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2、程的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员 之间，CHPKs 对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表 达系统体外表达马立克氏病病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋 白激酶，成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 rBac-His 三种重组杆 状病毒，同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进行优化，确定了 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于 Bac-to- Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDV
3、UL13 蛋白激酶的生物学 功能提供必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究 MDVUL13 蛋白激酶对 MDV 生长的影响，结果发现：MDVUL13 蛋白激酶对 RB-1B 病毒空斑大小的形成无 明显影响。 利用基因免疫法制备抗 MDVUL13 全长蛋白的多克隆抗体，并利用 不同方法制备的抗 MDVUL13 蛋白激酶的抗体对 MDVUL13 蛋白激酶进行了细胞内 表达的检测，同时应用绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein，GFP)与 UL13 蛋白激酶融合表达进行 UL13 蛋白激酶的进一步细胞内定位，证明了 MDVUL13 蛋 白激酶定位于细胞核内。正文内容正文内容
4、利用 Bac-to-Bac()真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物 活性的外源蛋白，是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性 蛋白激酶(conservedherpesvirusproteinkinases,CHPKs)在疱疹病毒生长复制 过程的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员之 间，CHPKs 对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表达 系统体外表达马立克氏病病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋白 激酶，成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 r
5、Bac-His 三种重组杆状 病毒，同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进行优化，确定了 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于 Bac-to- Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDVUL13 蛋白激酶的生物学 功能提供必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究 MDVUL13 蛋白激酶对 MDV 生长的影响，结果发现：MDVUL13 蛋白激酶对 RB-1B 病毒空斑大小的形成无 明显影响。 利用基因免疫法制备抗 MDVUL13 全长蛋白的多克隆抗体，并利用 不同方法制备的抗 MDVUL13 蛋白激酶的抗体对 MD
6、VUL13 蛋白激酶进行了细胞内 表达的检测，同时应用绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein，GFP)与 UL13 蛋白激酶融合表达进行 UL13 蛋白激酶的进一步细胞内定位，证明了 MDVUL13 蛋 白激酶定位于细胞核内。 利用 Bac-to-Bac()真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性 的外源蛋白，是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白 激酶(conservedherpesvirusproteinkinases,CHPKs)在疱疹病毒生长复制过程 的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员之间， CHPKs 对
7、病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表达系统 体外表达马立克氏病病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋白激酶， 成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 rBac-His 三种重组杆状病毒， 同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进行优化，确定了 UL13 蛋白 和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于 Bac-to-Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDVUL13 蛋白激酶的生物学功能提供 必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究 MDV
8、UL13 蛋白激酶对 MDV 生长 的影响，结果发现：MDVUL13 蛋白激酶对 RB-1B 病毒空斑大小的形成无明显影 响。 利用基因免疫法制备抗 MDVUL13 全长蛋白的多克隆抗体，并利用不同方 法制备的抗 MDVUL13 蛋白激酶的抗体对 MDVUL13 蛋白激酶进行了细胞内表达的 检测，同时应用绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein，GFP)与 UL13 蛋白激 酶融合表达进行 UL13 蛋白激酶的进一步细胞内定位，证明了 MDVUL13 蛋白激酶 定位于细胞核内。 利用 Bac-to-Bac()真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性 的外源蛋白，
9、是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白 激酶(conservedherpesvirusproteinkinases,CHPKs)在疱疹病毒生长复制过程 的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员之间， CHPKs 对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表达系统 体外表达马立克氏病病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋白激酶， 成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 rBac-His 三种重组杆状病毒， 同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进
10、行优化，确定了 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于 Bac-to-Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDVUL13 蛋白激酶的生物学功能提供 必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究 MDVUL13 蛋白激酶对 MDV 生长 的影响，结果发现：MDVUL13 蛋白激酶对 RB-1B 病毒空斑大小的形成无明显影 响。 利用基因免疫法制备抗 MDVUL13 全长蛋白的多克隆抗体，并利用不同方 法制备的抗 MDVUL13 蛋白激酶的抗体对 MDVUL13 蛋白激酶进行了细胞内表达的 检测，同时应用绿色荧光蛋白(GreenFluoresce
11、ntProtein，GFP)与 UL13 蛋白激 酶融合表达进行 UL13 蛋白激酶的进一步细胞内定位，证明了 MDVUL13 蛋白激酶 定位于细胞核内。 利用 Bac-to-Bac()真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性 的外源蛋白，是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白 激酶(conservedherpesvirusproteinkinases,CHPKs)在疱疹病毒生长复制过程 的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员之间， CHPKs 对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表达系统 体外表达马立克氏病
12、病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋白激酶， 成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 rBac-His 三种重组杆状病毒， 同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进行优化，确定了 UL13 蛋白 和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于 Bac-to-Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDVUL13 蛋白激酶的生物学功能提供 必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究 MDVUL13 蛋白激酶对 MDV 生长 的影响，结果发现：MDVUL13 蛋白激酶对 RB-1B
13、病毒空斑大小的形成无明显影 响。 利用基因免疫法制备抗 MDVUL13 全长蛋白的多克隆抗体，并利用不同方 法制备的抗 MDVUL13 蛋白激酶的抗体对 MDVUL13 蛋白激酶进行了细胞内表达的 检测，同时应用绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein，GFP)与 UL13 蛋白激 酶融合表达进行 UL13 蛋白激酶的进一步细胞内定位，证明了 MDVUL13 蛋白激酶 定位于细胞核内。 利用 Bac-to-Bac()真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性 的外源蛋白，是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白 激酶(conservedherpes
14、virusproteinkinases,CHPKs)在疱疹病毒生长复制过程 的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员之间， CHPKs 对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表达系统 体外表达马立克氏病病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋白激酶， 成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 rBac-His 三种重组杆状病毒， 同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进行优化，确定了 UL13 蛋白 和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于
15、Bac-to-Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDVUL13 蛋白激酶的生物学功能提供 必需的研究材料。通过体外蛋白摄入的方法研究 MDVUL13 蛋白激酶对 MDV 生长 的影响，结果发现：MDVUL13 蛋白激酶对 RB-1B 病毒空斑大小的形成无明显影 响。 利用基因免疫法制备抗 MDVUL13 全长蛋白的多克隆抗体，并利用不同方 法制备的抗 MDVUL13 蛋白激酶的抗体对 MDVUL13 蛋白激酶进行了细胞内表达的 检测，同时应用绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein，GFP)与 UL13 蛋白激 酶融合表达进行 UL13 蛋白激酶的进一步
16、细胞内定位，证明了 MDVUL13 蛋白激酶 定位于细胞核内。 利用 Bac-to-Bac()真核表达系统体外过表达并纯化得到具有较高天然生物活性的外源蛋白，是进行蛋白质功能研究采用的方法之一。疱疹病毒科保守性蛋白 激酶(conservedherpesvirusproteinkinases,CHPKs)在疱疹病毒生长复制过程 的生物学作用一直是疱疹病毒研究的热点，然而在不同疱疹病毒科成员之间， CHPKs 对病毒的生长复制的影响不同。本研究利用 Bac-to-Bac()真核表达系统 体外表达马立克氏病病毒(Marek#39;sdiseasevirus,MDV)UL13 蛋白激酶， 成功构建了 rBac-His-UL13，rBac-His-EGFP 和 rBac-His 三种重组杆状病毒， 同时通过对 UL13 蛋白和 EGFP 蛋白表达和收获条件进行优化，确定了 UL13 蛋白 和 EGFP 蛋白的最佳表达条件和蛋白收获时间。初步建立基于 Bac-to-Bac()HT 载体的真核表达蛋白质纯化平台，为研究 MDVUL13 蛋白激
