[医学]血液分析仪及其临床应用

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1、血液分析仪及其临床应用血液分析仪及其临床应用hematology analyzer and clinical application血液分析仪及其临床应用血液分析仪及其临床应用u检测原理 u检测参数 u细胞直方图 u方法学评价 u临床应用 u血液分析仪使用中应注意的问题血液分析仪COULTER COULTER ：细胞分析仪细胞分析仪库尔特基金会提供的相片库尔特基金会提供的相片1 1第一台细胞计数仪第一台细胞计数仪 瓶瓶罐罐瓶瓶罐罐+ +管道管道+ +电极电极+ +示波器示波器血液分析仪发明者库尔特库尔特先生35岁的美国人库尔 特发明了粒子计数 技术；50年代初期，血细 胞计数仪开始应用 于临床

2、。科技为人类健康服 务，热心社会公益 事业。库尔特先生库尔特先生1913-19981913-1998库尔特与李俊的差别库尔特与李俊的差别: :社会价值观的社会价值观的 差别差别日照香炉生紫烟， 疑似熊猫在烧香。06年毒王“熊猫烧 香” 电脑病毒。病毒原始制作者25岁的网络天才李俊。正确社会价值观正确社会价值观: :敬业、爱心、责任感敬业、爱心、责任感一、血液分析仪检测原理血液分析仪检测原理大致分为两类： 电阻抗法（库尔特原理）光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础 ）血液分析仪主要能完成两大功能： 细胞计数功能细胞分类功能 检测原理主要内容1 电阻抗法

3、原理（库尔特原理 ） 库尔特原理与原理图 仪器的主要组成 白细胞检测原理 红细胞检测原理 血小板检测原理 血红蛋白检测原理 2 VCS法原理（一） 电阻抗法原理（库尔特原 理） 1、库尔特原理库尔特原理库尔特原理是利用电阻抗法测 量细胞的数量和体积。其内容为：血 细胞是电的不良导体，当一个细胞通 过计数小孔时，会导致小孔两端电阻 的变化，将其转化成脉冲，感应器通 过检测脉冲的数量及大小，从而计算 出通过小孔的细胞数量及体积。2 2、 库尔特原库尔特原 理图理图细胞计数池 中，小孔内外 两个电极和稀 释液构成一个 电流回路，在 负压作用下， 细胞通过小孔 ，电极能感应 到一个瞬间的 电阻变化，并

4、 将其转换成脉 冲，脉冲的数 量代表细胞数 量，脉冲大小 反映细胞体积 大小。脉冲检测器脉冲检测器3、电阻抗法仪器的主要 组成电阻抗法仪器的主要组成包括：电阻抗法仪器的主要组成包括： 信号发生器（脉冲检测器） 放大器（微伏放大为伏级的脉冲信号） 阈值调节（计数不同细胞有不同阈值） 甄别器（除去假脉冲信号） 整形器（波形调整为标准一致的平顶波） 计数系统（不同脉冲区分出不同细胞并计数）4、白细胞检测原理根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35- 450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群三群 细胞：3590f1 160fl以上 90160f15、电阻抗法红细胞检测原理电阻抗法检测红细胞要注

5、意白细胞增高干扰电阻抗法检测红细胞要注意白细胞增高干扰 ： 稀释血液中含有白细胞，当血液进入红细胞检测通道时，红细胞检测的各项参数中均含有白细胞因素。正常时，血液红细胞与白细胞的比例约为500：1750：l，因此，白细胞因素可忽略不计。 当病理情况下，如白血病时，白细胞数明显增高，同时又伴有贫血时，使所得红细胞参数可产生明显误差。6、红细胞其他参数的检测 MCV D. HCT MCH MCHC E. RDWRDW7、血红蛋白测定原理有关溶血 剂1、ICSH推荐的HICN法：最大吸收峰在540nm。血红蛋白衍生物是HICH-HB，试剂反应时间长，5分钟，不适合全自动仪器。另外，氰化血红蛋白（CN

6、-HB）：试剂成分氰化钾（剧毒） 。 2、非氰化溶血剂（如SDS-HB）： SDS-HB与HICH-HB吸收光谱相似。8、血小板检测原理根据电阻抗法，血小板随红细胞在 一个系统中进行检测，在红细胞血小板 计数池中计数2fl30fl的颗粒。有些仪器专门设置了增加血小板准 确性的技术，如鞘流技术、浮动界标、拟拟 合合曲线曲线等。PLTPLT拟合曲线拟合曲线仪器进行血小板计数时，计数2fl一30fl大小的血小板颗粒数量，再拟 合出一条0fl一70fl的曲线，将小部分小血小板及大血小板包含进去，但拟合 曲线的给出是有条件的，条件不满足时 仪器不能给出拟合曲线。血小板拟合曲线的条件血小板拟合曲线的条件1

7、血小板计数20X109/L2直方图呈现对数正态分布3直方图的峰值在2一15fl范围4PDW20（二）光散射法血液分析仪检测 原理 光散射法组合应用电学、光学、细胞化学多项技术检测血液细胞，可得出较准确的细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞这些测试原理的改进主要体现在对白细胞分类部分的改进分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分群发展为多项技术对白细胞五分类。1、光散射法测试原理改进的四种 类型 激光与细胞化学法 容量、电导、光散射（VCS）法 电阻抗与射频法 多角度偏振光散射法2 2、VCSVCS法原理法原理 应用电阻抗原理测量细胞体积(Volume，V)技术。 应用

8、电导性（Conductivity C）技术。检测的原理是：根据细胞壁能产生高频电流的性能，采用高频电磁探针，测量细胞内部结构，即以细胞核和细胞质的比例、细胞内颗粒的大小和密度，来辨别体积相同、但性质不同的两个细胞群体，如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。2、VCS法原理 应用光散射(Light scatter，S)技术。原理是：来自激光源的单色光直接扫描进入计数敏感区的每一个细胞，根据细胞产生不同角度的散射光(10一70)，可提供细胞形态、核结构等光散射信息，并能鉴别细胞颗粒的构型和质量，光散射可区别粒细胞(中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞)的类型。3、VCS法白细胞分类散点图二、 检测参数血液分

9、析仪一般能检测20余项参数，功 能较全的仪器最多的能检测40余项参数。常见 血液分析检测报告的术语及英文缩写词。见下 表：血液分析检测报告用语及英文缩 写词 血液分析检测报告用语及英文缩 写词血液分析检测报告用语及英文缩 写词三、血细胞直方图 1、血细胞直方图概念血细胞直方图概念：在细胞通过小孔计数时，感应器收集脉冲的大小及数量，转换为相应的细胞体积和数量 ，并在坐标上表示出来。坐标的横轴(x)代表体 积(FL)，纵轴(Y)代表相对数量，将各点用光滑 的曲线相连，就是直方图。即直方图是可以表示出细胞群体体积分布情况的图形。2 2、细胞直方图作用、细胞直方图作用 为临床提供直观的检验结果。 为检

10、验人员监控仪器工作状态及检测结果提供了直观的图形。注意注意：不同类型仪器直方图的图形也有差异 。三种细胞血细胞直方 图 白细胞直方图 红细胞直方图 血小板直方图电阻抗型血液分析仪白细胞直方 图 在35450fL范围内将白细胞分为3群 。异常直方图通常的含义异常直方图通常的含义1、淋巴细胞峰左侧区域异常：可能有血小板 聚集、巨大血小板、有核红细胞、未溶解红 细胞、蛋白质或脂类颗粒。 2、淋巴细胞峰与单核细胞区之间区域异常： 可能有异型淋巴细胞、浆细胞、非典型细胞 、原始细胞、嗜酸性粒细胞增多、嗜碱性粒 细胞增多。异常直方图通常的含义异常直方图通常的含义3、单核细胞区与中性粒细胞峰之间区域异常 ：

11、可能有未成熟的中性粒细胞、异常细胞亚群、嗜酸性粒细胞增多。 4、中性粒细胞峰右侧区域异常：表示中性粒细胞绝对值增多。 5、出现多部位报警：表示同时存在2种或2种以上的异常红细胞直方图概念在36-360fl范围 内分析红细胞，正常 红细胞主要分布在50 -200fl。正常直方图上可 见两个细胞群体：50 -125fl区域有一个几 乎两侧对称、较狭窄 的正态分布曲线；主 峰右侧约在125- 200fl区域的细胞， 为大红细胞和网织红 细胞。 血小板直方图电阻抗法在2-30fl范围内分析PLT，但大 多数在2-15fl范围，正常血小板直方图，呈现 左偏正态分布。四、 方法学评价 仪器类型和特点 仪器

12、性能的评价 影响直方图变化的因素（一）仪器类型和特点（一）仪器类型和特点 1单纯电阻抗法三分群血液分析仪特点 (1)检测参数： 约20项左右。(2)白细胞分类：只能对白细胞进行三分群。(3)直方图： 3种直方图。(4)报警功能： 以文字和(或)图标提示异常检测结果的信息。（一）仪器类型和特点2.综合光学和电学等技术血液分析仪特点 (1)检测参数： 约20至40项左右 (2)白细胞分类：能对白细胞进行五分类。 (3)直方图和散点图：3种直方图和散点图。 (4)报警功能： 以文字和(或)图标显示异常检测结果的信息。 注意：各类型血液分析仪不具备识别异常细胞注意：各类型血液分析仪不具备识别异常细胞形

13、态的能力，故不能完全代替镜检。形态的能力，故不能完全代替镜检。 （二）仪器性能的评价ICSH公布的对血液分析仪评价方案 ： 1 可比性2 准确性3 总重复性4 精密度5 线性范围(三) 影响直方图变化的因素1.仪器因索：仪器的阈值、孔电压和脉冲的增益等都与脉冲大小有关系。 2.试剂因素：稀释液导电率、渗透压、离子强度；溶血剂的种类、浓度、用量和溶血时间。 3.人员技能人员技能：先进仪器的应用，必须有一套全面质量管理措施，也必须有高素质的技术人员(结果可靠性结果可靠性、仪器寿命、故障发生频率，、仪器寿命、故障发生频率，直接与操作人员的素质有关。直接与操作人员的素质有关。)五、临床应用直方图的临床

14、应用直方图的临床应用（一）血小板直方图的临床应用由于红细胞与血小板的检测在同一通道，小红细胞和细胞碎片，血小板自身的聚集对血小板计数及平均血小板体积的影响很大，血小板直方图能反映这些变化，可根据图形的变化，了解血小板计数的准确性。正常血小板直方图异常血小板直方图峰右移峰右移左右侧起点较高左右侧起点较高异常血小板直方图右侧呈脱尾状右侧呈脱尾状峰左移峰左移直方图的临床应用(二) 红细胞直方图在贫血中的应用 不同贫血红细胞体积的变化，使红细胞体积分布图形发生变化，结合其它参数对鉴别诊断颇有价值（根据（根据MCVMCV和和RDWRDW可对贫可对贫血进行分类）：血进行分类）：1 1 小细胞性贫血2 大细

15、胞性贫血3 正细胞性贫血红细胞直方图有关的两个参数红细胞直方图有关的两个参数红细胞直方图有关两个参数是MCV，RDW1、MCV表示红细胞平均体积，MCV变大，红细胞峰右移；MCV变小，红细胞峰左移。2、RDW RDW由血细胞分析仪测量获得，是反映周围血 红细胞体积异质性的参数，它的统计学实质是 红细胞大小的变异系数(CV)。当红细胞通过小 孔的一瞬间，计数电路得到一个相应大小的脉 冲，不同大小的脉冲信号分别贮存在仪器内装 计算机的不同通道，计算出相应的体积及细胞 数，统计处理而得RDW。 在MCV相似的情况下，RDW越大，红细胞峰就越宽。小细胞性 贫血（1）RDW轻度 （2）RDW正常小细胞性

16、贫血RDW明显 也见于IDA 治疗有效时大细胞性贫血（RDW正常）见于溶贫 白血病前期 再障 巨幼贫大细胞性贫血（ RDW轻度 ）见于叶酸， 维生素B12缺乏 引起的巨幼贫大细胞性贫血（RDW明显） 见于巨幼贫 叶酸， 维生素B12 治疗初期正细胞性贫血（RDW正常）见于慢性病 急性失血 骨髓纤维化 骨髓发育不良正细胞性贫血（ RDW轻度 ）见于HB异常 ， 骨髓纤维化(三)白细胞直方图的临床应用白细胞直方图的变化，可评价血液中白 细胞群体的变化，但这种变化的细胞图并无特 异性，某一类白细胞的增多或减低均可使直方 图产生相似的变化。因此，异常白细胞直方图只能提示白细 胞分群之间比例变化或可能出现异常细胞，故 要求用显微镜复查血涂片。异常白细胞