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1、CO2 培养箱中的水盘污染控制问题细胞培养时，使用的CO2 培养箱内通常采用两种方式控制箱体内湿度。一是采用被动控湿法，即通常的CO2培养箱内均放置一个3L 的水盘，内盛3L 无菌纯水，依靠水的自然蒸发，使箱体内湿度达到95% 。二是一些高级的CO2 培养箱，采用主动加湿系统（蒸汽发生器，加热水盘，喷雾器等），可以控制箱体内的湿度。然而在这种高湿度条件下，放置在箱体内部的水盘中的纯净水，很容易造成微生物的滋生，产生污染，导致细胞培养完全失败。目前，控制水盘内污染的方法有如下几种：1、 定期(至少每两周一次 )，更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。2、 在水盘内添加适量硫酸铜，配制方法：20g
2、 无水硫酸铜 5ml 浓硫酸 1L 灭菌纯水。3、 夏季气温高时，水盘里加0.02的叠氮钠可以有效的预防真菌污染。4、 水盘内添加适量抗生素。5、 定期为培养箱（含水盘）进行一次高温灭菌。6、 使用专用的水盘污染控制试剂，如市面上有些CO2 培养箱厂家提供水盘污染控制专用的银离子消毒盒，说明书上描述能有效杀灭600 中微生物，能持续使用6 个月，但此类专用污染控制试剂较常规方法，存在价格较昂贵缺点。霉菌生长和什么有关1、霉菌要求的 PH 值为酸性，2、霉菌生长要求一定的湿度，水分活性（就是真正能被微生物利用的那部分水份）相对含量不应低于0.7 3、霉菌有各自的适宜温度，在此温度下最适宜繁殖。大
3、多数霉菌繁殖最适宜的温度为 2530，在 0以下或 30以上，不能产毒或产毒力减弱。如黄曲霉的最低繁殖温度范围是6-8，最高繁殖温度是4446，最适生长温度37左右。但产毒温度则不一样，略低于生长最适温度，如黄曲霉的最适产毒温度为 28-32。4、霉菌生长与培养基的种类和营养成分有关。高中阶段多采用查氏培养基；传代培养用MY 培养基。一般而言，营养丰富的培养基其霉菌生长的可能性就大，天然基质比人工培养基产毒为好。实验证实，同一霉菌菌株在同样培养条件下，以富于糖类的小麦、米为基质比油料为基质的黄曲霉毒素产毒量高。另外，缓慢通风较快速风干霉菌容易繁殖产毒。 5、 至于光照问题，霉菌是异养生物，所以
4、生物学意义上不依赖光照。但光照 可能影响水分，温度。温度，水分，从而可影响霉菌生长。霉菌是微生物中真菌的一种，属多细胞生物。构成霉菌菌（个）体的基本单位称为菌丝（hyphae ），呈长管状，宽度 210微米，可不断自前端生长并分枝。无隔（如毛霉、根霉）或有隔（如青霉、曲霉），具1 至多个细胞核。在固体基质上生长时，部分菌丝深入基质吸收养料，称为基质菌丝或营养菌丝；向空中伸展的称气生菌丝，可进一步发育为繁殖菌丝，产生孢子。大量菌丝交织成绒毛状、絮状或网状等，称为菌丝体（mycelium ）。菌丝体常呈白色、褐色、灰色，或呈鲜艳的颜色，有的可产生色素使基质着色（如赤霉菌等）。霉菌繁殖迅速，常造成食
5、品、用具大量霉腐变质，但许多有益种类已被广泛应用，是人类实践活动中最早利用和认识的一类微生物。霉菌是丝状真菌的俗称，意即“ 发霉的真菌 ” ，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。霉菌的菌丝。构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。菌丝是一种管状的细丝，把它放在显微镜下观察，很像一根透明胶管，它的直径一般为3-10 微米，比细菌和放线菌的细胞约粗几倍到几十倍。菌丝可伸长并产生分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。根据菌丝中是否存在隔膜，可把霉菌菌丝分成两种类型：无隔膜菌丝和有隔膜
6、菌丝。无隔膜菌丝中无隔膜，整团菌丝体就是一个单细胞，其中含有多个细胞核。这是低等真菌（即鞭毛菌亚门和接合菌亚门中的霉菌）所具有的菌丝类型。有隔膜菌丝中有隔膜，被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞，菌丝体由很多个细胞组成，每个细胞内有1 个或多个细胞核。在隔膜上有1 至多个小孔，使细胞之间的细胞质和营养物质可以相互沟通。这是高等真菌（即子囊菌亚门和半知菌亚门中的霉菌）所具有的菌丝类型。为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育的需要，许多霉菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态和组织，这种特化的形态称为菌丝变态。吸器。由专性寄生霉菌如锈菌、霜霉菌和白粉菌等产生的菌丝变态，它们是从菌丝上产生出来的旁
7、枝，侵入细胞内分化成根状、指状、球状和佛手状等，用以吸收寄主细胞内的养料。假根。根霉属霉菌的菌丝与营养基质接触处分化出的根状结构，有固着和吸收养料的功能。菌网和菌环。某些捕食性霉菌的菌丝变态成环状或网状，用于捕捉其它小生物如线虫、草履虫等。菌核。大量菌丝集聚成的紧密组织，是一种休眠体，可抵抗不良的环境条件。其外层组织坚硬，颜色较深；内层疏松，大多呈白色。如药用的茯苓、麦角都是菌核。子实体。是由大量气生菌丝体特化而成，子实体是指在里面或上面可产生孢子的、有一定形状的任何构造。例如有三类能产有性孢子的结构复杂的子实体，分别称为闭囊壳、子囊壳和子囊盘。霉菌有着极强的繁殖能力，而且繁殖方式也是多种多样
8、的。虽然霉菌菌丝体上任一片段在适宜条件下都能发展成新个体，但在自然界中，霉菌主要依靠产生形形色色的无性或有性孢子进行繁殖。孢子有点像植物的种子，不过数量特别多，特别小。霉菌的无性孢子直接由生殖菌丝的分化而形成，常见的有节孢子、厚垣孢子、孢囊孢子和分生孢子。霉菌的孢子具有小、轻、干、多，以及形态色泽各异、休眠期长和抗逆性强等特点，每个个体所产生的孢子数，经常是成千上万的，有时竟达几百亿、几千亿甚至更多。这些特点有助于霉菌在自然界中随处散播和繁殖。对人类的实践来说，孢子的这些特点有利于接种、扩大培养、菌种选育、保藏和鉴定等工作，对人类的不利之处则是易于造成污染、霉变和易于传播动植物的霉菌病害。 由于霉菌的菌丝较粗而长，因而霉菌的菌落较大，有的霉菌的菌丝蔓延，没有 局限性，其菌落可扩展到整个培养皿，有的种则有一定的局限性，直径1-2 厘 米或更小。菌落质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的 蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取；菌落正反面 的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。
