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1、实验动物的基本操作技术实验动物的基本操作技术VCDVCD实验二实验二 两栖类动物基本操作两栖类动物基本操作蟾蜍坐骨神经蟾蜍坐骨神经- -腓肠肌标本制备腓肠肌标本制备 蟾蜍坐骨神经蟾蜍坐骨神经- -腓神经标本制备腓神经标本制备实验目的：实验目的：学习蟾蜍神经、肌肉标本制备方学习蟾蜍神经、肌肉标本制备方 法。掌握两栖类动物基本操作技术。法。掌握两栖类动物基本操作技术。实验原理实验原理：两栖类动物的某些生理功能与哺：两栖类动物的某些生理功能与哺 乳类相似。但其离体组织体外存活环境要求乳类相似。但其离体组织体外存活环境要求 较低，容易进行实验操作。较低，容易进行实验操作。实验对象：蟾蜍实验对象：蟾蜍实
2、验器材和药品：手术器械实验器材和药品：手术器械1 1套套任氏液任氏液实验步骤实验步骤破坏脑和脊髓破坏脑和脊髓 取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。找枕骨大孔：用探针由头端沿正中线向找枕骨大孔：用探针由头端沿正中线向 下滑动即可触及。下滑动即可触及。用探针刺入：先向上损毁脑，然后向下用探针刺入：先向上损毁脑，然后向下 损毁脊髓。如蛙四肢松软，呼吸消失，表明损毁脊髓。如蛙四肢松软，呼吸消失，表明 脑和脊髓已完全破坏。脑和脊髓已完全破坏。 VideoVideo剪除躯干上部及内脏剪除躯干上部及内脏 用用粗剪刀粗剪刀在骶髂关节水平以上在骶髂关节水平以上12cm12cm处剪断脊处剪
3、断脊 柱，（注意不要损伤腹侧面两侧的坐骨神经干）柱，（注意不要损伤腹侧面两侧的坐骨神经干） ，持粗剪刀沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部。，持粗剪刀沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部。剥皮、分离两腿剥皮、分离两腿 一手捏住脊柱断端（注意不要触及神经），另一一手捏住脊柱断端（注意不要触及神经），另一 只手捏住皮肤，用力向下剥掉全部后肢皮肤。只手捏住皮肤，用力向下剥掉全部后肢皮肤。 用用粗剪刀粗剪刀将脊柱沿正中线剪开分为两半，标本放将脊柱沿正中线剪开分为两半，标本放 在盛有任氏液的培养皿中。在盛有任氏液的培养皿中。 完毕洗净手及用过的器械。完毕洗净手及用过的器械。 VideoVideo坐骨神经坐骨神经-
4、-腓神经标本制备腓神经标本制备 将标本腹面朝上，用玻璃将标本腹面朝上，用玻璃 分针游离坐骨神经，于近分针游离坐骨神经，于近 脊柱处穿线结扎并剪断。脊柱处穿线结扎并剪断。 再将标本背面朝上，手持再将标本背面朝上，手持 结扎线将神经轻轻提起，结扎线将神经轻轻提起， 剪断坐骨神经的所有分支剪断坐骨神经的所有分支 ，游离神经至腘窝处。，游离神经至腘窝处。 剪断内侧的胫神经。在踝剪断内侧的胫神经。在踝 关节水平结扎腓神经并剪关节水平结扎腓神经并剪 断。断。 标本浸于任氏液中标本浸于任氏液中10201020 分钟。分钟。坐骨神经坐骨神经- -腓肠肌腓肠肌 标本制备标本制备 将游离干净的坐骨神将游离干净的坐
5、骨神 经搭于腓肠肌上，在经搭于腓肠肌上，在 膝关节周围剪掉全部膝关节周围剪掉全部 大腿肌肉并用粗剪刀大腿肌肉并用粗剪刀 将股骨刮干净，将股骨刮干净，在股在股 骨上中部剪去上段股骨上中部剪去上段股 骨骨，即保留下，即保留下2/32/3股股 骨。骨。 将腓肠肌穿线结扎，将腓肠肌穿线结扎， 剪断跟腱。仅保留腓剪断跟腱。仅保留腓 肠肌起始点与骨的联肠肌起始点与骨的联 系，其余剪除。系，其余剪除。VideoVideo注意事项：注意事项： 制备坐骨神经干标本时应作钝性分离，动作须轻制备坐骨神经干标本时应作钝性分离，动作须轻 柔细致，避免过度牵拉或金属器械、手捏碰神经柔细致，避免过度牵拉或金属器械、手捏碰神经 干；干； 制备标本时应随时对神经干滴加任氏液，以保持制备标本时应随时对神经干滴加任氏液，以保持 神经湿润，并将暂不用的神经置于任氏液培养皿神经湿润，并将暂不用的神经置于任氏液培养皿 中保存。中保存。实验结果：实验结果： 测定神经兴奋性测定神经兴奋性 测定神经测定神经- -肌肉标本的兴奋性肌肉标本的兴奋性思考题思考题用什么方法可以测定神经的兴奋性？用什么方法可以测定神经的兴奋性？剥去皮肤的神经或肌肉标本可以用自来水洗剥去皮肤的神经或肌肉标本可以用自来水洗 吗？吗？
