《人教版教学课件蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人教版教学课件蛋白质还原糖脂肪的鉴定实验（10页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、生物组织中还原糖脂 肪和蛋白质的检测 杨启虎1、实验原理：（1）斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：由蓝色 变成砖红色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖 存在与否，而不能鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果 糖是还原糖。（2）苏丹染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹染液 遇脂肪的颜色反应为红色。（3）双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 gmL的氢氧化钠 溶液和质量浓度为0.01 gmL的硫酸铜溶液。蛋白质可与 双缩脲试剂产生紫色反应。2、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 3、实验选材： （1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色 为白色的植物组织，如苹果
2、、梨。（因为组织的颜色较 浅，易于观察。） （2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花 生种子为最好，实验前一般要浸泡34小时（也可用蓖 麻种子）。 （3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或 鸡蛋清。4、实验试剂斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和 乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液 和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。5、方法步骤： （）可溶性还原糖糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问问 题题
3、解 释释 1. 制备组织样备组织样 液。 （去皮、切块块、研磨、过过 滤滤） 苹果或梨组织组织 液必须临须临 时时制备备 因苹果多酚氧化酶含量高，组组 织织液很易被氧化成褐色，将 产产生的颜颜色掩盖。 2. 取1支试试管，向试试管内注 入2mL组织样组织样 液。 3. 向试试管内注入1mL新制的斐林试剂试剂 ，振荡荡。 应应将组组成斐林试剂试剂 的甲 液、乙液分别别配制、储储存 ，使用前才将甲、乙液等 量混匀成斐林试剂试剂 ； 切勿将甲液、乙液分别别加 入苹果组织样组织样 液中进进行 检测检测 。 斐林试剂试剂 很不稳稳定，甲、乙 液混合保存时时，生成的Cu ( OH ) 2在7090下分解成
4、黑 色CuO和水； 甲、乙液分别别加入时时可能会 与组织样组织样 液发发生反应应，无Cu ( OH ) 2生成。 4. 试试管放在盛有50-65温 水的大烧烧杯中，加热约热约 2分 钟钟，观观察到溶液颜颜色：浅 蓝蓝色 棕色 砖红砖红 色（ 沉淀） 最好用试试管夹夹夹夹 住试试管 上部，使试试管底部不触及 烧烧杯底部，试试管口不朝向 实验实验 者。防止试试管内的溶液冲出试试管 ，造成烫伤烫伤 ； 操 作 方 法注 意 问 题解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些 子叶薄片，将薄片放在载玻片 的水滴中，用吸水纸吸去装片 中的水。干种子要浸泡34 小时，新花生 的浸泡时间可 缩短。因为浸泡时间短，不
5、易切片， 浸泡时间过长，组织较软 ，切下的薄片不易成形。 切片要尽可能薄些，便于 观察。 在子叶薄片上滴23滴苏丹或苏 丹染液，染色1分钟。染色时间不宜过长 。用吸水纸吸去薄片周围染液，用 50%酒精洗去浮色，吸去酒精 。酒精用于洗去浮色，不洗去浮 色，会影响对橘黄色脂肪 滴的观察。同时，酒精是 脂溶性溶剂，可将花生细 胞中的脂肪颗粒溶解成油 滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴 上12滴蒸馏水，盖上盖玻片 。滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处，可看到细胞中有染成橘 黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇 中。（）脂肪的鉴定 （）蛋白质
6、的鉴定 操 作 方 法注 意 问 题解 释制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过 滤。）黄豆浸泡1至2天，容易研磨成 浆，也可购新鲜豆浆以节约 实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管 中，加入双缩脲试剂A， 摇匀；再加入双缩脲试 剂B液34滴，摇匀，溶 液变紫色。A液和B液也要分开配 制，储存。鉴定时先 加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋 白质反应提供一个碱性的环 境。A、B液混装或同时加入 ，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应 的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。蛋清要先稀释。如果稀释不够，在实验中蛋清 粘在
7、试管壁，与双缩脲试剂 反应后会粘固在试管内壁上 ，使反应不容易彻底，并且 试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml待测组织样 液，向试管内滴加2滴碘 液，观察颜色变化。碘液不要滴太多以免影响颜色观察6、讨论:v(1)选取富含还原糖的生物材料时,能用甘蔗或者橘子吗?为 什么?v答:不行.橘子本身富含色素,会掩盖颜色反应的结果;而甘蔗 不含还原糖,蔗糖不是还原糖.v(2)斐林试剂和双缩脲试剂有哪些区别？va溶液浓度不同:斐林试剂中CuSO4溶液为0.05g/ mL,v 双缩脲试剂中CuSO4溶液为0.01g/ mLvb使用原理不同:斐林试剂实质是新制Cu(OH)2沉淀,v 双缩脲试剂实质是碱性条件下的Cu2+vc使用方法不同: 斐林试剂使用时,先把NaOH溶液和 CuSO4溶液混合,然后立即使用;双缩脲试剂是先加NaOH 溶液,然后再加入3至4滴CuSO4溶液7、练习与巩固(1)检查尿液中有无葡萄糖,下列试剂中可选用的是( ) A.斐林试剂 B.碘液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺(2)下列生物材料中，可用于还原糖鉴定的是( ) A.柑橘 B.苹果 C.新鲜肝脏 D.甘蔗AB
