ELSD检测器的选择和主要的应用介绍

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1、ELSD检测器的选择和主要的应用介绍AWENCE上海埃纹斯AWENCE科技贸易有限公司发展简介 美国奥泰公司(Alltech)是色谱仪器配件及耗材的主要供应商被称 为“色谱超市”。从事ELSD的研发和生产将近30年。 美国奥泰公司(Alltech)于2004年8月并入Grace公司，隶属于三大 分支之一的Davison旗下的探索科技部门。 Davison是全球最大的硅胶生产商，能够为LC,GC和LC的应用提供从 小规模研发到大规模工业生产的一站式解决方案。 原美国奥泰科技(中国)有限公司2004年以前主要通过上海庞迪在做 中国市场，上海庞迪后改为上海埃纹斯科贸有限公司。AWENCEAWENCE

2、 从分析到制备的解决方案HPLC和GC柱，配件和仪器硅胶基色谱填料HPLC毛细柱和微径柱 HPLC柱和小型仪器 制备级和工业级LC柱和装柱服务 生物分离专用HPLC柱和填料 AWENCEHPLC液相系统及输液泵大纲 常规检测器的回顾 ELSD的检测原理 ELSD与常规检测器的比较 ELSD在分析上的优点 Alltech ELSD的介绍 ELSD的维护 质量保证 总结AWENCE其它检测器的介绍- 紫外可见UV/Vis- 示差折光RI- 荧光Fluorescence- 质谱Mass Spectrometry检测器是高效液相色谱（HPLC）的核心部件之一，被喻为 HPLC的眼睛。它的作用是将色谱柱

3、流出物中样品含量的变 化转换为可供观测的信号，通常是转换为电信号，以便自 动记录下来进行定性定量分析。AWENCE检测器的应用分布紫外可见 65%示差和蒸发光10%电化学10%荧光8%质谱4%其它3%AWENCE紫外/可见检测器UV/VIS优点： 易于操作 可靠性 费用相对低廉 溶剂梯度兼容 对样品没有破坏性 相对灵敏度高局限性： 没有好的发光基团 的化合物响应较差 溶剂的使用上受紫 外截止波长的限制AWENCE荧光检测器Fluorescence优点： 很好的灵敏度 很好的选择性 受流速和温度的变 化影响很小局限性：线性范围窄操作复杂-需要对化合物和仪 器的变化了解透彻某些物质如氧气会熄灭荧光

4、- 必须严格脱气能够自然产生荧光的化合物 不是很多衍生方法复杂AWENCE示差折光检测器RI优点：通用性-对几乎 所有的物质具有 相应宽的动态线性范 围-104易于操作局限性:检测灵敏度不高对于温度和压力的波动敏 感平衡慢检测既有正峰也有负峰不能进行梯度洗脱流动相预先混合后的效果 好于泵在线混合的AWENCE质谱 MS优点:灵敏度高选择性好提供化学结构信息局限性:购买费用高操作复杂需要经常维护定量分析困难AWENCE蒸发光散射检测器ELSD发展历史检测原理局限性优点在分析中的应用AWENCE发展历史: 第一台商业化的产品出现在80年代初期 最早的应用集中在聚合物的分析上 90年代初期，更多其它

5、方面的应用 目前,应用在广泛的领域AWENCEELSD行业超过26年的领先制造经验:500 型2000 型800 型2000ES型3300 型AWENCE独特的检测方法：检测三部曲: 雾化 溶剂的蒸发 检测ELSDELSD可以对所有挥发性低于流动相的物质作出可以对所有挥发性低于流动相的物质作出 准确检测，而与被检测物质的化学基团关系不大准确检测，而与被检测物质的化学基团关系不大 ，物理性质类似的物质响应一致，响应值与样品，物理性质类似的物质响应一致，响应值与样品 的质量成正比。的质量成正比。AWENCE第一步：雾化 色谱柱流出物通过喷 雾器针孔 与氮气混合 形成均匀的雾状液滴 (气溶胶)AWE

6、NCE第二步：溶剂的蒸发 液滴通过加热的漂移管 流动相蒸发 干燥的样品颗粒保留AWENCE第三步：检测 样品颗粒通过流动池 激光“撞击”颗粒被散射 光电二极管检测散射光检测角度为90，避免虚假 信号(90折射/衍射光；90反射光)AWENCE两种类型气溶胶处理方式：A型-所有液滴进入漂移管及流动池(又称为 “无气溶胶分流 No Aerosol Splitting”)B型-部分液滴分流排掉；只有一部分进入 漂移管及流动池(“气溶胶分流Aerosol Splitting”)AWENCEA型ELSD-气溶胶不分流操作 所有样品从喷雾器进 入漂移管及流动池 需要较高温度才能完 全蒸发流动相； A型EL

7、SD只有不分流 一种操作模式AWENCEB型ELSD-气溶胶分流操作 部分样品被排掉 较低的温度已足 够蒸发所有溶剂 B型ELSD只有分流 一种操作模式AWENCEAlltech 2000(ES)型ELSD唯一提供两种操作模式的ELSD，在任何流动 相及样品分析条件下均达到最佳结果AWENCE一台仪器，两种操作模式： 撞击器(Impactor)关-所有液滴进入漂移管及流 动池(A型ELSD-无分流) 撞击器(Impactor)开-部分液滴被排除，只有一 部分进入漂移管及流动池(B型ELSD-气溶胶分流) 采用新型专利“气溶胶分流技术”US Patent #6229605 AWENCE撞击器关模

8、式 撞击器与气溶胶流向平行 所有样品流过漂移管到达流通池 最适用于非挥发性样品及挥发性溶剂(大部分为有机)Drive ShaftNebulizerOpticsImpactor OffNebulizerDrive ShaftImpactor OffOpticsExhaustDrift TubeNebulizerImpactorDrainAWENCE撞击器开模式 撞击器垂直于气溶胶流向，部分液滴碰上撞击器从废 液管排掉;其余穿过撞击器，经过漂移管到达流动池 最适用于半挥发性样品及低挥发性溶剂(大部分为水 溶液)Drive ShaftNebulizerImpactor OnOpticsNebuliz

9、erDrive ShaftImpactor OnNebulizerDrainImpactorDrift TubeExhaust OpticsAWENCE撞击器关-最适合非挥发性样品Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10m, 300x6.5mm Mobile Phase: 100% Water Flowrate:0.5mL/min1. 蜜三糖 (50g/mL) 2. 乳糖(50g/mL) 3. 葡萄糖 (50g/mL) 4. 甘露糖 (50g/mL)Column: Alltech 700CH Carbohydrate Column 10m, 30

10、0x6.5mm Mobile Phase: 100% Water Flowrate:0.5mL/min# 9206# 9205Impactor OnImpactor Off碳水化合物非挥发性样品在撞击器“关”的情况下也不挥发，全部进入流动池，得 到最高灵敏度 AWENCE撞击器关-最适合挥发性溶剂有机溶剂在较低温度蒸发，在撞击器“关”的情况下，也会完全蒸发 ，B型ELSD 任何条件下均分流，造成样品损失，降低检测灵敏度Column: Alltech Econosphere, C18, 5m, 150 x 4.6 mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) F

11、lowrate:0.8mL/minColumn: Alltech Econosphere, C18, 5m, 150 x 4.6 mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate:0.8mL/min1. n-癸基-b-D-吡喃糖苷 (5g/mL) 2. n-辛基-b-D-吡喃糖苷 (5g/mL) 3. n-十二烷基-b-D-吡喃糖苷(5g/mL)葡萄糖苷分析Impactor OnImpactor Off# 9180# 9179AWENCE撞击器开-最适合半挥发性样品在撞击器开情况下，可以较低温蒸发溶剂，防止半挥发性样 品蒸发防腐剂分析Column

12、: Alltech Econosphere, C18, 5m, 150 x 4.6 mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate:0.8mL/minColumn: Alltech Econosphere, C18, 5m, 150 x 4.6 mm Mobile Phase: Methanol:Water (90:10) Flowrate:0.8mL/min1. 羟基苯甲酸甲酯 2. 羟基苯甲酸乙酯 3. 羟基苯甲酸丙酯 4. 羟基苯甲酸丁酯# 9202Impactor OffImpactor On# 9201AWENCE撞击器开-在几乎室温

13、下检测半挥发样品Column:Prevail Carbohydrate ES, 5m, 250 x 4.6mm Mobile Phase: Acetonitrile: 0.04% Ammonium Hydroxide (80:20) Flowrate: 1.0mL/min 1. Glycerol甘油AWENCEELSD的局限性1. 只能使用挥发性的流动相2. 样品的挥发性必须要小于流动相3. 检测器响应是非线性的AWENCE挥发性的流动相改性剂#1Volatile Mobile Phase ModifierspKapKbpH RangeBPMPAcidsTrifluoroacetic Acid

14、三氟乙酸0.313.7072.4CFormic Acid甲酸3.7510.25100.7CAcetic Acid醋酸4.759.25116.0CCarbonic Acid碳酸6.377.63BasesAmmonia氨水9.254.75-33.35CMethylamine甲胺10.813.1916.6CEthylamine二乙胺10.663.34-6.3CTriethylamine三乙胺11.012.9989.3CBuffersAmmonium Formate甲酸胺3.0-5.0120CPyridinium Formate甲酸吡啶翁3.0-5.0Ammonium Acetate乙酸胺3.8-5.

15、8111CPyridinium Acetate乙酸吡啶翁4.0-6.0 Ammonium Carbonate (for reverse phase) 碳酸胺(用于反相)8.0 (adjusted)Ammonium Carbonate碳酸胺5.5-7.5 and 9.3-11.3AWENCE挥发性的流动相改性剂#2Volatile Mobile Phase ModifierspKapKbpH RangeBPMP Ion-Pair Reagents Pentafluoropropionic Acid五氟丙酸0.696-97CHeptafluorobutyric Acid七氟丁酸0.6120CNonafluoropentanoic Acid九氟戊酸140CPentadecafluoroocatanoic Acid十五氟辛酸0.6189C Tridecafluoroheptanoic Acid十三氟庚酸0.6 175CAWENCE载气流速与漂移管温度载气流速和漂移管温度是载气流速和漂移管温度是ELSDELSD中可以调节的两个中可以调节的两个 重要参数，建立适当的重要参数，建立适当的HPLC-ELSDHPLC-ELSD分析方法需要分析方法需要 对这两个参数进行优化。对这两个参数进行优化。优化的原则是降低噪声到可以接受的程度，并尽优化的原则是降低噪声到可以接受的程度，并尽 量提高信噪比。量