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1、实验二、肠道线虫的检验 21 60% 微生物实验室目的和要求n1.掌握:粪便直接涂片法的原理,透明胶纸 法的原理。 n2.熟悉:粪便直接涂片法、透明胶纸法的操 作要点。n3.了解:粪便直接涂片法、透明胶纸法的注 意事项。材料n载玻片、盖玻片、竹签、生 理盐水、宽2cm透明胶纸带、 显微镜。1.直接涂片法 n为最常见的粪检方法。本法适用于检查蠕 虫卵(蛲虫卵除外)、原虫滋养体。原理:n为了不改变涂片的渗透压而损坏活的病原体, 所以用生理盐水作为粪便的稀释剂,使和粪便 粘在一起的病原体,通过生理盐水的涂抹稀释 作用,成为单个物体分散在涂片中,这样既不 妨碍透光作用,又能暴露病原体的形态结构, 便于
2、我们在镜检中识别它们。方法简便,出结 果快。操作n 1.涂片 在洁净的载玻片中央,滴生理盐水 一滴,用竹签取火柴头大小的粪便,在生理 盐水中混匀,摊开呈薄膜状;其厚度以载玻 片置于报纸上,能透过粪膜隐约辨认玻片下 的字迹为宜。2.显微镜观察n一般在低倍镜下检查,如发现可疑物再转高倍镜 观察。镜检时光线要适当,过强的亮度会影响观 察结果。应注意虫卵与粪便中的异物区别,可依 据虫卵的形状、大小、颜色、卵壳(包括卵盖等 )和内含物等特征加以鉴别。由于雌性蛔虫产卵 量大,该法特别适用于检查蛔虫卵,涂片一张的 检出率约为85%,涂片3张的检出率可达 90%95%。注意事项:n玻片应清洁无油,手持玻片时勿
3、将手指接触玻 片表面,以避免油渍污染;n粪膜厚薄适当,以透过粪膜能见到书本上的字 迹为宜。过厚,光线不宜透过;过薄,则检出率 降低。n观察结果应按一定顺序,以免遗漏,夏天要注 意观察的速度以防粪膜干燥,影响结果的观察;n正确使用显微镜,低倍镜转高倍镜时须注意勿 使粪膜污染镜头(看高倍镜时最好加盖玻片);注意事项:n镜检中发现有意义的成分(如红、白细 胞和夏科-雷登结晶等)应记录;n粪中成分复杂,应加以与寄生虫卵或包 囊以及宿主的组织、细胞成分相鉴别;n检查原虫滋养体时,涂片应稍薄;n用过的竹签、玻片、粪纸包等务必投入 指定的容器内,养成防污染的习惯。2透明胶纸法n适用于蛲虫卵、带绦虫卵的检查。基本原理:n蛲虫雌成虫在患者肛周及会阴部皮肤上产 卵,带绦虫孕节从肛门排出或主动爬出时 ,节片被挤破使虫卵粘附于患者肛周皮肤 上,故利用胶纸粘取虫卵进行检查。操作方法:n将宽2cm的透明胶纸剪成长约6cm的小 段。n将一端向胶面折叠约0.5cm,再贴在干 净的载玻片上。n玻片一端写受检者姓名、编号等。n检查时,将胶纸揭下,用胶面粘贴肛门 周围皮肤,然后将胶面平铺于载玻片上, 低倍镜下检查。注意事项:n清晨起床后,在未排便之前检查;n胶纸与玻片之间有许多气泡时,镜检前 可揭起胶纸,滴少量生理盐水后将胶纸平 铺再镜检。