浆Bethesda Assay操作步骤APTT及（或）PT延长纠正试验纠正（因子缺乏）不能纠正（抑制）LA证实试验纠正不能纠正因子活性因子活性测定抑制物滴度凝血四项遗传性缺乏获得性缺乏血友病甲、血 友病乙等肝病、vitk缺乏、华 法令治疗、DIC等因子特异性抗
6、体肝素、DTI、 异常血浆蛋白等TT延长，FIB正常TT延长，FIB低低（无）纤维蛋 白原血症等鱼精蛋白试验、 爬虫酶时间等狼疮抗凝物一期止血一期止血血小板实验室检测数量：血小板计数、外周血涂片功能：PFA-100（PFA-200）、血小板聚集试验其他：血小板膜糖蛋白受体、电镜等PFA-100（200）PFA-100（200）结果解释胶原/肾上腺素结果胶原/ADP结果解释原因正常正常正常功能正常异常正常胶原/肾上腺素结果异常而 胶原/ADP结果正常，这种 情况表明血小板存在功能异 常，通常见于阿司匹林样 药物影响通常为阿司匹林异常异常两种结果均异常表明存在 血小板功能异常，vWD或 者药物影响
7、血小板功能异常，药 物，vWD血小板聚集试验血小板与血小板之间相互粘附过程。是形成血小板血栓的基础，也是血小板进一步活化和参与二期止血、促进血液凝固的保证。血小板聚集的要素GPIIb/IIIa ，Fg，Ca2+诱导剂高切变率的条件下,vWF与Fn也参与血小板聚集2 12 2血小板聚集试验在遗传性血小板疾病中的表现疾病 聚集反应 ADP 胶原花生四烯酸瑞斯托霉素 血小板无力症 BSS或vWD 血小板型vWD及2B型vWD 阿司匹林样缺陷 储存池疾病 灰色血小板综合征 胶原受体缺陷 正常- + + v + +-或 + + v - +-或 + + - - + + + - + + + + + +正常，
8、+增强，反应减弱，-缺乏反应，v差别大，缺乏第二相聚集血管性血友病（vWD）实验室检测vWF抗原检测：vWF:AgvWF活性检测：vWF:RCo，vWF:Act凝血因子VIII活性检测：FVIII:C瑞斯托霉素（及小剂量）诱导血小板聚集vWF多聚体分析vWF与胶原结合力：vWF：CB血管性血友病（vWD）分型1型：vWF部分缺失3型：vWF完全缺失2型：2A：选择性高中分子量vWF多聚体缺失2B：功能获得型突变导致vWF与血小板亲和力增加，高分子量vWF多聚体被清除及轻度血小板减少 2M：功能缺失型突变导致vWF与血小板GPIb结合力降低2N：vWF与VIII结合力降低，导致VIII被清除vW
9、D的实验室分型诊断正常 1型2A型2B型2M型2N型3型PLT- vWDvWF:Ag正常L,or正常或无vWF:RCo正常L,or或正常或无FVIII正常或 正常正常或正常或 正常1-9IU/dL正常或RIPA正常通常正常通常正常正常无通常正常LD-RIPA无无无无无无PFA-100正常正常或 正常血小板计数正常正常正常或正常正常正常正常多聚体分析正常正常异常异常正常正常无异常抗凝系统与纤溶系统实验室检测抗凝蛋白检测：抗凝血酶III活性测定（ATIII）蛋白C活性测定（PC）蛋白S活性测定（游离）（PS free）纤溶系统：纤溶酶原tPAPAI-1D-dimerFDP易栓症遗传性：1、抗凝蛋白
10、缺陷：ATIII、PC、PS2、凝血因子缺陷：FV Leiden/FII 20210A、异常纤维蛋白原血症3、纤溶蛋白缺陷：纤溶酶原、tPA缺乏、PAI-1增加4、代谢缺陷：高同型半胱氨酸血症获得性恶性肿瘤、APS、肝病、肾病、凝血因子增加、创伤及围手术期、妊娠、制动、经济舱综合征、避孕药、老龄等等D-Dimer对VTE的阴性排除价值增高：老年、新生儿、妊娠、感染、肿瘤、手术、创伤、DIC、VTE、外周动脉病变、溶血、出血、抗血栓治疗、肝肾疾病等我室的出凝血检测项目汇总Activated partial thromboplastin timeAntithrombin ActivityProth
11、rombin TimeThrombin TimeDilute Russells Viper Venom Time, Screen and confirmD-DimerFibrin(ogen) Degredation Products(FDPs)Silica Clotting Time, Screen and confirm Clauss FibrinogenPlatelet Aggregation（ADP、AA、Collagen 、Ristocetin）Factor XIII Screen von Willebrand Factor AntigenProtein C ActivityProte
12、in S Activity（Free）Mixing Study (incubated)Factor II AssayFactor V AssayFactor VII AssayFactor VIII AssayFactor IX AssayFactor X AssayFactor XI AssayFactor XII AssayFactor II Bethesda Units (Titer)Factor V Bethesda Units (Titer)Factor VII Bethesda Units (Titer)Factor VIIIBethesda Units (Titer)Factor
13、 IX Bethesda Units (Titer)Factor X Bethesda Units (Titer)Factor XI Bethesda Units (Titer)Factor XII Bethesda Units (Titer)Anti Cardiolipin Antibody（IgG，IgM， IgA）Anti -2 GPI antibody（IgG，IgM，IgA）基因检测Vascular DisorderPlatelet DisorderCoagulation Factor DisorderThrombotic DisorderACVRL1ACBD5FERMT3HPS1M
14、YH9STIM1 F2FGBADAMTS13COL3A1ACTN1GATA1HPS3NBEASTXBP2F5FGGSERPINC1ENGANKRD26GFI1BHPS4 NBEAL2TBXA2RF7GGCXSERPIND1GDF2ANO6GNASHPS5ORAI1TBXAS1F8LMAN1HRGSMAD4AP3B1GNEHPS6P2RY12THPOF9MCFD2PROCBLOC1S3GP1BAITGA2B PLA2G4ATUBB1F10SERPINE1PROS1BLOC1S6GP1BBITGB3PRKACGVIPAS39F11SERPINF2THBDCYCSGP6LYSTRASGRP2VPS3
15、3B F13A1VKORC1PLATDTNBP1 GP9MASTLRBM8AWASF13BVWFETV6HOXA11MPLRUNX1FGA分析前因素对结果的影响分析前即刻影响出凝血结果小号针头溶血 凝血因子激活 血小板激活不可信赖的结果 凝固时间缩 短 肝素病人APTT缩短创伤性静脉穿刺组织凝血酶原入血 标本凝块缩短凝固时间 不可信赖的结果混合不充分样本凝块不可信赖的结果过度混合标本凝血因子激活 血小板凝激活 血浆样本复溶后有纤维凝块缩短凝固时间 肝素病人APTT缩短未纠正高HCT凝固时间延长采血量不足凝固时间延长采血过量样本凝块缩短凝固时间 不可信赖的结果冻存之前未二次离心剩余血小板降解LA
16、假阴性 肝素病人APTT缩短血浆冻存在自动除霜冰箱凝血因子降解多数凝血因子降低放置于室温时间过长不稳定因子 V 和VIII的降解延长凝固时间冷藏样本冷激活凝血因子 VII VIII 和 VWF的冷沉淀缩短PT VIII 和 VWF降低出凝血检测的保存条件及间隔（推荐）项目全血保存处理和血浆分装室温冷藏冷冻室温冷藏冷冻-20冷冻-80PT24h不接受不接受24h不接受2周12个月APTT4h不接受不接受4h4h2周12个月APTT（肝素检测）1h不接受不接受4h4h2周未知APTT（vWF和VIII因子）4h不接受不接受4h4h2周6个月其他4h不接受不接受4h4h依据具体项目而异整合报告检测科室的职能检测样本保证结果的准确性提供有临床价值的结果为临床提供必要的咨询，正确解释结果，最大限度提供可利用的
